Papel da angiotensina ii na expressão gênica do receptor de (pro) renina em células mesangiais em cultura

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dc.contributor.advisorBoim, Mirian Aparecida Boim [UNIFESP]pt
dc.contributor.authorPereira, Luciana Guilhermino [UNIFESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)pt
dc.date.accessioned2018-07-30T11:53:41Z
dc.date.available2018-07-30T11:53:41Z
dc.date.issued2015-07-31
dc.description.abstractO receptor de renina/prorenina (RRP) constitui um novo componente ativo do Sistema Renina-Angiotensina (SRA) contribuindo para aumentar a síntese local de AII e ativar a via pró-fibrótica mediada pelas quinases ERKs1/2. Em trabalho anterior mostramos que o losartan reduziu a expressão do RRP em células mesangiais (CMs) estimuladas com glicose indicando uma possível relação entre a AII e a expressão do RRP. Para avaliar se este efeito supressor da AII foi devido a sua ação intracelular, comparamos o efeito de diferentes bloqueadores dos receptores AT1 (BRA), o Losartan e o Candesartan, uma vez que apenas o losartan pode ser internalizado em associação ao AT1, enquanto que o candesartan permanece preso ao receptor na superfície celular. Avaliamos o efeito desses bloqueadores sobre a expressão do RRP, dos componentes do SRA e fosforilação de ERK. CMs em cultura foram incubadas por 24 horas, de acordo com os grupos: Controle (CTL-10mM glicose); alta glicose (GL-30mM); alta glicose na presença de 100nM de Losartan (GL+Los) ou 1µM de Candesartan (GL+Cand). As expressões de RNAm para RRP, fibronectina e ?-actina foram determinadas através de PCR em tempo real. Expressão de ERK, p-ERK e prorenina foi estimada por Western blot. Níveis de AII no meio de cultura e no lisado celular foram quantificados por HPLC. A estabilidade do RNAm do RRP foi avaliada por PCR em tempo real após a inibição da transcrição pela actinomicina D. A atividade de dois sítios de ligação na região promotora do gene codificador de RRP com fatores de transcrição estimulados pela AII, o NF-?B e o AP-1, foi avaliada através de inibidores específicos (quinazolina e curcumina respectivamente). O bloqueio da síntese de AII pela célula mesangial foi feito com o silenciamento do gene do Angiotensinogênio com RNA de interferência. A glicose aumentou o conteúdo de AII intracelular, a expressão de RRP, p-ERK/ERK, prorenina e fibronectina. Losartan foi capaz de reverter completamente esses efeitos enquanto que o Candesartan reverteu o aumento da AII, do RRP e da fibronectina mas não reverteu o aumento da prorenina e, consequentemente, da ativação da via da ERK. A estabilidade do RNAm de RRP não foi alterada com o tratamento com glicose. A inibição do NF-?B, mas não do AP-1, reduziu a expressão do RRP. O bloqueio do angiotensinogênio pelo RNA de interferência causou aumento do RRP e da ativação da via do NF-?B. Esses resultados sugerem que: 1) Os BRA capazes de inibir a ação intracelular da AII (Los) podem ser potencialmente mais efetivos para reduzir a atividade do SRA por um mecanismo envolvendo a supressão do gene do RRP; 2) A AII intracelular parece ter uma participação direta na regulação do gene do RRP mas sua ausência provavelmente dispara outros mecanismos compensatórios para essa regulação.pt
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2013 a 2016)
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2767548pt
dc.identifier.citationPEREIRA, Luciana Guilhermino. Papel da angiotensina ii na expressão gênica do receptor de (pro) renina em células mesangiais em cultura. 2015. Tese (Doutorado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2015.
dc.identifier.file2015-0587.pdf
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48869
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectreceptor de renina/proreninapt
dc.subjectsistema renina-angiotensina intrarenalpt
dc.subjectantagonistas de receptor at1pt
dc.subjectcélula mesangialpt
dc.titlePapel da angiotensina ii na expressão gênica do receptor de (pro) renina em células mesangiais em culturapt
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt
unifesp.graduateProgramMedicina (Nefrologia)pt
unifesp.knowledgeAreaCiências da saúdept
unifesp.researchAreaMedicinapt
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PPG - Medicina (Nefrologia)