Estudo do efeito anti-inflamatório do probiótico lactobacillus rhamnosus na inflamação pulmonar aguda induzida por lipopolissacarídeo de Escherichia coli em camundongos C57Bl/6
Data
2019-12-18
Autores
Olimpio, Fabiana Regina Da Silva 
Orientadores
Carvalho, Flavio Aimbire Soares De
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
OBJECTIVE: To study the anti-inflammatory effect of probiotic Lactobacillus rhamnosus (Lr) on cellular infiltrate and secretion of inflammatory mediators in an experimental model of acute LPS-induced pulmonary inflammation in C57Bl/6 mice. METHODS: Male C57Bl/6 mice were divided into 4 experimental groups (n = 7 mice for experimental group) described below: control (animals received intranasal saline solution instillation), LPS (mice received intranasal instillation of LPS), Lr / 1day + LPS (mice received Lr gastric oro at the same time as intranasally LPS), Lr / 14 days + LPS (mice received Lr gastric oro 1 time daily for 14 days prior to intranasal LPS instillation), Lr / 1day(mice received Lr gastric oro), Lr / 14 days (mice received Lr gastric oro 1 time daily for 14 days). All mice were euthanized 24 hours after LPS administration. Cellular infiltrate in the lung was assessed from the number of cells in the bronchoalveolar lavage (BAL) and changes in lung tissue were quantified from pulmonary morphometry. Inflammatory mediators in BAL and NF-κB in the lung were measured by ELISA. mRNA expression for toll like receptor (TLR) -2 and -4 receptors, MMP-9 and MMP-12 metaloproteases, and NF-κB transcription factor was evaluated by PCR. RESULTS: Lr attenuated cell migration and modulated secretion of pro- and anti-inflammatory mediators. Moreover, Lr reduced mRNA of TLR2 and -4, MMP-9, MMP-12 and NF-κB. CONCLUSION: The protective effect of Lr targets modulation of inflammatory markers and inhibition of NF-κB, both directly related to acute lung inflammation.
OBJETIVO: Estudar o efeito antiinflamatório do probiótico Lactobacillus rhamnosus (Lr) sobre o infiltrado celular e a secreção de mediadores inflamatórios em um modelo experimental de inflamação pulmonar aguda induzida por lipopolissacarídeo (LPS) em camundongos C57Bl/6. MÉTODOS: Camundongos C57Bl/6 machos com idade de 6-8 semanas foram divididos em 6 grupos experimentais (n= 7 animais para grupo experimental) descritos a seguir: controle (animais receberam instilação intranasal de solução salina), LPS (animais receberam instilação intranasal de LPS), Lr/1dia + LPS (animais receberam Lr via oro gástrica e concomitantemente o LPS por via intranasal), Lr/14 dias + LPS (animais receberam Lr 1 vez ao dia via oro gástrica, durante 14 dias antes da instilação intranasal de LPS), Lr/1dia (animais receberam Lr por via oro gástrica), Lr/14 dias (animais receberam Lr 1 vez ao dia via oro gástrica, durante 14 dias). Todos os animais foram eutanasiados 24 horas após administração de LPS. O infiltrado celular no pulmão foi avaliado a partir do número de células no lavado broncoalveolar (LBA) e as alterações no tecido pulmonar foram quantificadas a partir da morfometria pulmonar. Os mediadores inflamatórios no LBA e o NF-κB no pulmão foram mensurados pela técnica de ELISA. A expressão de RNAm pulmonar para os receptores do tipo toll-like (TLR) -2 e -4, para as metaloproteases MMP-9 e MMP-12, e para o fator de transcrição NF-kB foi avaliada por PCR. RESULTADOS: O Lr atenuou a migração celular e modulou a secreção dos mediadores pró- e anti-inflamatórios, além de reduzir a expressão gênica dos TLR2 e -4, assim como das MMP-9 e MMP-12, e do NF-κB. CONCLUSÃO: O efeito protetor do Lr tem como alvos a exacerbação da resposta imune inata, o desequilíbrio entre mediadores pró- e anti-inflamatórios, a atividade das proteases, o fator de transcrição NF-kB, e a lesão pulmonar.
OBJETIVO: Estudar o efeito antiinflamatório do probiótico Lactobacillus rhamnosus (Lr) sobre o infiltrado celular e a secreção de mediadores inflamatórios em um modelo experimental de inflamação pulmonar aguda induzida por lipopolissacarídeo (LPS) em camundongos C57Bl/6. MÉTODOS: Camundongos C57Bl/6 machos com idade de 6-8 semanas foram divididos em 6 grupos experimentais (n= 7 animais para grupo experimental) descritos a seguir: controle (animais receberam instilação intranasal de solução salina), LPS (animais receberam instilação intranasal de LPS), Lr/1dia + LPS (animais receberam Lr via oro gástrica e concomitantemente o LPS por via intranasal), Lr/14 dias + LPS (animais receberam Lr 1 vez ao dia via oro gástrica, durante 14 dias antes da instilação intranasal de LPS), Lr/1dia (animais receberam Lr por via oro gástrica), Lr/14 dias (animais receberam Lr 1 vez ao dia via oro gástrica, durante 14 dias). Todos os animais foram eutanasiados 24 horas após administração de LPS. O infiltrado celular no pulmão foi avaliado a partir do número de células no lavado broncoalveolar (LBA) e as alterações no tecido pulmonar foram quantificadas a partir da morfometria pulmonar. Os mediadores inflamatórios no LBA e o NF-κB no pulmão foram mensurados pela técnica de ELISA. A expressão de RNAm pulmonar para os receptores do tipo toll-like (TLR) -2 e -4, para as metaloproteases MMP-9 e MMP-12, e para o fator de transcrição NF-kB foi avaliada por PCR. RESULTADOS: O Lr atenuou a migração celular e modulou a secreção dos mediadores pró- e anti-inflamatórios, além de reduzir a expressão gênica dos TLR2 e -4, assim como das MMP-9 e MMP-12, e do NF-κB. CONCLUSÃO: O efeito protetor do Lr tem como alvos a exacerbação da resposta imune inata, o desequilíbrio entre mediadores pró- e anti-inflamatórios, a atividade das proteases, o fator de transcrição NF-kB, e a lesão pulmonar.
Descrição
Citação
OLÍMPIO, Fabiana Regina da Silva. Estudo do efeito antiinflamatório do probiótico Lactobacillus rhamnosus na inflamação pulmonar aguda induzida por lipopolissacarídeo de escherichia coli em camundongos c57bl/6. 2019. 77f. Dissertação (Mestrado em Medicina Translacional) – Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo. São Paulo, 2019.