Relação entre níveis séricos de CD30 e evolução do transplante renal
Data
2018-06-28
Autores
Grenzi, Patricia Cristina 
Orientadores
Lima, Maria Gerbase de
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Introduction: The CD30 molecule of the tumor necrosis factor receptor (TNFRS8)
superfamily is expressed in activated lymphocytes. The cleavage of the extracellular
portion results in the soluble CD30 (sCD30), which correlates with clinical outcomes
in kidney transplantation. Objectives: Investigate in kidney transplant recipients
whether sCD30 serum levels are associated with lesions in protocol biopsies 3 and 24
months posttransplantation,
with immunosuppression type, the presence of CD30+ cells within the graft and gene expression of CD30 and related genes in peripheral
blood mononuclear cells. To investigate the influence of immunosuppressive drugs on
cell culture. Casuistic and methods: The study was conducted in 169 lowimmunological
risk recipients with reduced exposure to tacrolimus (TAC), randomized
at 3 months to be converted or not to sirolimus (SRL). Mixed lymphocyte culture and
CD30+ Hodgkin's lymphoma cell line culture were performed for in vitro evaluation of
CD30 release and expression after treatment with SRL, everolimus (EVR) and TAC.
The presence of CD30 on the surface of extracellular vesicles (EVs) was also
evaluated. Results: In the third month posttransplantation,
subclinical rejection was
observed in 10 (8.5%) protocol biopsies and sCD30 levels, recipient age and ethnicity
were independently associated with this outcome. We observed a correlation between
sCD30 levels and CD30 gene expression (r=0.385, P=0.043). At this time, part of the
patients with criteria to continue in the study, were converted to SRL or maintained
with TAC, according to the randomization performed in the patient inclusion in the
project. In all patients, sCD30 levels decreased gradually, but this decrease was more
pronounced in the group converted to SRL (P<0.001), although the CD30 gene
expression was higher in these patients.Patients with interstitial fibrosis (IF) / tubular
atrophy (TA) ≥ I in the month24
protocol biopsy had higher sCD30 levels than patients
without IF/TA, in the SRL group (P=0.03) and in the TAC group (P=0.07). CD30+ cells
were observed in three out of 10 biopsies with inflammatory infiltrate from the SRL
group. In mixed lymphocyte cultures and in CD30+ Hodgkin lymphoma cell lines, SRL
and TAC diminished the number of CD30+ T cells and the sCD30 levels in the
supernatant, but the effect of SRL was stronger. In both experiments, inhibition of the
mTOR pathway induced greater release of EVs. In the Hodgkin lymphoma cell line
cultures, we observed a discrete increase of CD30+ vesicles after treatment with SRL
and EVR. Conclusions: Overall, sCD30 levels are lower in SRLtreated
patients, but the association between increased sCD30 levels and IF/TA at month24
posttransplantation
is stronger in SRL than in TACtreated
patients. Apparently, there
might be a change in the CD30 release pattern after mTOR inhibition, since expression
of the receptor expression on the cell membrane is significantly reduced, as well as
the soluble form cleveage, but the receptor can be released on the surface of EVs.
The influence of SRL treatment on sCD30 cleavage, which may involve multiple
mechanisms.
Introdução: A molécula CD30, da superfamília dos receptores do fator de necrose tumoral (TNFRS8), é expressa em linfócitos ativados. A clivagem de sua porção extracelular resulta no CD30 solúvel (sCD30) cujos níveis se correlacionam com desfechos clínicos no transplante renal. Objetivo: Investigar em pacientes transplantados renais se níveis séricos de sCD30 estão associados com lesões em biópsias protocolares 3 e 24 meses póstransplante, com o tipo de imunossupressão, presença de células CD30+ no enxerto, expressão gênica de CD30 e de genes relacionados em células mononucleares do sangue periférico. Investigar a influência dos imunossupressores em cultura celular. Casuística e métodos: O estudo foi conduzido em 169 receptores de rim de baixo risco imunológico, com exposição reduzida ao tacrolimo (TAC), randomizados aos 3 meses para serem convertidos ou não para sirolimo (SRL). Foi realizada cultura mista de linfócitos e de linhagem celular de linfoma de Hodgkin CD30+ para avaliação in vitro da liberação e expressão de CD30, após tratamento com SRL, everolimo (EVR) e TAC. Também foi avaliada a presença de CD30 na superfície de vesículas extracelulares (EVs). Resultados: Em relação ao estudo com pacientes, no terceiro mês póstransplante, rejeição subclínica foi observada em 10 (8,5%) biópsias protocolares e níveis de sCD30, idade do receptor e etnia estavam independentemente associados com este desfecho. Observamos uma correlação entre os níveis de sCD30 e expressão gênica de CD30 (r=0,385, P=0,043). Neste momento, parte dos pacientes, com critérios para continuar no estudo, foi convertida para SRL ou mantida com TAC, de acordo com a randomização feita na inclusão do paciente no projeto. Em todos os pacientes os níveis de sCD30 diminuíram gradualmente, mas essa diminuição foi maior no grupo convertido para SRL (P<0,001), embora a expressão gênica de CD30 tenha sido mais elevada nesse grupo. Pacientes com fibrose intersticial (IF) / atrofia tubular (TA) ≥ I na biópsia protocolar de 24 meses apresentaram níveis mais elevados de sCD30 do que pacientes sem IF/TA, no grupo SRL (P=0,03) e no grupo TAC (P=0,07). Células CD30+ foram observadas em três de 10 biópsias com infiltrado inflamatório do grupo SRL. Em cultura mista de linfócitos e de linfoma de Hodgkin, o tratamento com SRL e EVR também diminuiu a liberação de sCD30 mais significantemente que TAC. Em ambos os experimentos, a inibição da via do mTOR induziu uma maior liberação de EVs. Em linhagem de linfoma de Hodgkin observamos um aumento discreto de vesículas CD30+ após tratamento com SRL e EVR. Conclusão: Níveis de sCD30 são mais baixos em pacientes tratados com SRL, mas a associação entre níveis aumentados de sCD30 e IF/TA em 24 meses póstransplante é mais forte nos pacientes tratados com SRL, do que nos tratados com TAC. Aparentemente existe uma alteração do modo de liberação de CD30 com a inibição da via do mTOR, uma vez que a expressão do receptor na membrana plasmática é sigificamente reduzida, assim como a clivagem para a forma solúvel, mas o receptor pode ser liberado na superfície de EVs. A influência do tratamento com SRL sobre a clivagem do sCD30, que pode envolver múltiplos mecanismos.
Introdução: A molécula CD30, da superfamília dos receptores do fator de necrose tumoral (TNFRS8), é expressa em linfócitos ativados. A clivagem de sua porção extracelular resulta no CD30 solúvel (sCD30) cujos níveis se correlacionam com desfechos clínicos no transplante renal. Objetivo: Investigar em pacientes transplantados renais se níveis séricos de sCD30 estão associados com lesões em biópsias protocolares 3 e 24 meses póstransplante, com o tipo de imunossupressão, presença de células CD30+ no enxerto, expressão gênica de CD30 e de genes relacionados em células mononucleares do sangue periférico. Investigar a influência dos imunossupressores em cultura celular. Casuística e métodos: O estudo foi conduzido em 169 receptores de rim de baixo risco imunológico, com exposição reduzida ao tacrolimo (TAC), randomizados aos 3 meses para serem convertidos ou não para sirolimo (SRL). Foi realizada cultura mista de linfócitos e de linhagem celular de linfoma de Hodgkin CD30+ para avaliação in vitro da liberação e expressão de CD30, após tratamento com SRL, everolimo (EVR) e TAC. Também foi avaliada a presença de CD30 na superfície de vesículas extracelulares (EVs). Resultados: Em relação ao estudo com pacientes, no terceiro mês póstransplante, rejeição subclínica foi observada em 10 (8,5%) biópsias protocolares e níveis de sCD30, idade do receptor e etnia estavam independentemente associados com este desfecho. Observamos uma correlação entre os níveis de sCD30 e expressão gênica de CD30 (r=0,385, P=0,043). Neste momento, parte dos pacientes, com critérios para continuar no estudo, foi convertida para SRL ou mantida com TAC, de acordo com a randomização feita na inclusão do paciente no projeto. Em todos os pacientes os níveis de sCD30 diminuíram gradualmente, mas essa diminuição foi maior no grupo convertido para SRL (P<0,001), embora a expressão gênica de CD30 tenha sido mais elevada nesse grupo. Pacientes com fibrose intersticial (IF) / atrofia tubular (TA) ≥ I na biópsia protocolar de 24 meses apresentaram níveis mais elevados de sCD30 do que pacientes sem IF/TA, no grupo SRL (P=0,03) e no grupo TAC (P=0,07). Células CD30+ foram observadas em três de 10 biópsias com infiltrado inflamatório do grupo SRL. Em cultura mista de linfócitos e de linfoma de Hodgkin, o tratamento com SRL e EVR também diminuiu a liberação de sCD30 mais significantemente que TAC. Em ambos os experimentos, a inibição da via do mTOR induziu uma maior liberação de EVs. Em linhagem de linfoma de Hodgkin observamos um aumento discreto de vesículas CD30+ após tratamento com SRL e EVR. Conclusão: Níveis de sCD30 são mais baixos em pacientes tratados com SRL, mas a associação entre níveis aumentados de sCD30 e IF/TA em 24 meses póstransplante é mais forte nos pacientes tratados com SRL, do que nos tratados com TAC. Aparentemente existe uma alteração do modo de liberação de CD30 com a inibição da via do mTOR, uma vez que a expressão do receptor na membrana plasmática é sigificamente reduzida, assim como a clivagem para a forma solúvel, mas o receptor pode ser liberado na superfície de EVs. A influência do tratamento com SRL sobre a clivagem do sCD30, que pode envolver múltiplos mecanismos.