Correlação entre mutações pontuais em LTR e níveis de carga proviral em portadores assintomáticos do vírus linfotropico de células T humanas tipo 1 (HTLV-1).

Correlação entre mutações pontuais em LTR e níveis de carga proviral em portadores assintomáticos do vírus linfotropico de células T humanas tipo 1 (HTLV-1).

Alternative title Correlation between LTR point mutations and proviral load levels among human T cell lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) asymptomatic carriers
Author Kleine Neto, Walter Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Sanabani, Sabri Saeed Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Medicina Translacional – São Paulo
Abstract Introdução: Estudos in vitro demonstram que delecoes ou mutacoes pontuais inseridas em cada repeticao imperfeita de 21 pb do Elemento Responsivo a Tax (TRE) nos promotores virais do Virus Linfotropico de celulas T humanas Tipo 1 (HTLV-1) selvagens aboliram a inducao de Tax. A partir deste dado, supomos que mutacoes similares poderiam afetar a proliferacao de celulas infectadas por HTLV-1 e alterar a carga proviral (CPv). Para testar esta hipotese, conduzimos uma analise genetica de corte transversal para comparar sequencias nucleotidicas completas de LTR que cobrem a regiao TRE-1 em uma amostragem de portadores assintomaticos de HTLV-1 com diferentes niveis de carga proviral. Metodos: Foi avaliado um total de 94 portadores assintomaticos de HTLV-1 com as sequencias de longa repeticao terminal (LTR) extremidade 5` determinadas e carga proviral de DNA de Tax definida usando-se uma sensivel tecnica de PCR em Tempo Real com SYBR Green. Os 94 individuos foram divididos em tres grupos baseados na medida da carga proviral: 31 com baixa, 29 com intermediaria e 34 com alta CPv. Alem disso, cada grupo foi comparado levando-se em conta sexo, idade e genotipo viral. Em outra analise, foi comparada a mediana da carga proviral entre individuos infectados com o virus mutante e virus o tipo selvagem. Resultados: Usando-se uma analise categorica, a substituicao G232A, localizada no dominio A do motivo TRE-1, foi detectada em 38,7% (12/31), 27.5% (8/29), e 61.8% (21/34) dos individuos com baixa, intermediaria e alta CPv, respectivamente. Uma diferenca significativa na deteccao desta mutacao foi encontrada entre sujeitos com alta e baixa CPv e entre aqueles com alta e intermediaria CPv (ambos p < 0,05), mas nao entre aqueles com baixa e intermediaria CPv (p > 0,05). Estes resultados foram confirmados por uma analise nao-parametrica que mostrou forte evidencia de aumento da CPv dentre individuos HTLV-1 positivos com a mutacao G232A em relacao aqueles sem esta mutacao (p < 0,03). Nenhuma diferenca significante foi observada entre os grupos em relacao a idade, sexo ou subtipo viral (p > 0,05). Conclusao: Os dados descritos aqui mostram que alteracoes no dominio A do motivo TRE-1 do HTLV-1, em especial a mutacao G232A pode aumentar a replicacao do HTLV-1 na maioria dos pacientes infectados

Background: In vitro studies have demonstrated that deletions and point mutations introduced into each 21 bp imperfect repeat of Tax-responsive element (TRE) of the genuine human T-cell leukemia virus type I (HTLV-1) viral promoter abolishes Tax induction. Given these data, we hypothesized that similar mutations may affect the proliferation of HTLV-1 infected cells and alter the proviral load (PvL). To test this hypothesis, we conducted a crosssectional genetic analysis to compare the near-complete LTR nucleotide sequences that cover the TRE1 region in a sample of HTLV-1 asymptomatic carriers with different PvL burden. Methods: A total of 94 asymptomatic HTLV-1 carriers with both sequence from the 5’ long terminal repeat (LTR) and a PvL for Tax DNA measured using a sensitive SYBR Green realtime PCR were studied. The 94 subjects were divided into three groups based on PvL measurement: 31 low, 29 intermediate, and 34 high. In addition, each group was compared based on sex, age, and viral genotypes. In another analysis, the median PvLs between individuals infected with mutant and wild-type viruses were compared. Results: Using a categorical analysis, a G232A substitution, located in domain A of the TRE1 motif, was detected in 38.7% (12/31), 27.5% (8/29), and 61.8% (21/34) of subjects with low, intermediate, or high PvLs, respectively. A significant difference in the detection of this mutation was found between subjects with a high or low PvL and between those with a high or intermediate PvL (both p < 0.05), but not between subjects with a low or intermediate PvL (p > 0.05). This result was confirmed by a non-parametric analysis that showed strong evidence for higher PvLs among HTLV-1 positive individuals with the G232A mutation than those without this mutation (p < 0.03). No significant difference was found between the groups in relation to age, sex or viral subtypes (p > 0.05). Conclusion: The data described here show that changes in domain A of the HTLV-1 TRE-1 motif resulting in the G232A mutation may increase HTLV-1 replication in a majority of infected subjects.
Keywords Humanos
Adulto
Meia-Idade
Idoso
Idoso de 80 Anos ou mais
Portador Sadio/virologia
Vírus 1 Linfotrópico T Humano/fisiologia
Mutação Puntual
Provírus/fisiologia
Sequências Repetidas Terminais/genética
Portador Sadio/fisiopatologia
Estudos Transversais
Produtos do Gene tax/genética
Produtos do Gene tax/metabolismo
Genes pX
Infecções por HTLV-I/fisiopatologia
Infecções por HTLV-I/virologia
Vírus 1 Linfotrópico T Humano/genética
Elementos de Resposta
Carga Viral
Replicação Viral
Fatores de Risco
Humanos
Adulto
Meia-Idade
Idoso
Idoso de 80 Anos ou mais
Language Portuguese
Date 2014
Published in KLEINE NETO, Walter. Correlação entre mutações pontuais em LTR e níveis de carga proviral em portadores assintomáticos do vírus linfotropico de células T humanas tipo 1 (HTLV-1). Tese (Doutorado em Ciências) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2014.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 37 p.
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/23236

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