PPG - Patologia
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- ItemAcesso aberto (Open Access)A importância da genotipagem molecular no estudo de mola hidatiforme(Universidade Federal de São Paulo, 2021-06-21) Laviola, Gabriela Marini [UNIFESP]; Malinverni, Andréa Cristina de Moraes [UNIFESP]; Alves, Maria Teresa de Seixas [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/0357765137541523; http://lattes.cnpq.br/1528799723644407; http://lattes.cnpq.br/4617877106475078Objetivo: Analisar a aplicabilidade da técnica de STR nas amostras parafinadas de MH, do arquivo do Departamento de Patologia. Métodos: Foram selecionadas 38 amostras de tecido placentário e as áreas de interesse (decídua e vilo corial) foram demarcadas para extração do DNA separadamente. Após a extração, 17 amostras foram incluídas no estudo, devido à concentração e qualidade do DNA. A metodologia aplicada foi a genotipagem molecular por repetições curtas em tandem – STR, utilizando Investigator IDplex Plus – Qiagen, incluindo 15 marcadores autossômicos e a Amelogenina X/Y. Além disso, as análises dos eletroferogramas foram realizadas pelo software Gene Mapper ID-X. Resultados: De acordo com o exame anatomopatológico e a revisão do patologista, dos 17 casos estudados, seis foram diagnosticados como MHC (cinco amplificaram), três como MHP (dois amplificaram), cinco conflitantes entre ANM/MHP (dois amplificaram) e três com suspeita de MHC/Mosaico (todos amplificaram). Além disso, ao realizar a comparação com a análise da STR, em cinco casos concluiu-se a necessidade do tecido materno para realizar a genotipagem (casos 1, 8, 9, 12 e 15), em oito a STR confirmou o anatomopatológico (casos 2, 3, 4, 5, 7, 10, 15 e 16), sendo dois destes com a presença do tecido materno para análise da genotipagem (casos 10 e 16), quatro foram inconclusivos (casos 6, 11, 13 e 17, amplificação de poucos marcadores) e em um caso não houve amplificação para nenhum marcador (caso 14). Conclusão: Acreditamos que a genotipagem por STR possui papel relevante na determinação da origem parental das molas hidatiformes. Em suma, apesar dos desafios e limitações encontradas na qualidade das amostras para aplicar essa metodologia, ela mostrou-se importante tanto para refinar o diagnóstico das molas hidatiformes, quanto distinguir com precisão molas hidatiformes de abortos não molares em conjunto com análise cuidadosa do anatomopatológico.
- ItemEmbargoEfeito do tratamento do acetato na exacerbação da inflamação alérgica pulmonar em camundongos ovariectomizados(Universidade Federal de São Paulo, 2024-03-12) Umana, Evelyn Roxana Perez [UNIFESP]; Ferreira, Caroline Marcantonio [UNIFESP]; cferreira16@unifesp.br; http://lattes.cnpq.br/2611231931842917; https://lattes.cnpq.br/9049387198515465Objetivo: Avaliar o papel do tratamento preventivo e terapêutico com acetato, um ácido graxo de cadeia curta (AGCC), e potenciais alterações intestinais durante a exacerbação da inflamação alérgica pulmonar em animais alérgicos ovariectomizados e redesafiados. Métodos: Camundongos fêmeas da linhagem BALB/c, com idades entre 6 e 7 semanas foram utilizadas no estudo. No tratamento preventivo, os animais receberam acetato (1g/kg) por via intraperitoneal (IP) em dias alternados, 15 dias antes das sensibilizações, até um dia antes do início dos desafios. O tratamento terapêutico foi administrado em dias alternados após a ovariectomia, utilizando a mesma dose e via de administração até um dia antes da eutanásia. A indução da inflamação alérgica pulmonar ocorreu com duas sensibilizações nos dias 0 e 14, utilizando uma solução de [OVA (30µg+Al (OH)3 (2mg)] via IP. Os desafios foram realizados expondo os animais a uma solução de 1% de OVA/PBS por nebulização nos dias 21, 22, 23 e 24. A ovariectomia foi realizada no 34º dia. Os camundongos foram reexpostos ao OVA nos dias 44, 45, 46 e 47. A eutanásia foi realizada 24 horas após o último desafio. Resultados: O tratamento preventivo resultou na redução do número de células totais, eosinófilos, IgE e da citocina IL-5, além de promover o aumento de células T reguladoras. As análises histológicas pulmonares mostraram uma diminuição na produção de muco neutro e de anéis inflamatórios peribronquiais e perivasculares. No intestino, observou-se uma restauração dos níveis de expressão gênica de MUCINA 2 e OCLUDINA. Por outro lado, o tratamento terapêutico não teve efeito sobre a inflamação alérgica pulmonar. Conclusões: O tratamento preventivo demostrou eficácia na redução da exacerbação da inflamação alérgica pulmonar. Além disso, restaurou os níveis das expressões genicas de MUCINA 2 e da OCLUDINA a valores similares dos grupos basais no colón intestinal. Palavras-chaves: acetato, ácidos graxos de cadeia curta, inflamação alérgica pulmonar, asma e hormônios sexuais femininos.
- ItemSomente MetadadadosAnálise do perfil de metilação da região promotora do Éxon IV do gene BDNF e suas implicações no estresse percebido e cognição em uma população não-clínica de professoras da rede pública de ensino da cidade de São Paulo(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2021) Rissatti, Luciana Fungaro [UNIFESP]; Oliveira, Daniela Rodrigues De [UNIFESP]; Universidade Federal de São PauloThe present study aimed to evaluate the methylation profile of the exon IV promoter region of the BDNF gene in a population of women (non-clinical), comparing this profile with the level of perceived stress and cognitive performance. Eighty-two teachers from the municipal education network (Regional Board of Education of Santo Amaro) in the city of São Paulo were selected. This is an analytical cross-sectional observational study with a quantitative approach, where individuals answered socioeconomic, demographic, clinical and lifestyle questionnaires, and psychometric scales: (i) perceived stress scale (PSS) and (ii) Hospital scale of Anxiety and Depression (HADS). The individuals' mnemonic performance was also analyzed using the Rey AuditoryVerbal Learning Test (RAVLT). Afterwards, DNA extraction (peripheral blood) and pyrosequencing analysis were performed to quantify the percentage of methylation at specific sites in the promoter region of exon IV of the BDNF gene. As a result, individuals had high levels of perceived stress (mean=29.89; sd=6.51). The statistical analysis performed using the generalized linear model (GLzM) showed that high levels of perceived stress are associated with CpGs 6 (p-adj. = 0.041), 7 (p-adj. = 0.043), 8 (p-adj. = 0.043), 8 (p-adj. = 0.000), 9 (p-adj. = 0.006) and 13 (p-adj. =0.033). Regarding cognitive performance, our population had a lower mean performance for the learning index (mean=42.94; sd=9.14), immediate recall (mean=8.93; sd=2.09) and late recall (mean= 8.90; sd= 2.38). CpG 5 showed a significant association with acquisition (padj. = 0.017), CpGs 9 (p-adj. = 0.022), 11 (p-adj. = 0.023) and 12 (p-adj. = 0.018) with immediate evocation (p-adj. = 0.041), and CpGs 9 (p-adj. = 0.006), 11 (p-adj. = 0.026), 12 (p-adj. = 0.000) and 13 (p-adj. = 0.015) with late recall. Our results indicate that specific CpG sites are associated with subjective perception of stress and cognitive performance (learning and episodic memory recall). This is an unprecedented study, which seeks to verify levels of perceived stress and correlate it with cognitive performance variables (memory) in a non-clinical female population. It is expected that with this study new public health policies may emerge in the work environment to reduce stress levels, to prevent the onset of disorders related to it, such as depression and anxiety disorder.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Avaliação do microambiente ósseo nas metástases de carcinoma de mama e próstata(Universidade Federal de São Paulo, 2022-12-15) Garcia, Jairo Greco [UNIFESP]; Alves, Maria Teresa de Seixas [UNIFESP]; Garcia Filho, Reynaldo Jesus [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/3220080940832469; http://lattes.cnpq.br/0357765137541523; http://lattes.cnpq.br/9632340057361768Objetivo: Analisar o microambiente ósseo nas metástases de carcinoma de mama e próstata. Métodos: Foram selecionados 25 pacientes entre os sexos feminino e masculino, portadores respectivamente de carcinomas metastáticos ósseos de mama e próstata. A análise dos pacientes se deu pela avaliação imuno-histoquimica com anticorpos anti-CD105 e por hematoxilina eosina para contagem de microvasos, osteoblastos e osteoclastos no nicho metastático do microambiente ósseo. Paciente amputados por causas vasculares foram utilizados como controle do estudo. Resultados: A expressão do CD105 foi observada nos tecidos vasculares da metástase e não em tecido normal ou células do nicho tumoral. O aumento de osteoblastos e osteoclastos acompanhou o crescimento de microvasos. Em relação aos diagnósticos e carcinoma de mama e próstata não houve diferença estatística na análise dos dados quanto a localização, expressão de CD105 e densidade de microvasos, contudo, o carcinoma de mama apresentou maior contagem de osteoblastos. Conclusões: A expressão de CD105 é observada apenas nos tecidos onde ocorre a neoformação de microvasos e que o aumento destes gera um recrutamento de osteoblastos não apenas na periferia da metástase, mas também no tecido ósseo normal, bem como consequentemente o aumento do número de osteoclastos.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Astrocitoma pilocítico em adultos: estudo histopatológico, imuno-histoquímico e molecular com correlação clínico-patológica(Universidade Federal de São Paulo, 2022) Marcos, Débora Salles [UNIFESP]; Stávale, João Norberto [UNIFESP]; Malinverni, Andréa Cristina de Moraes [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/1528799723644407; http://lattes.cnpq.br/2058938630118943; http://lattes.cnpq.br/9335834040696901Introdução: Os astrocitomas pilocíticos são os tumores primários do SNC mais encontrados em crianças e adolescentes, sendo raros em indivíduos adultos. Enquanto alguns autores relatam ter encontrado um prognóstico favorável quando o tumor é encontrado na faixa etária adulta, outros o associaram a uma maior mortalidade. A alteração molecular mais observada em casos de astrocitoma pilocítico no grupo pediátrico é a fusão gênica BRAF-KIAA1549, e ainda existem poucos estudos que confirmem a presença desta fusão na população adulta. Objetivo: Este estudo se propôs a investigar a presença de fusões do gene BRAF na região 7q34 em indivíduos adultos com astrocitoma pilocítico, além de identificar a expressão imuno-histoquímica de BRAFV600E, associando estes achados aos histopatológicos e clínicos. Métodos: Foi realizado um levantamento bibliográfico que culminou nos Capítulos I, II e III, que abordam as principais informações acerca do tumor e seu desenvolvimento. A partir disso, seguiu-se um estudo retrospectivo contido no Capítulo IV, relativo a 21 pacientes com idade superior a 18 anos com diagnóstico de astrocitoma pilocítico. As amostras foram selecionadas após análise de materiais dos anos de 1991 a 2015, provenientes do arquivo do Departamento de Patologia da UNIFESP, e submetidos à revisão histopatológica, exame imuno-histoquímico e FISH. Resultados: Através da avaliação da imunorreatividade de BRAFV600E, 29% dos casos foram classificados como grupo 1, 57% como grupo 2 e 14% como grupo 3, sendo considerados como positivos apenas os grupos 2 e 3. Na análise por FISH encontrou-se a fusão BRAF-KIAA1549 em apenas um caso, enquanto em outros dois foram encontradas deleções referentes à fusão FAM131B-BRAF. Conclusão: Os casos considerados positivos para a imunorreatividade de BRAFV600E potencialmente podem ser tratados com inibidores de BRAF, enquanto para os casos negativos é necessário realizar uma confirmação diagnóstica através de técnicas moleculares para escolher o tratamento adequado. Em relação às fusões gênicas, sugere-se que a presença da variante FAM131B-BRAF possa ser mais significativa nestes indivíduos. Até onde sabemos, este é o primeiro estudo brasileiro que objetivou investigar as possíveis alterações genéticas no gene BRAF em astrocitomas pilocíticos, especificamente em indivíduos adultos. Apenas 1 paciente veio a óbito, porém por complicações operatórias e não pela doença em si, sugerindo uma boa evolução destes indivíduos. Por fim, propõem-se novos estudos que investiguem outros genes e suas alterações, bem como novas propostas de marcadores imuno-histoquímicos que sejam relevantes.