Avaliação das proteínas Klotho e FGF-23 no líquido cefalorraquidiano em pacientes com narcolepsia
Data
2021
Autores
Oliveira, Giuliano Da Paz 
Orientadores
Coelho, Fernando Morgadinho Santos
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Objective: To explore the status of concentration of soluble α-klotho, phosphorus, and intact fibroblast growth factor 23 (FGF23) in cerebrospinal fluid (CSF) of patients with narcolepsy and compare with the levels in the control group. Methods: 59 patients with narcolepsy diagnosis according to 3rd edition of the International Classification of Sleep Disorders, followed up at the Daytime Excessive Sleepiness Outpatient Clinic of the Universidade Federal de São Paulo and 17 control individuals were enrolled, from October 2018 to July 2019. Narcolepsy patients and control individuals underwent lumbar puncture to collect CSF in order to measure soluble α-klotho, intact FGF-23, and phosphorus. We used radioimmunoassay, human klotho enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), human intact FGF23 ELISA and spectrophotometry to measure hypocretin-1, soluble α-klotho, intact FGF-23 and phosphorus, respectively. T-Student Test was used to compare soluble α-klotho and phosphorus concentrations, Mann-Whitney U Test was used to compare intact FGF-23 levels between groups. ANOVA test was used to compare soluble α-klotho and phosphorus CSF concentrations among narcolepsy patients with CSF hypocretin-1 ≤110pg/ml (HCRT-) and narcolepsy patients with CSF hypocretin-1 >110pg/ml (HCRT+) versus control subjects. Kruskal-Wallis test was used to compare the 3 groups regarding intact FGF- 23 CSF levels. Results: Soluble α-klotho and phosphorus CSF levels were lower in narcoleptic patients than in control (908.18 ± 405.51 versus 1265.78 ± 523.26 pg/ml; p=0.004 and 1.34 ± 0.25 versus 1.58 ± 0.23 mg/dl; p= 0.001, respectively). It was found higher median intact FGF-23 levels in the narcoleptic group compared to the control group (5.51 versus 4.00 pg/mL; p= 0.001). Soluble α-klotho and phosphorus CSF levels were lower in both HCRT- and HCRT+ than controls. Moreover, there were higher intact FGF-23 levels in both HCRT-/HCRT+ groups versus controls. However, we did not find differences comparing HCRT- and HCRT+ groups, analyzing CSF soluble α-klotho, intact FGF-23 or phosphorus levels. Conclusions: Patients with narcolepsy have decreased CSF concentration of soluble α-klotho and increased CSF levels of intact FGF-23, compared to healthy controls. These findings may contribute to the understanding of the pathophysiology of narcolepsy.
Objetivos: Avaliar as concentrações de α-klotho solúvel, fósforo e FGF-23 intacto no líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com narcolepsia e compará-los com os níveis de pacientes controle. Métodos: Foram selecionados 59 pacientes com o diagnóstico narcolepsia segundo a 3a edição da Classificação Internacional de Distúrbios do Sono, acompanhados no Ambulatório de Sonolência Excessiva Diurna da Universidade Federal de São Paulo e 17 indivíduos controle saudáveis, no período de outubro de 2018 a julho de 2019. Todos os indivíduos foram submetidos a punção lombar para coleta de LCR e dosagem de α-klotho solúvel, fator de crescimento de fibroblastos 23 (FGF-23) intacto e fósforo. Foram utilizados radioimunoensaio, ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) para dosagem do klotho humano, ELISA para dosagem de FGF-23 humano intacto e espectrofotometria para medir hipocretina-1 (hcrt-1), α-klotho solúvel, FGF-23 intacto e fósforo, respectivamente. O teste T de Student foi utilizado para comparar as concentrações de α-klotho solúvel e fósforo e o teste U de Mann-Whitney foi utilizado para comparar as concentrações de FGF-23 intacto entre os grupos. O Teste de ANOVA foi usado para comparar os níveis de α- klotho solúvel e fósforo no LCR entre 3 grupos: pacientes com narcolepsia e hcrt-1 ≤ 110pg/ml (HCRT-) pacientes com narcolepsia e hcrt-1 >110pg/ml (HCRT+) e o grupo controle. O teste de Kruskal-Wallis foi usado para comparar os 3 grupos em relação às dosagens de FGF-23 intacto no LCR. Resultados: As dosagens de α-klotho solúvel e fósforo no LCR de pacientes com narcolepsia foi menor do que as do grupo controle (908,18 ± 405,51 versus 1265,78 ± 523,26 pg/ml; p=0,004 e 1,34 ± 0,25 versus 1,58 ± 0,23 mg/dl; p= 0,001, respectivamente). A mediana da dosagem de FGF-23 intacto foi mais elevada no grupo dos narcolépticos em relação ao dos controles (5,51 versus 4,00 pg/mL; p= 0,001). As dosagens de α-klotho solúvel e fósforo no LCR foram baixas tanto no grupo HCRT- quanto no HCRT+ quando comparadas às do grupo controle. Além disso, a dosagem de FGF-23 intacto foi maior em ambos grupos HCRT-/HCRT+ versus grupo controle. Entretanto, não houve diferenças quanto aos níveis de α-klotho solúvel, fósforo ou FGF-23 intacto comparando os grupos HCRT- versus HCRT+. Conclusões: Pacientes com narcolepsia têm concentrações mais baixas de α-klotho solúvel e mais altas concentrações de FGF-23 intacto quando comparados a indivíduos sem a doença. Esses achados podem contribuir na compreensão da fisiopatologia da narcolepsia.
Objetivos: Avaliar as concentrações de α-klotho solúvel, fósforo e FGF-23 intacto no líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com narcolepsia e compará-los com os níveis de pacientes controle. Métodos: Foram selecionados 59 pacientes com o diagnóstico narcolepsia segundo a 3a edição da Classificação Internacional de Distúrbios do Sono, acompanhados no Ambulatório de Sonolência Excessiva Diurna da Universidade Federal de São Paulo e 17 indivíduos controle saudáveis, no período de outubro de 2018 a julho de 2019. Todos os indivíduos foram submetidos a punção lombar para coleta de LCR e dosagem de α-klotho solúvel, fator de crescimento de fibroblastos 23 (FGF-23) intacto e fósforo. Foram utilizados radioimunoensaio, ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) para dosagem do klotho humano, ELISA para dosagem de FGF-23 humano intacto e espectrofotometria para medir hipocretina-1 (hcrt-1), α-klotho solúvel, FGF-23 intacto e fósforo, respectivamente. O teste T de Student foi utilizado para comparar as concentrações de α-klotho solúvel e fósforo e o teste U de Mann-Whitney foi utilizado para comparar as concentrações de FGF-23 intacto entre os grupos. O Teste de ANOVA foi usado para comparar os níveis de α- klotho solúvel e fósforo no LCR entre 3 grupos: pacientes com narcolepsia e hcrt-1 ≤ 110pg/ml (HCRT-) pacientes com narcolepsia e hcrt-1 >110pg/ml (HCRT+) e o grupo controle. O teste de Kruskal-Wallis foi usado para comparar os 3 grupos em relação às dosagens de FGF-23 intacto no LCR. Resultados: As dosagens de α-klotho solúvel e fósforo no LCR de pacientes com narcolepsia foi menor do que as do grupo controle (908,18 ± 405,51 versus 1265,78 ± 523,26 pg/ml; p=0,004 e 1,34 ± 0,25 versus 1,58 ± 0,23 mg/dl; p= 0,001, respectivamente). A mediana da dosagem de FGF-23 intacto foi mais elevada no grupo dos narcolépticos em relação ao dos controles (5,51 versus 4,00 pg/mL; p= 0,001). As dosagens de α-klotho solúvel e fósforo no LCR foram baixas tanto no grupo HCRT- quanto no HCRT+ quando comparadas às do grupo controle. Além disso, a dosagem de FGF-23 intacto foi maior em ambos grupos HCRT-/HCRT+ versus grupo controle. Entretanto, não houve diferenças quanto aos níveis de α-klotho solúvel, fósforo ou FGF-23 intacto comparando os grupos HCRT- versus HCRT+. Conclusões: Pacientes com narcolepsia têm concentrações mais baixas de α-klotho solúvel e mais altas concentrações de FGF-23 intacto quando comparados a indivíduos sem a doença. Esses achados podem contribuir na compreensão da fisiopatologia da narcolepsia.