Potencialização dos efeitos de anti-VEGF por heparinas. Papel da inibição da angiogênese em doenças oculares.

Abstract

Objetivo: O objetivo geral deste trabalho foi avaliar a potencialização da ação antiangiogênica do anti-VEGF bevacizumabe pela heparina-6-dessulfatada in vitro em culturas de células endoteliais e testar a possível citotoxicidade destes compostos em células de retina humana ARPE-19. Métodos: A metodologia do trabalho consiste em cultura de células endoteliais de aorta de coelho (CLPs) e células da retina humana (ARPE-19), e experimentos in vitro para analisar o efeito do anti-VEGF bevacizumabe potencializado por heparina-6-dessulfatada quando tratadas as células com diversas concentrações desses compostos para que fosse possível analisar a migração celular, proliferação, e citotoxicidade na CLPs e na ARPE-19 e a formação de estruturas do tipo capilar na CLPs. Para analisar os resultados dos experimentos, foi utilizado o software ImageJ para cálculo da área de migração celular e para cálculo da quantidade de estruturas do tipo capilar formadas nas células. Já para contagem das células no experimento de proliferação, foi utilizado o microscópio InCell e seu próprio software de análise de dados. Para análise de citotoxicidade celular, foi utilizado um espectofotômetro ajustado em 540nm. Os gráficos dos resultados foram gerados pelo GraphPad Prism 8.0. Resultados: As três concentrações da Heparina 6-O dessulfatada potencializando Bevacizumabe se mostraram eficazes em diminuir a proliferação celular em ARPE-19 e CLPs, diminuir a migração celular em ARPE-19 e CLPs, e diminuir a formação de estruturas do tipo capilar sobre Matrigel em CLPs. Não houve alteração da viabilidade celular pelas drogas.