Diagnostico molecular e aspectos clínicos de brasileiros com mutação do gene Hnf1b: analise do recrutamento de pacientes por presença de cistos renais e hiperglicemia

Abstract

INTRODUCTION: Diabetes mellitus (DM) is a heterogeneous group of diseases that has the characteristic of chronic hyperglycemia. In most of these diseases there are the interaction of genetic and environmental factors. However, there are several monogenic forms of DM, especially the Maturity Onset Diabetes of the Young (MODY). There are at least 14 genes that are associated with this type of DM, with predominance of secondary forms of mutations in HNF1A and GCK genes. HNF1B mutations gene are associated with MODY. The secondary syndrome relative of mutation in this gene, initially denominated "Syndrome of Cysts Renal and Diabetes" results in a very heterogenous phenotype, with manifestations in several organs. In the last years, there are proposals to optimize the recruitment of patients with mutations in this gene, although by phenotypes selection related or for elaboration of risk scores. There are few Brazilian studies that investigated mutations in the HNF1B gene and the clinical consequence. OBJECTIVE: The aims of our study was: to analyse genetic diagnosis and to describe clinical characteristics of Brazilians patients with mutation in the HNF1B gene. To investigate the positivity rate of the test using two strategies: clinical suspicion for MODY and negative for mutations in the GCK and HNF1A genes and through the selection of patients for the presence of renal cysts and hyperglycemia. MATERIAL AND METHODS: In an article we selected 32 patients due to clinical suspicion for MODY and negative for mutations in the GCK and HNF1A genes, independent of the phenotype. In another article, we selected 29 patients with clinical suspicion of HNF1B-MODY who presented renal cysts and hyperglycemia. For these analyzes we use the MLPA and Sanger Sequencing techniques. Clinical data were taken by medical records. RESULTS: In the study who the patients were selected by the negativity of mutations in the GCK and HNF1A genes, we found a positive case (3% positivity in the cohort). The patient presented heterozygous whole gene in HNF1B, presenting the following clinical characteristics: DM, diabetic retinopathy, renal failure, hypomagnesemia and alterations in liver enzyme tests. In the other article who selected patients by renal cysts and hyperglycemia we found two patients with variants in this gene (7% positivity in the cohort). A case with the mutation p.Pro328Leufs * 48 (c.983delC) and the following clinical data: renal cysts, DM, hypomagnesaemia, hypertension and hypertrophic cardiomyopathy. The other patient presented heterozygous whole gene in HNF1B, presenting the following clinical features: renal cysts, DM, hypomagnesaemia, agenesis of body and tall of pancreas, hypertension, dyslipidemia, exocrine pancreatic insufficiency, subclinical hypothyroidism. After confirmed this patient, we performed the tests in the available relatives and confirmed the same mutation in another three subjects, whose phenotype included renal cysts and agenesis of pancreas in all patients and one with hypomagnesemia and bicornuate uterus. CONCLUSION: We performed the genetic diagnosis and described the clinical characteristics of Brazilian patients with mutation in the HNF1B gene, whose the phenotype was heterogeneous. The positivity rate of Brazilian patients for mutation in the HNF1B gene recruited for the presence of renal cysts and hyperglycemia was 7%.

INTRODUÇÃO: O diabetes mellitus (DM) é um grupo heterogêneo de doenças com a hiperglicemia crônica como ponto comum. Na maior parte delas existe a interação de fatores genéticos e ambientais. Ainda, existem diversas formas monogênicas de DM, com destaque para o chamado Maturity Onset Diabetes of the Young (MODY). Existem ao menos14 genes que estão associados a esse tipo de DM, com predomínio das formas secundárias a mutações nos genes HNF1A e GCK. As mutações no gene HNF1B também são associadas ao MODY. A síndrome secundária a mutações neste gene inicialmente denominada como “Síndrome de Cistos Renais e Diabetes” resulta em um fenótipo muito heterogêneo, com manifestações em diversos órgãos. Nos últimos anos existem propostas de otimizar o recrutamento de pacientes com mutações neste gene, através de seleção por fenótipos relacionados ou por elaboração de escores de risco. Existem poucos estudos brasileiros que investigaram mutações no gene HNF1B e suas repercussões clínicas. OBJETIVO: Os objetivos do nosso estudo foram: realizar diagnóstico genético e descrever características clínicas de brasileiros com mutação no gene HNF1B. Investigar a taxa de positividade através de dois tipos de recrutamento: em pacientes com diagnóstico clínico de MODY e com resultado negativo para formas GCK-MODY e HNF1A-MODY e através da seleção de pacientes pela presença de cistos renais e hiperglicemia. MATERIAL E MÉTODOS: Em um artigo selecionamos 32 pacientes por suspeita clínica de MODY e negativos para mutações nos genes GCK e HNF1A, independentes do fenótipo em questão. Em outro artigo, selecionamos 29 pacientes com suspeita clínica de HNF1B-MODY que apresentaram obrigatoriamente cistos renais e hiperglicemia. Para essas análises utilizamos as técnicas de MLPA e Sequenciamento de Sanger. Dados clínicos foram coletados dos prontuários médicos. RESULTADOS: No estudo onde os pacientes foram selecionados pela negatividade de mutações nos genes GCK e HNF1A encontramos um caso positivo (3% positividade na coorte). O paciente apresentou deleção em heterozigose do gene HNF1B inteiro apresentando as seguintes características clínicas: DM, retinopatia diabética, insuficiência renal, hipomagnesemia e alterações em testes das enzimas hepáticas. No outro artigo com pacientes selecionados por cistos renais e hiperglicemia encontramos 2 pacientes com variantes nesse gene (7% de positividade na coorte). Um caso com a mutação p.Pro328Leufs*48(c.983delC) e os seguintes dados clínicos: cistos renais, DM, hipomagnesemia, hipertensão arterial (HAS) e cardiomiopatia hipertrófica. O outro paciente apresentou deleção em heterozigose do gene HNF1B inteiro apresentando as seguintes características clínicas: cistos renais, DM, hipomagnesemia, agenesia de corpo e cauda de pâncreas, HAS, dislipidemia, insuficiência exócrina pancreática, hipotireoidismo subclínico. Após confirmação desse paciente, realizamos os testes nos familiares disponíveis e confirmamos a mesma mutação em mais 3 indivíduos, cujo fenótipo incluiu cistos renais e agenesia de pâncreas em todos e um com hipomagnesemia e útero bicorno. CONCLUSÃO: Realizamos o diagnóstico genético e descrevemos as características clínicas de pacientes brasileiros com mutação no gene HNF1B, cujo fenótipo encontrado foi heterogêneo. A taxa de positividade de pacientes brasileiros para mutação no gene HNF1B recrutados pela presença de cistos renais e hiperglicemia foi de 7%..