Análise proteômica de plasma seminal e lipidômica de plasma seminal e de espermatozóides e suas possíveis correlações com gestação em ciclos de injeção intracitoplasmática de espermatozóide
Data
2011
Autores
Barbosa, Thiesa Butterby Soler 
Orientadores
Cedenho, Agnaldo Pereira
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
Objetivos: Analisar o perfil proteico de plasma seminal e o perfil lipidico de plasma seminal e de espermatozoides de pacientes submetidos a fertilizacao in vitro, atraves de injecao intracitoplasmatica de espermatozoides (ICSI), que atingiram ou nao a gestacao. Metodo: Foi realizado um estudo transversal caso-controle incluindo amostras seminais de casais em ciclos de reproducao assistida, cuja estimulacao ovariana tenha utilizado analogo antagonista de GnRH como metodo de supressao pituitaria; FSH recombinante e/ou altamente purificado como fonte de gonadotrofina e hCG para pico de LH, quando o foliculo maior tivesse atingido 17mm de diametro. Foram excluidas amostras seminais de casais cuja parceira apresentasse idade superior a 37 anos, indicios de endometriose, falencia ovariana prematura, SOP (Sindrome dos Ovarios Policisticos), cancer ou amenorreia prolongada. Tambem foram incluidas apenas amostras de pacientes cujas parceiras tivessem recebido no minimo um embriao com qualidade boa no terceiro dia apos a ICSI. As amostras seminais foram obtidas e analisadas de acordo com os criterios estabelecidos pela Organizacao Mundial da Saúde (1999) e a morfologia segundo o criterio estrito de Kruger (1986). O perfil proteico de plasma seminal foi avaliado atraves da tecnica de nanoUPLC tandem nanoESI-MSE. O perfil lipidico de plasma seminal e de espermatozoides foi avaliado atraves de MALDI-TOF. Resultados: Foram avaliados 75 casais e aplicando-se os criterios de exclusao, 26 amostras foram incluidas no presente experimento. Nao houve diferenca significativa em relacao a idade, tempo de abstinencia ejaculatoria e analise seminal pre e pos processamento entre os grupos. Um total de 94 proteinas foram identificadas e quantificadas atraves da tecnica de MSE, sendo 28 comuns aos dois grupos. Foram identificadas 54 proteinas diferencialmente expressas, das quais 35 hiperexpressas no grupo β-hCG negativo e 19 no grupo β-hCG positivo. Foram identificadas 9 proteinas exclusivas no grupo β-hCG negativo e 3 no grupo β-hCG positivo. Na analise de lipideos de plasma seminal, foram observados 974 ions comuns aos grupos β-hCG negativo e β-hCG positivo. Destes, 89 apresentaram diferenca estatistica entre os grupos, estando 69 hiperrepresentados no grupo β-hCG negativo e 20 hiperrepresentados no grupo β-hCG positivo. Apenas um ion (m/z 857,9621) exclusivo ao grupo β-hCG negativo foi observado. Em espermatozoides foram observados 951 ions comuns aos grupos β-hCG negativo e β-hCG positivo. Destes, apenas 7 apresentavam diferenca significativa entre os grupos, estando 6 hiperrepresentados no grupo β-hCG negativo e um hiperrepresentado no grupo β-hCG positivo, nao sendo nenhum identificado com erro de massa menor do que 50 ppm. Alem disso, foi observado um ion exclusivamente representado no grupo β-hCG negativo, com m/z 845,582, identificado como um fosfolipideo (fosfatidilcolina). Conclusoes: o perfil de proteinas de plasma seminal de amostras de ciclos que atingiram a gestacao difere do perfil de proteinas de plasma seminal de amostras de ciclos que nao atingiram a gestacao; o perfil lipidico de plasma seminal demonstrou diversos lipideos diferencialmente representados entre as amostras de ciclos que atingiram ou nao a gestacao; a diferenca do perfil lipidico de espermatozoides foi menos evidente entre os grupos
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2011. 51 p.