Navegando por Palavras-chave "Miogênese"

Agora exibindo 1 - 3 de 3
  • Imagem de Miniatura
    Item
    Acesso aberto (Open Access)
    Análise da incorporação de ácidos graxos ômega-3 (EPA e DHA) na membrana celular de mioblastos C2C12: avaliação dos efeitos na proliferação e diferenciação celular
    (Universidade Federal de São Paulo, 2023-09-11) Monteiro, Daniela Carvalho [UNIFESP]; Moreira, Vanessa [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/1310560200014128; http://lattes.cnpq.br/4745332502370423
    Objetivo: Analisar o grau de incorporação dos ácidos graxos do tipo ômega-3 ácido eicosapentaeinoico (EPA) e docosahexaenoico (DHA) em membrana de mioblastos C2C12 cultivados em cultura celular e suplementado com nanoemulsão de óleo de peixe (NOP). Avaliar esse efeito sobre a proliferação e diferenciação destas células miogênicas com especial ênfase na resolvina E1 (RvE1). Métodos: Células C2C12 mioblásticas de camundongo foram cultivadas com NOP (25 µM de EPA) por 3 a 5 dias em protocolo de cultivo das células em proliferação ou diferenciação, respectivamente. A análise do grau de incorporação de EPA e DHA foi realizada em cromatografia a gás acoplada à espectrometria de massas (CG/MS). De outra parte, as células foram previamente incubadas com inibidor do receptor de BLT1 (LY293111- 0,25 M) ou com os inibidores da via de sinalização do receptor CMKLR1/ChemR23 (rapamicina, 0,08 µM- inibidor de mTOR, ou wortmanina, 500 nM, inibidor de PI3K) seguida pela fosfolipase A2 (FLA2) isolada do veneno de Crotalus durissus terrificus (0,16 M). Após 24 h, foram realizadas as análises da expressão proteica de BLT1, COX-2, CYP450, MyoD e Myf-5 (proliferação) e CMKLR1/ChemR23 e Myf-6 (diferenciação) por western blotting. Ainda o grau de proliferação foi analisado pelo padrão de incorporação de BrDU, por espectrofotometria. Resultados: Os resultados mostraram que as células cultivadas com NOP, em meio proliferativo, apresentaram aumento (p>0,05) no teor de EPA e DHA (118,41±13,51 e 5,43±0,64 µg/mg, respectivamente), quando comparadas às células controle (18, 91±2.24 e 0,74±0,10 µg/mg de proteína, respectivamente). De forma semelhante, mioblastos incubados por 6 dias com NOP até atingir a confluência de 100% (protocolo experimental de diferenciação) apresentaram elevação (p<0,05) no teor de EPA e DHA (139,41 ±24,0 e 70,63 ± 11,43 µg/mg de proteína, respectivamente), quando comparadas às células incubadas com meio de cultura apenas (controle) (45,96 ± 1,44 e 16,23 ± 1,07 µg/mg de proteína, respectivamente). Apenas as células em proliferação incubadas com FLA2 e suplementadas com NOP apresentaram aumento de 25% e 30%, nos níveis de expressão proteica de COX-2 e CYP450 4A (p<0,05), respectivamente. As células em proliferação, incubadas com FLA2 e não suplementadas com NOP apresentaram aumento nos níveis de BLT1 (35%), enquanto as em diferenciação apresentaram diminuição de 60% na expressão deste receptor. Quando suplementadas com NOP não apresentaram alteração na expressão de BLT1. Apenas mioblastos em diferenciação e incubadas com FLA2 apresentaram redução da expressão de CMKLR1 (35%). Mioblastos suplementados ou não com NOP, na presença da FLA2, apresentaram aumento significativo de 90 e 25%, respectivamente, na incorporação do BrdU. Por outro lado, a associação com com Ly293111, levou à diminuição significativa de 26 e 43%, na incorporação do BrdU. As células incubadas com FLA2 e o inibidor do receptor BLT1 (Ly293111) apresentaram redução significativa da expressão de Myf5 e MyoD enquanto as células em prolfieração com NOP não apresentaram alteração nos níveis de expressão proteica destes fatores miogênicos. Células em diferenciação cultivadas com NOP e FLA2 apresentam diminuição da expressão de MyoD de forma significativa (15%). No entanto, estas células quando incubadas com FLA2 associada ao rapamicina, mas não com wortmanina ou Ly293111, apresentaram elevação significativa (65%) da expressão de MyoD. A análise morfológica da miofibras em células C2C12 pré-suplementadas com NOP indicou a formação de fibras mais espessas. Conclusões: A suplementação de mioblastos C2C12 com NOP aumenta a incorporação de EPA e DHA, favorecendo a produção de mediadores lipídicos pró-resolutivos. A presença de receptores BLT1 e do receptor CMKLR1/ChemR23 evidencia a atividade modulatória de RVE1 sobre a proliferação e diferenciação dos mioblastos C2C12; o aumento da proliferação das células C2C12 induzida pela FLA2 via receptor BLT1 pode ser mediada pela RVE1, mas independente dos fatores Myf5 e MyoD; Mioblastos suplementadas com EPA e DHA apresentam mais formação de miotubos espessos.
  • Nenhuma Miniatura disponível
    Item
    Somente Metadadados
    Efeitos do tratamento com insulina em curto e longo prazo no músculo esquelético de ratos submetidos à lesão térmica
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2018-05-23) Quintana, Hananiah Tardivo [UNIFESP]; De Oliveira, Flavia [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/3387760393535776; http://lattes.cnpq.br/5140110296873584; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Burn Injuries (Bi) In Children Are Among The Greatest Epidemiological Problems In The World. Extensive Bi Above 40% Of The Total Body Surface Area Results In Systemic Responses, Such As Insulin Resistance And Increased Protein Catabolism In Skeletal Muscle. The Administration Of Insulin In The Extensive Bi Aims To Stimulate The Synthesis And To Attenuate The Degradation Of Protein. The Aim Of The Study Was To Evaluate The Effects Of Insulin Treatment After Bi On The Skeletal Muscle Of Young Wistar Rats. The Animals Were Distributed In Four Groups: Control (C) And Submitted To The Scalding Burn Injury (Si), Both Associated Or Not With Daily Insulin Treatment (C+I And Si+I). Each Of These Groups Was Subdivided Into Two (N=08) With Different Periods Of Euthanasia, 4 (Short-Term) And 14 (Long-Term) Days Of Treatment. Blood Glucose, Body Mass And Feed Intake And Water Were Monitored Daily. After 4 And 14 Days Of Injury, Euthanasia Was Performed And The Gastrocnemius Muscle Was Dissected For Morphological, Morphome
  • Nenhuma Miniatura disponível
    Item
    Somente Metadadados
    O papel dos receptores B1 e B2 de cininas no reparo do músculo esquelético
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2020-12-18) Silva, Leonardo Martins [UNIFESP]; Pesquero, Joao Bosco [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo
    Fibrosis is characterized by an excessive accumulation of extracellular matrix components, being one of the main sequelae acquired after muscle injury. In severe injuries, where healing occurs slowly, fibrosis prevents proper muscle contraction and can lead to muscle contractures and chronic pain. Besides being an important aggravating factor of muscular dystrophies, it is also one of the main causes that lead professional and amateur athletes to abandon their activities early. The study of factors leading to fibrosis reduction and muscle regeneration is strongly relevant. Modulation of B1R and B2R receptor activity of the kallikrein-kinin system has shown benefits in the application of some pathophysiology and, more recently, in tissue regeneration, however, there is a need to better understand this mechanism in skeletal muscle. In this study we assess that animals knocked out for B1 and B2 kinin receptors have histomorphological, cellular and molecular differences regarding post-injury tissue repair when compared to wild-type (WT) animals in the days following the injury. Kinin B2-Receptor Knockout Mice (B2KO) show a pattern of structural disorganization and intense tissue fibrosis in macroscopic evaluations from the 15th post-injury day, when compared with WT animals. Kinin B1-Receptor Knockout Mice (B1KO) showed better performance in post-injury functional tests from the 4th day on, presenting an excellent ability to recover post-injury performance. These animals also showed greater angiogenic capacity, greater regenerative potential and decreased fibrosis through suppression of Col1a via the TGF-β/Smads pathway. Our data also showed that B2KO and B1B2KO animals showed intense tissue destruction, with low myogenic capacity, excessive fibrosis and loss of performance in post-injury functional tests. The results presented in the study corroborate the hypothesis that a probable blockade of the B1 receptor, and/or the overexpression/activation of the B2 receptor in the early stages of acute injury, provide better conditions for maintaining the repair with less fibrosis and gain in function. Therefore, they contribute to the development of new therapeutic tools for musculoskeletal injuries associated with the kallikrein-kinin system and its receptors.