Desenho De Novos Peptídeos Catiônicos A Partir Do Sensor De Voltagem De Canais Iônicos

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Data
2018-05-24
Autores
Lima, Estevao Carlos [UNIFESP]
Orientadores
Miranda Filho, Manoel De Arcisio [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
Objective: Design Of Novel Cationic Peptides Through The Analysis Of Ion Channel Voltage Sensor Region And Analysis Of Their Bioactivity In Respect Of Anticancer And Antibacterial Activities. Methods: The Amino Acid Sequence Of 104 Ion Channels Of Nav, Cav And Kv Families Were Multialigned So That The S4 Region Could Be Identified. Based On The Distribution Frequency Of This Residues, Three Peptides Were Designed And Their Secondary Structure Was Evaluated By Circular Dichroism Technique With The Use Of Large Unilamelar Vesicles (Luvs). This Luvs Had The Biomimetic Characteristics Of: Mammal Cells [Popc:Col (70:30 Mol%)]; Tumoral Cell [Popc:Col:Pops(50:30:20)]; And Bacterial Strains [Popc:Popg (50:50)]. Anticancer Activity Was Measured By The Mtt Reduction Assay Using Tumoral (Hela; Du 145; Mcf 7) And Non Tumoral (Nih 3t3) Cell Lines Incubated With The Peptides Over A Concentration Range. The Antibacterial Activity Was Measured By An Optical Density Analysis Using Gram Negative And Gram Positive Strains. The
Objetivo: Desenho De Peptídeos Catiônicos A Partir De Região Específica Do Sensor De Voltagem De Canais Iônicos Expressos Em Humanos. Uma Vez Sintetizados, Avaliar A Bioatividade Quanto A Potential Ação Antitumoral E Antibacteriana Utilizando Células Em Cultura E Modelos Biomiméticos. Métodos: A Sequencia De Aminoácidos De 104 Canais Iônicos Das Famílias Nav; Cav E Kv Foi Multialinhada Para Que O Segmento S4 Da Região Sensor De Voltagem Fosse Identificado E Isolado. Baseando-Se Na Frequencia De Expressão Destes Resíduos, Três Peptídeos Foram Desenhados E Enviados Para Síntese. A Estrutura Secundária Foi Avaliada Pela Técnica De Dicroísmo Circular Com O Uso De Vesículas Unilamelares Grandes (Luvs): Biomiméticas Para Células De Mamífero [Popc:Col (70:30 Mol%)]; Células De Mamífero Com Característica Tumoral [Popc:Col:Pops (50:30:20)], E Célula Bacteriana [Popc:Popg (50:50)]. A Atividade Antitumoral Foi Aferida Pelo Método De Redução Do Mtt Com Uso De Linhagens Celulares Imortalizadas De Origem Tumoral (Hela; Mc
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