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    Análise do potencial anticâncer de extratos obtidos de esponjas marinhas de Fernando de Noronha
    (Universidade Federal de São Paulo, 2021-03-29) Santos, Letícia Schmitz Saraiva [UNIFESP]; Jimenez, Paula Christine [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4248251483705135; http://lattes.cnpq.br/4552158300334014; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    A natureza vem contribuindo há tempos com recursos e inspirações para busca de compostos com funções terapêuticas. Sobretudo, o oceano tem demonstrado ser um ambiente de grande significância nestas descobertas devido à biodiversidade extremamente rica presente. As esponjas marinhas figuram entre os grupos de organismos mais estudados por seu potencial farmacológico, sendo inclusive representadas por dois dos oito medicamentos aprovados para tratamento de câncer (Ara-C e Mesilato de eribulina). Com a rica biodiversidade brasileira e a grande necessidade mundial por tratamentos anticâncer mais eficazes e com menos efeitos colaterais, o objetivo deste estudo foi investigar o potencial de extratos obtidos de esponjas marinhas coletadas no Arquipélago de Fernando de Noronha, através da avaliação da atividade citotóxica dos extratos obtidos em células tumorais em cultura. No capítulo I realizou-se um estudo bioprospectivo. Para tanto, exemplares de 47 esponjas foram coletadas no ano de 1998 em diversos locais do Arquipélago, classificadas taxonomicamente e extraídas em solvente orgânico, dando origem aos respectivos extratos brutos. Destes, 39 extratos brutos foram submetidos à avaliação qualitativa de sua citotoxicidade em duas linhagens de células tumorais humanas em cultura: HCT116 (carcinoma colorretal) e MCF-7 (adenocarcinoma mamário) pelo ensaio de MTT. Os resultados obtidos através desta triagem selecionaram, para abordagem quantitativa, as amostras com porcentagem de ao menos 75% de inibição do crescimento celular na presença de concentrações de 5 e 50 μg/mL dos extratos. Dos 39 testados contra as células HCT-116, aproximadamente 46% mostraram-se ativos, enquanto por volta de 29% dos 34 testados demonstraram resultados promissores contra MCF-7. Entre os extratos ativos, o FN98-017 obtido da espécie Ectyoplasia ferox foi considerado promissor e selecionado para prosseguir em investigação, realizado no capítulo II deste estudo. Para tanto, foi realizado o fracionamento bioguiado deste extrato, identificando a partição But P e a fração F16 como as amostras mais citotóxicas. Estas amostras ainda se apresentaram citotóxicas contra linhagens tumorais de diversas origens histológicas. Mais além, foram submetidas à verificação dos respectivos efeitos sobre a viabilidade celular e quanto à indução de alterações morfológicas, buscando gerar evidências para aprofundar o conhecimento do modo de ação destas amostras. A partir destas análises, é possível sugerir que But P e F16 são capazes de disparar o processo de apoptose celular, logo, mostram-se promissoras para estudos mais aprofundados sobre os seus efeitos anticâncer.
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    Bioprospecção de actinobactérias recuperadas de sedimento marinho na ilha de Queimada Grande com potencial anticâncer
    (Universidade Federal de São Paulo, 2022-07-25) Farias, Evelyn da Cruz [UNIFESP]; Jimenez, Paula Christine [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4248251483705135; http://lattes.cnpq.br/7936986715655214; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    O uso de substâncias naturais como forma de tratamento de diversas doenças está em vigor até os dias atuais. E embora o meio marinho seja conhecido pela vasta biodiversidade de microrganismos, somente no século passado houve um enfoque maior em pesquisas relacionadas a bioprospecção de microrganismos com potencial farmacológico, principalmente potencial anticâncer, por ser uma das doenças que mais assolam a humanidade. Nesse aspecto, as actinobactérias são conhecidas como uma fonte quase que inesgotável de recursos biotecnológicos, pois possuem metabólitos secundários que podem ser utilizados como agentes antitumorais, o que nos mostra a importância de estudos nessa temática. O Brasil, em particular, é dotado de uma rica flora e fauna, especialmente em áreas insulares, pois o processo de especiação é mais acentuado nessas regiões, e apesar da abundante riqueza de espécies, esse ambiente carece de exploração. Neste contexto, o objetivo do presente trabalho é prospectar o potencial anticâncer de actinobactérias recuperadas de sedimento marinho coletado no entorno da Ilha da Queimada Grande, no litoral de São Paulo. Foram recuperadas, isoladas e purificadas 12 cepas de actinobactérias, das quais foram obtidos os extratos em meio sólido e líquido que, posteriormente, foram testados quanto à citotoxicidade contra células da linhagem tumoral humana HCT-116 pelo ensaio do MTT. Dentre os 20 extratos obtidos e testados, dois se mostraram mais ativos, sendo aqueles obtidos em meio líquido das cepas BRB 537 e BRB 558, inibindo pelo menos 75% do crescimento das células após 72h de exposição a 50 μg/mL. Por fim, estes extratos foram submetidos a uma análise quantitativa de citotoxicidade, visando determinar o valor respectivo de IC50 contra HCT-116, que foi calculado em 7,04 μg/mL e 27,59 μg/mL, respectivamente. Esses resultados evidenciam o potencial anticâncer de actinobactérias recuperadas do sedimento marinho da ilha de Queimada Grande.
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    Efeitos da fotobiomodulação associada a compósitos de espongina extraídas de esponjas marinhas e BIOSILICATO® durante o processo de reparo ósseo
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2019-11-25) Vale, Giovanna Caroline Aparecida do [UNIFESP]; Parisi, Julia Risso; Renno, Ana Claudia Muniz [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4106611304688552; http://lattes.cnpq.br/8381387907441685; http://lattes.cnpq.br/0126906190533786; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Fraturas que acometem o sistema ósseo vêm aumentando significativamente, relacionando- se a um elevado custo socioeconômico e altos índices de morbidade e mortalidade. Nesse contexto, a engenharia do tecido ósseo vem desenvolvendo novos biomateriais e recursos terapêuticos para aperfeiçoar o reparo ósseo. Dentre os métodos de tratamento destaca-se o uso da fotobiomodulação (PBM) associada à utilização de biomateriais. Além disso, o ecossistema marinho é um ambiente amplamente rico para o fornecimento de matéria prima para desenvolver produtos biotecnológicos a serem utilizados no reparo ósseo. Um dos organismos marinhos alvo são as esponjas marinhas, que possuem em seu esqueleto um componente orgânico, nomeada de espongina (SPG), que apresenta propriedades em potencial para otimizar o reparo ósseo. Ainda, o Biosilicato (BS) é uma vitrocerâmica que apresenta resultados efetivos e promissores durante o processo de reparo ósseo. Desta forma, o objetivo deste projeto foi avaliar através de testes in vivo os efeitos da PBM associado ou não a compósitos de BS/SPG no reparo de defeitos ósseos induzidos na calota craniana de ratos. Para isso, foram utilizados 48 ratos Wistar submetidos ao procedimento cirúrgico para realização do defeito ósseo, distribuídos em 3 grupos experimentais: Grupo CG: os animais foram submetidos ao defeito ósseo, não receberam nenhum tipo de tratamento; Grupo BS/SPG: os animais foram submetidos ao defeito ósseo e receberam o implante de Biosilicato®/Espongina; Grupo BS/SPG + PBM: os animais foram submetidos ao defeito ósseo, receberam o implante de Biosilicato®/Espongina e também ao tratamento com fotobiomodulação. Os parâmetros utilizados na fotobiomodulação foram: 808 nm; 30 mW; 1,07 W/cm2; 30 J/cm2 e 28 segundos. Ainda, os animais foram eutanasiados 15 e 45 após o procedimento cirúrgico. Foram realizadas as análises de histopatologia, morfometria e imunoistoquímica. A análise histopatológica demonstrou que os animais BS/SPG + PBM após 15 dias da cirurgia apresentaram uma degradação inicial do material do material, ainda a presença de osso neoformado nas periferias do defeito foi observada, da mesma maneira que os animais do grupo BS/SPG. Após 45 dias da cirurgia para os grupos BS/SPG e BS/SPG + PBM observou-se a presença de osso neoformado em toda a extensão do defeito e foi evidenciado uma maior degradação do biomaterial, com a presença de poucas partículas de material remanescentes, circundadas por porções de osteóides. Na análise histomorfométrica valores elevados de volume ósseo como porcentagem do volume tecidual (BV/TV (%)) no período inicial da regeneração óssea foi encontrado no grupo BS/SPG + PBM, quando comparados aos demais grupos. Ainda, para o volume osteóide como porcentagem do volume tecidual (OV/TV (%)) e espessura de osteóide (O.Th (µm)), valores mais altos foram observados no grupo BS/SPG + PBM, nos períodos analisados. A análise imunohistoquímica demonstrou maior marcação imunohistoquímica para TGF-β e VEGF nos animais tratados com PBM.Pode-se concluir que o estímulo fornecido pelo PBM associado ao compósito de BS/SPG aumentou a formação óssea no defeito ósseo craniano em ratos. No entanto, novos estudos devem ser realizados para fornecer informações adicionais a respeito da degradação do material e a regeneração óssea a longo prazo.