Avaliação da resposta imune celular de mulheres com câncer de mama localmente avançado
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Data
2018-09-27
Autores
Moura, Jose Fernando do Prado [UNIFESP]
Orientadores
Melo, Analy Salles de Azevedo [UNIFESP]
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Breast cancer (BC) is the most frequent and the second leading cause of cancer death among women. The immune response in cancer in the development and prognosis of the cancer patient is the focus of current studies due to the new possibilities of treatment (immunotherapy). T lymphocytes contribute to tumor immunosurveillance indicating that the immune system influences the prognosis and response to chemotherapy. However, its clinical relevance is not fully established in breast cancer. Based in immunohistochemistry there are four BC subtypes: Luminal (A and B), HER2+ and Triple negative (TN).This study aimed to characterize the profile of circulating T, NKT cells and their subpopulations, in patients with locally advanced breast cancer. Two prospective cohorts of women with locally advanced breast cancer (n=82) and healthy controls (CTRL) (n=25) were analysed. Tumor subtype distribution
was as follow: 31 Luminal, 20 HER2+ and 31 Triple-Negative. The peripheral blood was collected from the pacients before neoadjuvant chemotherapy. Immunophenotyping of the cell populations by flow cytometry was performed for analysis of the cellular immune response. Pathological complete response (pCR) was defined as the absence of invasive neoplasia in the surgical specimen (breast and axilla). The Mann Whitney test was used for analysis between the two groups and Kruskall-Wallys for analysis between three or more groups, using the program GraphPad Prism, v6.0. Patients with pCR showed lower % of lymphocytes TCD3+ (p=0.007), TCD4+ (p=0,02), CD4+/CD8+ ratio (p=0.02) and higher % of TCD8+ (p=0.01). The TCD8+naive/memory ratio was lower in TN than Luminal and CTRL. Regarding naïve T lymphocytes and memory, the TCD8+ naive / memory ratio was decreased in TN compared to Luminal and CTRL. Patients with pCR had reduced levels of TCD8 + memory and high CD4+ naive / memory and CD8+ naive / memory ratios (respectivally, p=0,003, p=0,01, p=0,02). Patients with BC (all subtypes) and TN subtype show reduced levels of CD161 + NKT cells compared to CTRL (p = 0.006 and p = 0.004, respectively). The NKT CD94 + were reduced in luminals when compared to HER2+ (p = 0.04), TN (p = 0.02) and CTRL (p = 0.005). There was an increase in % of total iNKT cells compared to CTRL (p <0.05). The % of CD4+CD8 + iNKT were reduced in the luminal (p = 0.01), HER2+ (p = 0.02) and TN (p = 0.001) subtypes compared to the CTRL. The iNKT CD4+/ CD8+ ratio were lower in Luminal compared to HER2+ (p = 0.02). There was an increase in % of iNKT CD8+ in Luminal compared to HER2+ (p = 0.003) and CTRL (p = 0.002) and higher in TN compared to HER2+ (p = 0.02) and CTRL (p = 0.01). No difference was observed when the iNKT subpopulations according to pCR. There is an association of the cellular immune response with the type of response to the treatment, and the analysis of the subpopulations of T lymphocytes in the peripheral blood is a good tool to predict response to neoadjuvant chemotherapy in patients with breast cancer.
O câncer de mama (CM) é o mais incidente e o segundo mais letal nas mulheres. A resposta imune no câncer é o foco de estudos devido às novas possibilidades de tratamentos (imunoterapia). Os linfócitos T contribuem para imunovigilância tumoral e corroborando com a influência do sistema imune no prognóstico e resposta à quimioterapia. No entanto, a relevância clínica não é totalmente estabelecida no CM. Quatro subtipos imunohistoquímicos são identificados: Luminais (A e B), HER2+ e Triplo Negativo. Este estudo teve como objetivo caracterizar o perfil de células T, NKT e iNKT circulantes e suas subpopulações em pacientes com CM localmente avançado. Foi realizado um estudo de coorte e prospectivo em mulheres com CM localmente avançado (n=82) e controles saudáveis (CTRL; n=25). 31 tumores foram do subtipo Luminal, 20 HER2+ e 31 Triplo-negativo (TN). Foi coletado de sangue periférico das pacientes antes do início da quimioterapia neoadjuvante. Para análises da resposta imune celular foi realizada a imunfenotipagem das populações celulares por citometria de fluxo. Resposta patológica completa (RPC) consistia na ausência de neoplasia invasiva na peça pós-operatória (mama e axila). Foi utilizado o teste de Mann Whitney para análise entre os dois grupos e o Kruskall-Wallys para análise entre três ou mais grupos, utilizando o programa GraphPad Prism, v6.0. Não houve diferença nos percentuais de linfócitos T entre subtipos de CM e controles. Foram observados níveis percentuais reduzidos de linfócitos TCD3+ (p=0,007), TCD4+ (p=0,02), e da relação CD4+/CD8+ (p=0,02) e elevados de linfócitos TCD8+ (p=0,01) em pacientes com RPC. Com relação aos linfócitos T naive e memória, a relação TCD8+naive/memória foi diminuída no TN quando comparado aos Luminais e CTRL. Pacientes com RPC tiveram níveis reduzidos de TCD8+ memória e elevados índices CD4+ naive/memória e CD8+ naive/ memória (p=0,003, p=0,01, p=0,02, respectivamente). As pacientes com CM apresentaram níveis reduzidos de células NKT CD161+, assim com os subtipos TN quando comparadas aos CTRL (p=0,006 e p=0,004, respectivamente). Os percentuais de NKT CD94+ circulante foram reduzidos nos luminais, quando comparado ao HER2+ (p=0,04), TN (p=0,02) e CTRL (p=0,005). Houve um aumento do percentual de células iNKT totais quando comparado aos CTRL (p<0,05), e não houve diferença significativa da subpopulação iNKT CD4+ entre os subtipos de CM e/ou CTRL. Os valores percentuais de iNKT CD4+CD8+ foram reduzidos nos subtipos luminais (p=0,01), HER2+ (p=0,02) e TN (p=0,001) quando comparado aos CTRL. A razão relação iNKT CD4+/CD8+ foram baixos nos Luminais, quando comparado ao HER2+ (p=0,02). Houve aumento do percentual de iNKT CD8+ nos luminais com relação ao HER2+ (p=0,003) e CTRL (p=0,002) e também foi maior no TN comparado com HER2+(p=0,02) e CTRL (p=0,01). Não houve diferença quando as subpopulações iNKT em relação à RPC. Existe uma associação da resposta imune celular com o tipo de resposta ao tratamento, sendo a análise das subpopulações de linfócitos T no sangue periférico uma boa ferramenta para predizer resposta a quimioterapia neoadjuvante nas pacientes com câncer de mama.
O câncer de mama (CM) é o mais incidente e o segundo mais letal nas mulheres. A resposta imune no câncer é o foco de estudos devido às novas possibilidades de tratamentos (imunoterapia). Os linfócitos T contribuem para imunovigilância tumoral e corroborando com a influência do sistema imune no prognóstico e resposta à quimioterapia. No entanto, a relevância clínica não é totalmente estabelecida no CM. Quatro subtipos imunohistoquímicos são identificados: Luminais (A e B), HER2+ e Triplo Negativo. Este estudo teve como objetivo caracterizar o perfil de células T, NKT e iNKT circulantes e suas subpopulações em pacientes com CM localmente avançado. Foi realizado um estudo de coorte e prospectivo em mulheres com CM localmente avançado (n=82) e controles saudáveis (CTRL; n=25). 31 tumores foram do subtipo Luminal, 20 HER2+ e 31 Triplo-negativo (TN). Foi coletado de sangue periférico das pacientes antes do início da quimioterapia neoadjuvante. Para análises da resposta imune celular foi realizada a imunfenotipagem das populações celulares por citometria de fluxo. Resposta patológica completa (RPC) consistia na ausência de neoplasia invasiva na peça pós-operatória (mama e axila). Foi utilizado o teste de Mann Whitney para análise entre os dois grupos e o Kruskall-Wallys para análise entre três ou mais grupos, utilizando o programa GraphPad Prism, v6.0. Não houve diferença nos percentuais de linfócitos T entre subtipos de CM e controles. Foram observados níveis percentuais reduzidos de linfócitos TCD3+ (p=0,007), TCD4+ (p=0,02), e da relação CD4+/CD8+ (p=0,02) e elevados de linfócitos TCD8+ (p=0,01) em pacientes com RPC. Com relação aos linfócitos T naive e memória, a relação TCD8+naive/memória foi diminuída no TN quando comparado aos Luminais e CTRL. Pacientes com RPC tiveram níveis reduzidos de TCD8+ memória e elevados índices CD4+ naive/memória e CD8+ naive/ memória (p=0,003, p=0,01, p=0,02, respectivamente). As pacientes com CM apresentaram níveis reduzidos de células NKT CD161+, assim com os subtipos TN quando comparadas aos CTRL (p=0,006 e p=0,004, respectivamente). Os percentuais de NKT CD94+ circulante foram reduzidos nos luminais, quando comparado ao HER2+ (p=0,04), TN (p=0,02) e CTRL (p=0,005). Houve um aumento do percentual de células iNKT totais quando comparado aos CTRL (p<0,05), e não houve diferença significativa da subpopulação iNKT CD4+ entre os subtipos de CM e/ou CTRL. Os valores percentuais de iNKT CD4+CD8+ foram reduzidos nos subtipos luminais (p=0,01), HER2+ (p=0,02) e TN (p=0,001) quando comparado aos CTRL. A razão relação iNKT CD4+/CD8+ foram baixos nos Luminais, quando comparado ao HER2+ (p=0,02). Houve aumento do percentual de iNKT CD8+ nos luminais com relação ao HER2+ (p=0,003) e CTRL (p=0,002) e também foi maior no TN comparado com HER2+(p=0,02) e CTRL (p=0,01). Não houve diferença quando as subpopulações iNKT em relação à RPC. Existe uma associação da resposta imune celular com o tipo de resposta ao tratamento, sendo a análise das subpopulações de linfócitos T no sangue periférico uma boa ferramenta para predizer resposta a quimioterapia neoadjuvante nas pacientes com câncer de mama.