Navegando por Palavras-chave "Parede Celular"
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- ItemSomente MetadadadosAcao da griseofulvina sobre parede celular de fungos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1976) Gomes, Mioco Fueta [UNIFESP]
- ItemSomente MetadadadosAvaliacao dos mecanismos de resistencia a polimixina B entre isolados clinicos de Acinetobacter baumannii(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Girardello, Raquel [UNIFESP]A. baumannii e um agente etiologico frequente de infeccoes relacionadas a assistencia a Saúde no Brasil, pois possui grande capacidade em sobreviver em condicoes adversas e desenvolver ou adquirir mecanismos de resistencia aos antimicrobianos. As altas taxas de resistencia juntamente com a falta de novas opcoes terapeuticas disponibilizadas pelas industrias farmaceuticas atualmente, tem levado a necessidade de incluir novamente na pratica clinica, drogas antigas como as polimixinas que, atualmente, constituem uma das ultimas opcoes terapeuticas em casos de infeccoes por bacilos Gram negativos multirresistentes. Neste estudo foram analisados os fenotipos de resistencia natural e induzida a polimixina B em isolados clinicos de A. baumannii. Um isolado sensivel e outro resistente as polimixinas foram submetidos ao cultivo em concentracoes crescentes de polimixina B para a inducao de resistencia as mesmas. Os isolados clinicos de A. baumannii foram analisados por microscopia eletronica de transmissao, antes e apos o cultivo na presenca de polimixina B. Foram realizados o sequenciamento e qRT-PCR do sistema de dois componentes PmrAB, relacionado com o surgimento de resistencia as polimixinas em A. baumannii. Analises dos mecanismos de resistencia relacionados a parede celular bacteriana foram realizadas para estudar a associacao destes ou nao com os fenotipos de resistencia as polimixinas. O isolado sensivel a polimixina reverteu o perfil de sensibilidade aos β-lactamicos e aminoglicosideos apos a inducao de resistencia a polimixina B. Esse perfil de sensibilidade foi estavel, mesmo apos o cultivo na ausencia do antimicrobiano. Esse mesmo isolado nao conseguiu sobreviver em meio hipotonico, sugerindo uma diminuicao da integridade da parede celular bacteriana. Essas alteracoes no perfil de sensibilidade nao foram observadas no isolado com resistencia natural quando cultivado na presenca de polimixina B. Nesse isolado, diferente do isolado sensivel, foi observado um espessamento na parede celular, mesmo antes da exposicao ao antimicrobiano. O sequenciamento do sistema de dois componentes PmrAB mostrou duas mutacoes no gene pmrB, somente no isolado com resistencia induzida a polimixina B. Para esses genes, tambem foram observados diferentes niveis de transcricao entre o isolado com resistencia induzida e com resistencia natural, sugerindo que esse segundo fenotipo nao seja regulado pelo sistema PmrAB. A diminuicao da expressao da porina OmpW foi relacionada ao surgimento de resistencia induzida as polimixinas nos isolados de A. baumannii. As mutacoes nas PBPs de alto peso molecular observadas nos isolados com resistencia natural a polimixina podem ser responsaveis pelo fenomeno de espessamento da parede celular e, consequentemente, pelo fenotipo de resistencia. A concentracao dos ions presentes no meio de cultura deve ser avaliado antes da realizacao dos testes de sensibilidade as polimixinas, para garantir a confiabilidade e reprodutibilidade dos testes
- ItemAcesso aberto (Open Access)Caracterização de proteinases, identificação de proteínas associadas a parede celular diferencialmente expressas e estudo preliminar de vesículas extracelulares de paracoccidioides brasiliensis(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2007) Matsuo, Alisson Leonardo [UNIFESP]; Puccia, Rosana [UNIFESP]
- ItemSomente MetadadadosEfeito de variacoes das condicoes de cultivo na composicao da parede celular de Mucor javanicus Wehmer (Zygomycetes)(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1979) Mauro, Claudia [UNIFESP]
- ItemSomente MetadadadosEstudo do papel da Histidina quinase reguladora do dimorfismo (DRK1) do fungo patogênico Paracoccidioides brasiliensis(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2021) Navarro, Marina Valente [UNIFESP]; Batista, Wagner Luiz [UNIFESP]; Universidade Federal de São PauloThermal dimorphic fungi of Paracoccidioides genus are the causative agents of paracoccidioidomycosis (PCM), a systemic endemic disease in Latin America with high incidence in Brazil. This pathogen presents as infective mycelium at 25°C in the soil, reverting to its pathogenic form when inhaled by mammalian host (37°C). This ability to switch from mycelium to yeast form is essential to disease development. Among dimorphic fungus species, dimorphism regulating histidine kinase (Drk1) plays an essential role to morphological transition. Histidine kinases (HK) are very important as virulence and cellular survival regulators. These kinases are present in bacteria and fungi, but absent in mammalian cells. This evidence suggests that HKs are interesting pharmacological targets to fungal diseases. Recently, our group characterized P. brasiliensis DRK1 (PbDRK1) expression during mycelium-yeast transition. It was observed that this gene is predominantly expressed in pathogenic yeast phase. In addition, we verified that when Dkr1 pharmacological inhibitor (iDrk1) was incubated with mycelium at 37°C, it alters the dimorphic switch. Hence, the purpose of this study was to investigate the role of PbDrk1 in cell wall modulation of P. brasiliensis. Previous data indicates a correlation between PbDrk1 and MAP kinase Hog1 over osmotic stress condition. In the present work it was observed decreased Hog1 phosphorylation levels after incubation with iDrk1 over osmotic stress but also related with cell wall integrity, confirming the participation of this HK in Hog1 signaling pathway. Additionally, we observed that PbDrk1 participates in fungal resistance to different cell wall disturbing agents, such as Congo Red, Calcofluor White and sodium chloride, by reducing yeasts viability after treatment with iDrk1. In order to verify the role of PbDRK1 in cell wall morphogenesis, we performed RTqPCR analysis. The results indicated that samples previously exposed to iDrk1 presented higher expression levels in several genes related to cell wall modulation. Among the genes analyzed, we highlighted FKS1, a β-glucan synthase which was 3,6-fold increase when compared to no treatment control. Confocal microscopy analysis and flow cytometry showed higher β-glucan exposure in cell surface of P. brasiliensis after 24 h incubation with iDrk1. Accordingly, through phagocytosis assay, it was observed a significant higher phagocytic index in yeasts treated with iDrk1 than control group, evidencing the role of PbDrk1 in cell wall modulation, which becomes a relevant target to be investigated. In parallel, the immune response profile was also assayed, with increased levels of pro-inflammatory cytokines. It is important to highlight that iDrk1 concentration used on this study did not reduce yeast viability. Finally, our data strongly suggests that PbDrk1 modulates cell wall components expression,among which we can point out b-glucan. The comprehension of this signaling pathway may be of great value to identify targets to antifungal molecular activity, since HK are not present in mammals.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Identificação de proteínas plasmáticas e de componentes proteicos e lipídicos na parede celular de dois isolados geneticamente distintos de Paracoccidioides brasiliensis(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2013) Longo, Larissa Valle Guilhen [UNIFESP]; Puccia, Rosana [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7890676927592894; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Os componentes da parede celular sao os principais responsaveis pela interacao fungo-hospedeiro. A tese apresentada mostra a caracterizacao proteica e lipidica da parede celular dos isolados Pb3 e Pb18 de P. brasiliensis, que pertencem a grupos filogeneticos diferentes e provocam um perfil distinto de infeccao em modelo murino. Proteinas plasmaticas aderidas a parede celular do isolado Pb3, menos virulento,tambem foram identificadas, sendo que aquelas relacionadas com transporte, ativacao/regulacao do sistema complemento e coagulacao foram as mais abundantes. A interacao de muitas delas com componentes fungicos, como por exemplo clusterina, hemopexina, transtiretina, ceruloplasmina, alfa-1-antitripsina, apolipoproteina A-1 e apolipoproteina B-100, foi relatada pela primeira vez. A incubacao de leveduras com plasma aumentou sua internalizacao em ensaio de fagocitose in vitro, ressaltando a importancia do plasma na relacao patogeno-hospedeiro. A analise dos componentes lipidicos da parede celular foi realizada em leveduras de Pb3 e Pb18 cultivadas na presenca ou ausencia de plasma humano. Foram identificadas 49 (Pb3) e 38 (Pb18)especies de fosfolipideos de diversas classes. Os acidos graxos C18:1 e C18:2 foram mais abundantes, e C18:2 predominou em Pb18 em relacao a Pb3. Brassicasterol foi o esterol predominante em ambos os isolados, e a presenca de plasma no meio de cultura aumentou sua abundancia, principalmente em Pb3. Hex-C18:0-OH/dC19:2-Cer foi a principal monohexosilceramida identificada em ambos os isolados. A composicao proteica da parede celular de Pb3 e Pb18 em ambas as fases morfologicas foi analisada por cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS/MS) e 208 (Pb3 micelio), 164 (Pb3 levedura), 148 (Pb18 micelio), e 239 (Pb18 levedura) proteinas foram identificadas e classificadas em categorias funcionais. Entre as 132 proteinas identificadas somente na fase leveduriforme, 92 tambem foram exclusivas de Pb18, muitas delas com potencial papel na interacao parasita-hospedeiro. 80% das proteinas foram classificadas como secretadas e 60% apresentaram ortologos em vesiculas extracelulares de fungos, sugerindo a participacao dessas estruturas na composicao da parede celular. Adicionalmente, uma mini-revisao e um capitulo de livro foram escritos agrupando as informacoes existentes sobre a parede celular de P. brasiliensis. Acreditamos que esta analise comparativa entre dois isolados de P. brasiliensis com perfis de virulencia distintos ajudara a esclarecer o papel das proteinas plasmaticas e dos componentes proteicos e lipidicos da parede celular na interacao fungo-hospedeiro
- ItemSomente MetadadadosPapel da fracao alcali-insoluvel F1, extraida da parede celular do Sporothrix schenckii, na resposta inflamatoria da esporotricose(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1992) Zini, Monica Magalhaes Costa [UNIFESP]
- ItemSomente MetadadadosPurificação e caracterização da B-galactosidase de sementes de copaifera langsdorffii e suas relações com o metabolismo do xiloglucano(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1995) Alcantara, Paulo Henrique Netto de [UNIFESP]; Dietrich, Sonia Machado de Campos [UNIFESP]