Análise dos aspectos funcionais dos espermatozoides e dos níveis de peroxidação lipídica no plasma seminal de pacientes portadores de tumor de células germinativas de testículo pré e pós-orquiectomia

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dc.contributor.advisorSpaine, Deborah Montagnini [UNIFESP]pt_BR
dc.contributor.advisorLatteshttp://lattes.cnpq.br/1321284998759806pt_BR
dc.contributor.authorAndrade, Maria Beatriz Ribeiro de [UNIFESP]
dc.contributor.authorLatteshttp://lattes.cnpq.br/5373251016652631pt_BR
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)pt_BR
dc.coverage.spatialSão Paulopt_BR
dc.date.accessioned2018-07-27T15:49:33Z
dc.date.available2018-07-27T15:49:33Z
dc.date.issued2016-03-29
dc.description.abstractObjective: To verify if quality of spermatozoa from men with testicular germ cell tumors is better before or after orchiectomy. Methods: This prospective study was carried out including 24 patients with testicular germ cell tumors. The patients provided one semen sample before they were submitted to unilateral orchiectomy, and one other semen sample 30 days after the surgery. After collection by masturbation and liquefaction, an aliquot of the semen sample was used for semen analysis and another was used to evaluate sperm mitochondrial activity, DNA fragmentation and acrosomal integrity. The remaining volume was centrifuged and the supernatant seminal plasma was used to evaluate lipid peroxidation levels. Mitochondrial activity was determined by a colorimetric stain (3,3? ? diaminobenzidine ? DAB) and classified as DAB I (all mitochondrial active), DAB II (more than 50% mitochondrial active), DAB III (less than 50% mitochondrial active) and DAB IV (all mitochondrial inactive). Sperm DNA fragmentation was assessed by an Alkaline Comet assay, in which sperm were classified as high DNA integrity (class I and II) to high DNA fragmentation (class III and IV). Acrossome integrity was determined by a fluorescent probe (PNA ? FITC) and assessed by fluorescent microscopy. Lipid peroxidation levels were quantified by measuring thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) levels, and were described in TBARS nmol/mL. Pre and Post-orchiectomy sample were compared using a paired Student?s T test (normal distribution) or a paired Wilcoxon test, when appropriate (p?0.05). Results: No significant difference was observed in semen analysis. A significant decrease in DNA fragmentation (p=0.019) and lipid peroxidation (p=0.014), and an increase in mitochondrial activity (p=0.048) was observed after orchiectomy. Conclusions: Based on our findings, the semen quality from men with testicular germ cell tumors is better quality after orchiectomy.en
dc.description.abstractObjetivo: Comparar se as análises seminal e funcional dos espermatozoides e os níveis de peroxidação lipídica do plasma seminal de pacientes com tumor de células germinativas do testículo diferem antes e após a orquiectomia. Método: Estudo prospectivo realizado incluindo amostras de 24 homens portadores de tumor de células germinativas do testículo pré-orquiectomia e até 30 dias após a realização da orquiectomia. Após a coleta de sêmen por masturbação uma alíquota foi utilizada para a análise seminal e outra para a avaliação da atividade mitocondrial, da integridade do acrossoma e da integridade do DNA dos espermatozoides. O volume remanescente de sêmen foi centrifugado e o plasma seminal sobrenadante foi utilizado para a avaliação dos níveis de peroxidação lipídica do plasma seminal. A atividade mitocondrial foi avaliada pelo método de coloração por 3,3? - diaminobenzidina (DAB) e classificadas em DAB classe I (100% da peça intermediária corada), DAB classe II (mais de 50% da peça intermediária corada), DAB classe III (menos de 50% da peça intermediária corada) e DAB classe IV (ausência de coloração na peça intermediária). A integridade do acrossoma foi avaliada através da sonda fluorescente PNA (Peannut agglutinin)-FITC (Fluorescein isothiocyanite). Duzentas células por amostra foram classificadas em acrossoma íntegro e não íntegro. A integridade do DNA espermático foi avaliada através da eletroforese de célula única em gel de agarose em solução alcalina (ensaio cometa). Duzentos espermatozoides por amostra foram classificados em Cometa classe I (célula com halo ao seu redor e com o núcleo corado, sem cauda de cometa evidente), Cometa classe II (célula com formação de cauda de cometa e com o núcleo pouco descorado), Cometa classe III (célula com cauda de cometa totalmente formada, porém com o núcleo parcialmente corado) e Cometa classe IV (célula com cauda de cometa totalmente formada e com o núcleo completamente descorado). O nível de peroxidação lipídica do plasma seminal foi avaliados pela mensuração de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). As amostras pré e pós-orquiectomia foram comparadas através do teste t de Student para amostras pareadas (distribuição normal) e através do teste não paramétrico de Wilcoxon para amostras pareadas. Para todo o estudo, foi adotado um ? de 5%. Resultados: As amostras pós-orquiectomia apresentaram maior porcentagem de cometa classe II (p= 0,019), menor porcentagem de cometa classe III (p= 0,028), menor porcentagem de DAB classe III (p= 0,048) e menor índice de TBARS (nmol/mL) (p= 0,014). Não foram encontradas diferenças nos parâmetros da análise seminal. Conclusão: Os resultados deste estudo permitem concluir que amostras seminais obtidas de homens com tumor de células germinativas do testículo, colhidas após a orquiectomia, apresentam melhor qualidade funcional dos espermatozoides e níveis menores de peroxidação lipídica do plasma seminal do que aquelas obtidas previamente à cirurgia.pt_BR
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2013 a 2016)
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
dc.format.extent25 f.pt_BR
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=3613266pt_BR
dc.identifier.citationANDRADE, Maria Beatriz Ribeiro de. Análise dos aspectos funcionais dos espermatozoides e dos níveis de peroxidação lipídica no plasma seminal de pacientes portadores de tumor de células germinativas de testículo pré e pós-orquiectomia. 2016. 25 f. Dissertação (Mestrado em Medicina: Urologia) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2016.
dc.identifier.fileMaria Beatriz Ribeiro de Andrade - PDF A.pdf
dc.identifier.urihttps://repositorio.unifesp.br/handle/11600/46132
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.subjectAcrosome reactionen
dc.subjectDNA fragmentationen
dc.subjectSspermen
dc.subjectOrchiectomyen
dc.subjectOxidative stressen
dc.subjectTesticular neoplasmen
dc.subjectEspermatozoidept_BR
dc.subjectFragmentação do dnapt_BR
dc.subjectEstresse oxidativopt_BR
dc.subjectNeoplasias testicularespt_BR
dc.subjectOrquiectomiapt_BR
dc.subjectReação acrossômicapt_BR
dc.titleAnálise dos aspectos funcionais dos espermatozoides e dos níveis de peroxidação lipídica no plasma seminal de pacientes portadores de tumor de células germinativas de testículo pré e pós-orquiectomiapt_BR
dc.title.alternativeAnalysis of Functional Aspects of Sperm and Seminal Levels of Lipid Peroxidation of Patients with Testicular Germ Cell Tumors Pre and Post Orchiectomyen
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt_BR
unifesp.graduateProgramMedicina (Urologia)pt_BR
unifesp.knowledgeAreaCiências da saúdept_BR
unifesp.researchAreaMedicinapt_BR
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Dissertação de mestrado
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