Expressão imunohistoquímica de CK7 e p16 em epitélio escamoso normal e neoplasias intraepiteliais cervicais e o desfecho clínico de pacientes com NIC de graus 1 e 2

Abstract

Persistent cervical infection cause by highrisk HPV is necessary for development of precursor lesions and tumor progression. Early diagnosis is a determining factor that assists in the treatment of the disease avoiding the progression or development of lesions. LAST consensus determines the use of immunohistochemistry of p16 protein as an adjunct to morphologic assessment of biopsies. The p16 has achieved a major role in the classification of CIN 2/3 lesions, but in CIN 1 vary greatly. Objective: Considered these facts and seeking to find new biomarkers to improve the diagnostic of lesions this immunohistochemical study aimed to evaluate the p16 and CK7 expression profile in different degrees of cervical squamous intraepithelial neoplasia (CIN), and nonneoplastic cervical tissue. Methods: Formalinfixed paraffinembedded tissue samples included 100 cervical biopsies of precursor lesions distributed into CIN 1, CIN 2, CIN 3 groups and 47 samples in the nonneoplastic group. Immunohistochemistry assay was performed in tissue microarray and the 4 μm tissue section with antibody clone G175405 for p16 at a dilution of 1:50 and the prediluted FLEX antibody clone OVTL 12/30 for CK7. Quantitative variables and clinical outcome were analyzed by KruskalWallis and Chisquare or exact Fisher tests, respectively (𝑃 < 0.05). CIN 1 and CIN 2 groups’ clinical followup exhibited that the most patients had a favorable outcome. Results: CIN 1 group showed the p16 or CK7 isolate immunoexpression had a greater sensitivity and negative predictive value as well as relevant specificity estimate. p16 positive predictive value was greater than CK7. Combined expression profile of p16 and CK7 exhibited that the sensitivity, specificity and positive and negative predictive values had the maximum index in the CIN 1 group. Combined expression of p16 and CK7 showed that 85.7% of patients presented unfavorable clinical outcome with the positive expression for both markers in CIN 2. Conslusion: CK7 and p16 combined immunoexpression showed a better diagnosis of cervical lesions and the negative expression in CIN 1 and CIN 2 groups had a greater negative predictive value for patients' clinical outcome.

A infecção uterina persistente causada pelo HPV de alto risco é necessária para o desenvolvimento de lesões precursoras e progressão tumoral. O diagnóstico precoce é um fator determinante que auxilia no tratamento da doença, evitando a progressão ou o desenvolvimento de lesões. O consenso LAST determina o uso da imunohistoquímica da proteína p16 como adjuvante na avaliação morfológica das biópsias. A p16 alcançou um papel importante na classificação das lesões de NIC 2/3, mas essa classificação na NIC 1 varia muito. Objetivos: Considerando esses fatos e buscando encontrar novos biomarcadores para melhorar o diagnóstico de lesões, este estudo imunohistoquímico objetivou avaliar o perfil de expressão da p16 e CK7 em diferentes graus de neoplasia intraepitelial cervical (NIC) e tecido cervical não neoplásico. Métodos: Amostras de tecido do colo uterino blocado em parafina incluíram 100 lesões distribuídas nos grupos NIC 1, NIC 2, NIC 3 e 47 amostras no grupo não neoplásico. O ensaio imunohistoquímico foi realizado em microarranjos teciduais e a secção de tecido de 4 μm com o clone de anticorpo G175405 para p16 numa diluição de 1:50 e o clone de anticorpo FLEX prédiluído OVTL 12/30 para CK7. As variáveis quantitativas e o desfecho clínico foram analisados pelos testes de KruskalWallis e Quiquadrado ou exato de Fisher, respectivamente. Resultados: O acompanhamento clínico dos grupos NIC 1 e NIC 2 demonstrou que a maioria das pacientes teve um desfecho favorável. O grupo NIC 1 mostrou que a imunoexpressão da p16 ou da CK7 apresentou maior sensibilidade e valor preditivo negativo, além de estimativa de especificidade relevante. O valor preditivo positivo em p16 foi maior do que em CK7. O perfil de expressão combinado de p16 e CK7 demonstrou que a sensibilidade, a especificidade e os valores preditivos positivos e negativos apresentaram o índice máximo no grupo NIC 1. A expressão combinada de p16 e CK7 mostrou que 85,7% das pacientes apresentaram desfecho clínico desfavorável com a expressão positiva para ambos os marcadores na NIC 2. Conclusão: A imunoexpressão combinada de CK7 e p16 mostrou um melhor diagnóstico de lesões cervicais e a expressão negativa nos grupos NIC 1 e NIC 2 apresentou valor preditivo negativo maior para o desfecho clínico das pacientes.