Determinantes metabólicos do linfoma/leucemia associados ao HTLV-1 e sua relação com a resposta a indução do estresse oxidativo como potencial terapêutico em linhagens tumorais
Data
2024-06-01
Autores
Ferraz, Jéssica Dias da Silva 
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Objetivo: Determinar marcadores de susceptibilidade em células de linfoma de células T do adulto e identificar possíveis formas de intervenção nas alterações celulares relacionadas ao HTLV-1. Métodos: Foram utilizadas as linhagens celulares MT-2, MT-4 e Jurkat. Realizaram-se testes in vitro de citotoxicidade com as drogas cisplatina, L-Buthionine-sulfoximina, auranofina, doxorrubicina e vincristina, além da determinação do perfil metabólico. Foi realizada PCR em tempo real para detecção da infecção pelo HTLV-1 nas linhagens MT-2 e MT-4 e da expressão gênica viral, focando nas proteínas Tax-Rex, Gag e Env, com análise de dados de microarranjos disponíveis na literatura. Resultados: Os experimentos de citotoxicidade determinaram a sensibilidade das células relacionadas ao HTLV-1 à combinação das drogas auranofina e L-Buthionine-sulfoximina. Os resultados foram correlacionados com o perfil metabólico das células e com os dados de microarranjo. Na linhagem MT-4, observou-se alta expressão da via da nicotinamida, associada à síntese de NAD/NADH. Na MT-2, verificou-se maior expressão da cadeia de transporte de elétrons na membrana, relacionada à fosforilação oxidativa. Conclusão: Esses resultados sustentam a eficácia da combinação das drogas, especialmente auranofina e L-Buthionine-sulfoximina, para atingir diferentes vias metabólicas, como a via de fosforilação oxidativa e a via da nicotinamida, superando a resistência a diferentes terapias observada em pacientes com linfoma de células T do adulto.
Objective: To determine susceptibility markers in adult T-cell lymphoma cells and identify potential interventions for HTLV-1-related cellular alterations. Methods: We used the cell lines MT-2, MT-4, and Jurkat. In vitro cytotoxicity tests were conducted with cisplatin, L-Buthionine-sulfoximine, auranofin, doxorubicin, and vincristine, alongside metabolic profiling. Real-time PCR was performed to detect HTLV-1 infection in MT-2 and MT-4 cell lines and to assess viral gene expression targeting Tax-Rex, Gag, and Env proteins, with data analysis from available literature microarrays. Results: Cytotoxicity experiments determined the sensitivity of HTLV-1-related cells to the combination of auranofin and L-Buthionine-sulfoximine. Results correlated with cellular metabolic profiles and microarray data. MT-4 cells exhibited high nicotinamide pathway expression associated with NAD/NADH synthesis. MT-2 cells showed increased expression of the electron transport chain in the membrane associated with oxidative phosphorylation. Conclusion: These findings support the efficacy of drug combinations, particularly auranofin and L-Buthionine-sulfoximine, in targeting different metabolic pathways such as oxidative phosphorylation and nicotinamide pathway to overcome therapy resistance observed in adult T-cell lymphoma patients.
Objective: To determine susceptibility markers in adult T-cell lymphoma cells and identify potential interventions for HTLV-1-related cellular alterations. Methods: We used the cell lines MT-2, MT-4, and Jurkat. In vitro cytotoxicity tests were conducted with cisplatin, L-Buthionine-sulfoximine, auranofin, doxorubicin, and vincristine, alongside metabolic profiling. Real-time PCR was performed to detect HTLV-1 infection in MT-2 and MT-4 cell lines and to assess viral gene expression targeting Tax-Rex, Gag, and Env proteins, with data analysis from available literature microarrays. Results: Cytotoxicity experiments determined the sensitivity of HTLV-1-related cells to the combination of auranofin and L-Buthionine-sulfoximine. Results correlated with cellular metabolic profiles and microarray data. MT-4 cells exhibited high nicotinamide pathway expression associated with NAD/NADH synthesis. MT-2 cells showed increased expression of the electron transport chain in the membrane associated with oxidative phosphorylation. Conclusion: These findings support the efficacy of drug combinations, particularly auranofin and L-Buthionine-sulfoximine, in targeting different metabolic pathways such as oxidative phosphorylation and nicotinamide pathway to overcome therapy resistance observed in adult T-cell lymphoma patients.
Descrição
Citação
FERRAZ, Jéssica Dias da Silva. Determinantes metabólicos do linfoma/leucemia associados ao HTLV1 e sua relação com a resposta a indução do estresse oxidativo como potencial terapêutico em linhagens tumorais. 2024. 72 f. (Dissertação em Infectologia) – Escola Paulista de Medicina, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2024.