Relação entre o perfil metabolômico do secretoma embrionário e seu desenvolvimento in vitro
Data
2018-11-13
Autores
Camillo, Jacqueline 
Orientadores
Cedenho, Agnaldo Pereira
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
The need for a noninvasive,
reliable and rapid strategy for embryo
evaluation has promoted metabolomic studies in the area of assisted human
reproduction. The embryo physiology reveals more about the embryo than
can be determined by morphology alone, therefore, we believe that the preimplantation
embryo metabolism shows characteristics that may be
associated with embryonic development potential. In this context, we
hypothesized that levels of culture medium metabolites reflect the embryonic
development potential. Objectives: Evaluating the embryonic secretome
metabolomic profile and examine its relation with (i) morphological quality in
vitro culture D3 and (ii) its ability to reach the blastocyst stage. Method: The
metabolomic analysis of the embryonic secretoma in the D3 culture medium
of human embryos cultured in vitro was performed. For (i) evaluation of the
morphological quality to the D3, the samples were grouped according to the
embryo development, in High Quality or Low Quality. For (ii) assessment of
the competence to reach the blastocyst stage, the samples were grouped
according to the evolution to D5 \ D6 in Blastocyst or not Blastocyst. The
samples were analyzed using a quantitative and qualitative approach using
the AbsoluteIDQ® p180 Kit (Biocrates Life Science, AG, Austria).
Metabolites were compared using the MannWhitney
U test. Results: The
analysis of the profile of the embryonic secretome in the culture medium
showed differences between the evaluated groups. Statistical analysis
revealed 25 metabolites with statistically different concentrations between
embryos that showed high or low quality in D3 and 29 metabolites with
different concentrations when evaluated the embryonic competence to reach
the stage of blastocyst. Conclusion: the metabolites, products of the
embryonic secretome in the culture medium of the third day of in vitro
development, reflect embryonic morphological quality in D3 and the
competence to reach or not to blastocyst stage.
A necessidade de uma estratégia não invasiva, confiável e rápida para avaliação embrionária, tem promovido estudos metabolômicos na área de reprodução humana assistida. A análise da fisiologia embrionária revela mais sobre o embrião do que a morfologia isolada, portanto, acreditamos que o metabolismo préimplantacional dos embriões demonstra características que podem ser associadas ao potencial de desenvolvimento embrionário. Neste contexto, hipotetizamos que os níveis dos metabólitos do meio de cultura refletem o potencial de desenvolvimento embrionário. Objetivos: Avaliar o perfil metabolômico do secretoma embrionário e verificar sua relação com (i) a qualidade morfológica no D3 de cultivo in vitro e (ii) com a sua competência para atingir o estágio de blastocisto. Método: Foi realizada a análise metabolômica do secretoma embrionário no meio de cultura de D3 de embriões humanos cultivados in vitro. Para (i) avaliação da qualidade morfológica até o D3, as amostras foram agruparas de acordo com o desenvolvimento embrionário, em Alta Qualidade ou Baixa Qualidade. Já. para (ii) avaliação da competência para atingir o estágio de blastocisto, as amostras foram agrupadas de acordo com a evolução até D5\D6 em Blastocisto ou Não Blastocisto. As amostras foram analisadas por meio de uma abordagem quantitativa e qualitativa utilizando o AbsoluteIDQ® p180 Kit (Biocrates Life Science, AG, Áustria). Os metabólitos foram comparados entre os grupos utilizando o teste de MannWhitney. Resultados: A análise do perfil do secretoma embrionário no meio de cultura demonstrou diferenças entre os grupos avaliados. A análise estatística revelou 25 metabólitos com concentrações estatisticamente diferentes entre os embriões que apresentaram alta ou baixa qualidade até o D3 e 29 metabólitos com concentrações diferentes quando avaliada a competência embrionária para atingir o estágio de blastocisto. Conclusão: é possível concluir que os metabólitos, produtos do secretoma embrionário no meio de cultivo do terceiro dia de desenvolvimento in vitro, refletem a qualidade morfológica embrionária no D3 e a sua competência para atingir ou não o estágio de blastocisto.
A necessidade de uma estratégia não invasiva, confiável e rápida para avaliação embrionária, tem promovido estudos metabolômicos na área de reprodução humana assistida. A análise da fisiologia embrionária revela mais sobre o embrião do que a morfologia isolada, portanto, acreditamos que o metabolismo préimplantacional dos embriões demonstra características que podem ser associadas ao potencial de desenvolvimento embrionário. Neste contexto, hipotetizamos que os níveis dos metabólitos do meio de cultura refletem o potencial de desenvolvimento embrionário. Objetivos: Avaliar o perfil metabolômico do secretoma embrionário e verificar sua relação com (i) a qualidade morfológica no D3 de cultivo in vitro e (ii) com a sua competência para atingir o estágio de blastocisto. Método: Foi realizada a análise metabolômica do secretoma embrionário no meio de cultura de D3 de embriões humanos cultivados in vitro. Para (i) avaliação da qualidade morfológica até o D3, as amostras foram agruparas de acordo com o desenvolvimento embrionário, em Alta Qualidade ou Baixa Qualidade. Já. para (ii) avaliação da competência para atingir o estágio de blastocisto, as amostras foram agrupadas de acordo com a evolução até D5\D6 em Blastocisto ou Não Blastocisto. As amostras foram analisadas por meio de uma abordagem quantitativa e qualitativa utilizando o AbsoluteIDQ® p180 Kit (Biocrates Life Science, AG, Áustria). Os metabólitos foram comparados entre os grupos utilizando o teste de MannWhitney. Resultados: A análise do perfil do secretoma embrionário no meio de cultura demonstrou diferenças entre os grupos avaliados. A análise estatística revelou 25 metabólitos com concentrações estatisticamente diferentes entre os embriões que apresentaram alta ou baixa qualidade até o D3 e 29 metabólitos com concentrações diferentes quando avaliada a competência embrionária para atingir o estágio de blastocisto. Conclusão: é possível concluir que os metabólitos, produtos do secretoma embrionário no meio de cultivo do terceiro dia de desenvolvimento in vitro, refletem a qualidade morfológica embrionária no D3 e a sua competência para atingir ou não o estágio de blastocisto.