Caracterização funcional da proteína desacopladora mitocondrial de plantas (UCP) e sua interação com oxidase alternativa (AOX)
Data
2001
Autores
Almeida, Andrea Miyasaka de 
Orientadores
Vercesi, Anibal Eugenio
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
Mitocondrias de plantas possuem dois sistemas dissipadores de energia que diminuem a efiCiência da fosforilacao oxidativa: a oxidase alternativa (AOX) insensivel ao cianeto e a proteina desacopladora (UCP). No presente trabalho estabelecemos as condicoes que permitiram determinar as contribuicoes da via dos citocromos, da AOX e da UCP na respiracao fosforilativa (estado 3) medindo-se a razao ADP/O (estequiometria entre o numero de moleculas de ADP fosforiladas por atomo de oxigenio consumido). Demonstramos que a atividade da UCP e capaz de dissipar eficientemente a energia de oxido-reducao destinada a fosforilacao do ADP de uma maneira puramente protonoforica e dependente da presenca de acidos graxos livres. Observamos que quando uma diminuicao de ate 60 por cento na velocidade de respiracao e causada por inibicao do transporte do substrato succinato para o interior da mitocondria, a contribuicao da UCP permanece constante, em contraste com a AOX que cai drasticamente a zero. Estes resultados mostram que estes dois sistemas dissipadores de energia presentes em mitocondrias de plantas, possuem uma cinetica distinta e provavelmente papeis fisiologicos diferentes in vivo. Observamos tambem que estas proteinas tem suas atividades co-reguladas por acidos graxos livres. Enquanto ativam a UCP, os acidos graxos livres, na mesma faixa de concentracao, tambem inibem a atividade da AOX de uma maneira dose dependente. Estes resultados indicam que estes dois sistemas nunca trabalham simultaneamente na sua capacidade maxima. As atividades e a expressao da AOX, UCP e da via dos citocromos tambem foram acompanhadas durante o amadurecimento de tomates na propria planta e pos-colheita. Durante o amadurecimento pos-colheita as atividades da AOX, UCP e da via dos citocromos gradativamente. Quando o tomate amadurece na propria planta, observa-se um pico na respiracao mitocondrial total que coincide com o burst climaterico da respiracao no fruto inteiro. Demonstramos que o aumento na velocidade de respiracao em mitocondrias isoladas de tomates no periodo do burst climaterio, e regulada por um aumento na atividade da via dos citocromos. Alem disso, como a quantidade de acidos graxos livres presentes no pericarpo apresenta um pico neste mesmo periodo, a UCP deve contribuir na respiracao climaterica de tomates in vivo. Por outro lado, o aumento da expressao e da atividade da AOX observados no final do processo de amadurecimento...(au)
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2001. 119 p. ilus.