Avaliação da capacidade de síntese e da atividade de renina em células mesangiais em cultura
Data
1999
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
A secrecao de renina se relaciona diretamente ao mecanismo de regulacao da formacao de angiotensina II (AII), sendo que as celulas justaglomerulares do rim sao as principais produtoras de renina circulante. A sintese de Ali tambem ocorre em varios tecidos independentemente dos componentes sistemicos. No rim, celulas dos tubulos proximal e distal sintetizam Ali em nivel intracelular. As celulas mesangiais (CM) possuem importante papel na regulacao da funcao renal, e contraem na presenca de Ali. Assim, os objetivos deste trabalho foram verificar se as CM, sao capazes de sintetizar o RNAM de renina, bem como de produzir e secretar a enzima ativa. Foram utilizadas CM cultivadas a partir de rins de rato e camundongo entre o 3º e 5º sub-cultivo. A presenca do RNAM de renina foi detectada pelo PCR. O conteudo e a atividade de renina foram avaliados atraves da geracao de angiotensina I, quando o meio de cultura (extraceiuiar) e o lisado celular (intracelular) foram incubados com angiotensinogenio. A geracao de AI foi avaliada por eletroforese e por HPLC em diferentes tempos de incubacao (O, 4 8, 24 horas). Os resultados mostraram que as CM expressam o RNAM para renina e sao capazes de sintetizar a proteina. Com relacao as formas da renina, observamos que 57 por cento do conteudo total de renina presente no meio intracelular corresponde a renina livre ou ativa e 42 por cento a forma inativa (pro-renina). No meio de cultura a porcentagem de renina ativa correspondeu a 70 por cento do total e pro-renina a 30 por cento. Com relacao a atividade da renina, observamos um consumo progressivo do angiotensinogenio quando incubado com o lisado. Este consumo foi intensificado quando a pro renina foi pre ativada com tripsina, sugerindo que a CM pode estocar renina inativa a qual pode ser ativada e secretada na presenca de estimulo., Estes resultados sugerem que a semelhanca das celulas justaglomerulares, as CM sintetizam renina na forma inativa (pro renina) a qual pode ser secretada nesta forma ou ser processada ou ativada no meio intracelular. Uma vez que a CM sintetiza a enzima conversara da AI, estes resultados contribuem para a hipotese de que esta celula pode ser capaz de gerar Ali independentemente dos componentes sistemicos
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Citação
São Paulo: [s.n.], 1999. 50 p. ilus.