Avaliação de proteínas seminais relacionadas ao estresse oxidativo e sua associação com o nível de peroxidação lipídica em homens normozoospérmicos com ou sem fatores clínicos de agravo à fertilidade.
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Data
2018-01-23
Autores
Jeremias, Jessica Timoteo [UNIFESP]
Orientadores
Zylbersztejn, Daniel Suslik [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
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Resumo
Objetivo: Verificar os níveis seminais das proteínas SOD1, PRDX1, S100A9, APOA4 e GSTP1 como biomarcadores de peroxidação lipídica no plasma seminal. Métodos: Estudo transversal com 100 homens normozoospérmicos, dos quais 25 indivíduos não apresentavam fatores clínicos de agravo à fertilidade e 75 indivíduos apresentavam pelo menos um fator. Dessa forma, foram realizadas a análise seminal convencional e análises funcionais dos espermatozoides (atividade mitocondrial, integridade do acrossoma e fragmentação do DNA dos espermatozoides), além da avaliação do estresse oxidativo do plasma seminal. Por fim, as proteínas SOD1, PRDX1, S100A9, APOA4 e GSTP1 foram analisadas em todas as amostras pelo método de Western blotting. Para a análise estatística, as variáveis (qualidade seminal, qualidade funcional dos espermatozoides, níveis seminais de peroxidação lipídica e expressão seminal das proteínas) foram comparadas entre homens com e sem agravo aparente à fertilidade. Além disso, as amostras foram estratificadas de acordo com os níveis seminais de peroxidação lipídica e as trinta amostras com os menores níveis e as trinta amostras com os maiores níveis foram selecionadas para formação dos grupos baixa peroxidação lipídica (n=30) e alta peroxidação lipídica (n=30). Resultados: A comparação entre os indivíduos com e sem fator clínico de agravo à fertilidade apresentou diferenças quanto a IMC, porcentagem de gordura, motilidade não progressiva dos espermatozoides, concentração de neutrófilos, porcentagem de espermatozoides com acrossoma íntegro, porcentagem de espermatozoides sem atividade mitocondrial em sua peça intermediária, porcentagem de espermatozoides com o DNA fragmentado por estresse oxidativo e nível seminal de peroxidação lipídica. Além disso, os grupos baixa e alta peroxidação lipídica diferiram quanto ao nível seminal de peroxidação lipídica, a distribuição de homens com varicocele (p=0,039), maior no grupo de alta peroxidação lipídica e aos níveis seminais das proteínas SOD1 (p=0,003) e PRDX1 (p=0,016), hiperexpressas no grupo alta peroxidação lipídica. Conclusão: O nível seminal das proteínas S100A9, APOA4 e GSTP1 não é alterado com a alta peroxidação lipídica, assim como não se altera quando comparados entre os grupos com e sem fator de agravo à infertilidade, nem para SOD1 e PRDX1. Por outro lado, as proteínas SOD1 e PRDX1 estão hiperexpressas em homens com alta peroxidação lipídica no plasma seminal. Assim, pode-se sugerir que essas são potenciais biomarcadoras de infertilidade masculina causada especificamente pelo estresse oxidativo seminal.
Objective: To verify the seminal levels of SOD1, PRDX1, S100A9, APOA4 and GSTP1 proteins as biomarkers of semen lipid peroxidation. Methods: A cross-sectional study was carried out with 100 normozoospermic men, of whom 25 had no apparent clinical factors of infertility and 75 individuals had at least one factor. Thus, a conventional seminal analysis and sperm functional analyses were performed, as well as the evaluation of the oxidative stress in the seminal plasma. Finally, proteins SOD1, PRDX1, S100A9, APOA4 and GSTP1 were analyzed in all samples by Western blotting. For statistical analysis, variables (semen quality, sperm functional quality, semen lipid peroxidation levels and protein expression) were compared between men with and without clinical infertility factors. Furthermore, samples were also stratified according to seminal lipid peroxidation levels, and two groups were formed, one with low lipid peroxidation (LLP, n = 30) and one with high lipid peroxidation (HLP, n = 30), regardless of the factors of infertility. In both cases, groups were compared using an unpaired Student´s t test. Results: Clinical infertility factor groups differed regarding BMI, percentage of fat, neutrophil concentration, semen lipid peroxidation levels, percentage of spermatozoa with intact acrosome, and percentage of sperm without mitochondrial activity in their midpiece. In addition, LLP and HLP groups differed on the seminal lipid peroxidation levels and SOD1 and PRDX1 seminal levels. Conclusion: The expression of S100A9, APOA4 and GSTP1 proteins is not altered in seminal plasma with high lipid peroxidation. On the other hand, SOD1 and PRDX1 proteins are increased in seminal plasma with high lipid peroxidation, but not in other causes of male infertility. Thus, these are potential biomarkers of male infertility specifically caused by seminal oxidative stress.
Objective: To verify the seminal levels of SOD1, PRDX1, S100A9, APOA4 and GSTP1 proteins as biomarkers of semen lipid peroxidation. Methods: A cross-sectional study was carried out with 100 normozoospermic men, of whom 25 had no apparent clinical factors of infertility and 75 individuals had at least one factor. Thus, a conventional seminal analysis and sperm functional analyses were performed, as well as the evaluation of the oxidative stress in the seminal plasma. Finally, proteins SOD1, PRDX1, S100A9, APOA4 and GSTP1 were analyzed in all samples by Western blotting. For statistical analysis, variables (semen quality, sperm functional quality, semen lipid peroxidation levels and protein expression) were compared between men with and without clinical infertility factors. Furthermore, samples were also stratified according to seminal lipid peroxidation levels, and two groups were formed, one with low lipid peroxidation (LLP, n = 30) and one with high lipid peroxidation (HLP, n = 30), regardless of the factors of infertility. In both cases, groups were compared using an unpaired Student´s t test. Results: Clinical infertility factor groups differed regarding BMI, percentage of fat, neutrophil concentration, semen lipid peroxidation levels, percentage of spermatozoa with intact acrosome, and percentage of sperm without mitochondrial activity in their midpiece. In addition, LLP and HLP groups differed on the seminal lipid peroxidation levels and SOD1 and PRDX1 seminal levels. Conclusion: The expression of S100A9, APOA4 and GSTP1 proteins is not altered in seminal plasma with high lipid peroxidation. On the other hand, SOD1 and PRDX1 proteins are increased in seminal plasma with high lipid peroxidation, but not in other causes of male infertility. Thus, these are potential biomarkers of male infertility specifically caused by seminal oxidative stress.
Descrição
Citação
JEREMIAS, Jessica Timóteo. Avaliação de proteínas seminais relacionadas ao estresse oxidativo e sua associação com o nível de peroxidação lipídica em homens com ou sem fatores clínicos de agravo à infertilidade. 2018. 39 f. Tese (Mestrado) – Escola Paulista de Medicina. Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, 2018.