Navegando por Palavras-chave "Lipólise"
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- ItemAcesso aberto (Open Access)Atividades metabólicas e endócrinas de adipócitos extraídos do tecido adiposo subcutâneo e visceral de animais obesos induzidos por dieta hiperlipídica e suplementados com ácidos graxos ômega-3(Universidade Federal de São Paulo, 2015-04-29) Cunha, Roberta Dourado Cavalcante da [UNIFESP]; Vale, Maria Isabel Cardoso Alonso [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)The efforts dedicated to finding the cure for obesity and associated disorders lead to an intense interest in adipocyte metabolism. The consumption of ω-3 fatty acids (ω-3 FA) presents beneficial effects on changes caused by obesity. The aim of this study was to characterize the metabolic and endocrine changes of isolated isolated adipocytes from obese mice induced by high fat (HF) diet, supplemented or not with fish oil rich in ω-3 FA (EPA/DHA, 5:1) with emphasis on the differential response of subcutaneous and visceral adipose deposits, inguinal (ING) and retroperitoneal (RP) region, respectively. For this, C57BL/6 males mice 8 weeks-old, were divided into 4 groups: CO, animals fed with control diet (9% of lipids); CO + ω-3, fed with control diet supplemented with ω-3 FA; HF, fed with HF diet (59% of lipids); and HF + ω-3, fed with HF diet supplemented with ω-3 FA. The animals were evaluated for food intake, body mass, glucose tolerance test (GTT) and insulin (ITT), insulin resistance and plasma lipid profile. From ING and PR isolated adipocytes, we evaluated the glucose uptake, lipogenesis, de novo synthesis of FA, lipolysis and the gene and protein expression of adipokines. The animals fed with the HF diet presented a higher body weight, glucose and insulin intolerance and insulin resistance, increase in liver weight and a higher serum concentrations of total and LDL cholesterol. It was also observed a greater weight of ING and PR adipose tissues, as well as an increament in the size of their cells (hypertrophy). The fish oil per se, administered in a prevention model (i.e., the ω-3 FA supplementation starting 4 weeks before the induction of obesity) in mice fed with CO diet, had no effect on body weight, blood glucose and insulin, or on the metabolic activities (lipolysis, lipogenesis, glucose uptake), as well as on the secretion or gene expression of cytokines, in isolated adipocyes. On the other hand, the fish oil showed an anti-obesogenic action associated to beneficial effects on dyslipidemia, insulin resistance and dysfunction of adipocytes arising from HF diet. HL diet altered differently the functions of RP and ING adipocytes, since RP adipocytes became potentially lipolytics and producers of pro-inflammatory cytokines with a reduced function on the de novo synthesis of FA, while ING adipocytes showed a decrease on glucose uptake and on secretion of the anti-inflammatory cytokine adiponectin, besides contributing on the secretion of TNFα and IL-6 citokines. Moreover, our results show an important and differential role of adipocytes per se, positively correlated with its hypertrophy, on the secretion of cytokines, contesting the exclusive importance given to immune cells that infiltrate the white adipose tissue in conditions of obesity.
- ItemSomente MetadadadosEfeitos da inGestão de um extrato de cha verde descafeinado rico em epigalocatequina-3-galato sobre o metabolismo lipidico de camundongos alimentados com dieta hiperlipidica(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2014) Santana, Aline Alves [UNIFESP]O tecido adiposo tem como uma das suas principais funcoes armazenamento de energia, mas somente nas duas ultimas decadas foi reconhecido como um orgao endocrino com papel central no metabolismo. Sabe-se que obesidade e ocasionada principalmente pelo desequilibrio energetico causado pelo excesso na inGestão de nutrientes em relacao ao gasto energetico. Estrategias como restricao calorica, aumento da atividade fisica e intervencoes nutricionais tem sido utilizadas para o controle da inflamacao cronica de baixo grau e na restauracao do perfil metabolico sistemico e teciduais. O cha verde e a bebida mais antiga e popular produzida a partir das folhas secas da Camellia sinensis. As catequinas do cha, em especial a epigalocatequina-3-galato (EGCG) tem recebido consideravel atencao por seus efeitos na Saúde humana, principalmente em doencas metabolicas como a obesidade. Os efeitos das catequinas sao atribuidos principalmente pela capacidade de interagirem, direta ou indiretamente, com o tecido adiposo. Frente a este quadro, buscamos elucidar os efeitos da inGestão do EGCG sobre o remodelamento do tecido adiposo de animais alimentados com dieta hiperlipidica, com potencial atencao para a via lipolitica. Para testar nossa hipotese, foram utilizados 26 camundongos suicos com 4 semanas de vida. Foram alimentados com dieta controle ou dieta hiperlipidica durante 8 semanas e subdivididos em 4 grupos, onde 2 grupos receberam placebos e 2 grupos tratados com EGCG via gavagem. Avaliamos a massa corporal, concentracoes sericas de triacilglicerol, colesterol total, lipoproteina de alta densidade (HDL), glicose, insulina, acidos graxos nao-esterificados, glicerol e adiponectina. Diferentes depositos de tecido adiposo foram dissecados para avaliacao da expressao proteica e atividade da AMPK, pAMPK, pHSL, Perilipina, pACC por Western Blotting e do conteudo das citocinas TNF-α e IL-10 no tecido adiposo epididimal e retroperitoneal por ELISA. Analises histologicas foram realizadas em cortes corados com hematoxilina-eosina. A EGCG reduziu a massa corporal em animais obesos em relacao aos seus controles obesos. Isso tambem foi observado nos animais magros, tratados com EGCG. Os niveis de triglicerides circulantes foram reduzidos com a suplementacao com EGCG no grupo controle comparado ao grupo dieta controle placebo. A fosforilacao das proteinas AMPK e HSL foram maiores no grupo que recebeu dieta controle e EGCG no tecido adiposo epididimal e retroperitoneal, respectivamente em comparacao ao grupo que recebeu apenas dieta controle. Nos ainda detectamos maior fosforilacao da proteina ACC nos animais que receberam dieta controle tratado com EGCG em ambos os tecidos adiposos. O grupo que recebeu dieta controle tratado com EGCG demonstrou maiores conteudos das citocinas TNF-α, IL-10 e adiponectina em comparacao ao respectivo grupo placebo. Alem disso, este grupo suplementado com EGCG mostrou menor area do adipocito. Assim, pode-se inferir que os efeitos de EGCG podem estar associados com o TNF-α, uma vez que houve um aumento concomitante na lipolise e TNF-α. Nos nao observamos efeitos significativos nos animais obesos com o tratamento de 8 semanas
- ItemAcesso aberto (Open Access)Efeitos do extrato de chá verde sobre marcadores inflamatórios e lipolíticos no tecido adiposo de camundongos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011-04-27) Cunha, Claudio Alexandre [UNIFESP]; Oyama, Lila Missae [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Objective: To analyze the effects of green tea extract on the production of cytokines and anti-inflammatory (TNF-á, IL-6, IL-10 and adiponectin) in mesenteric adipose tissue, as well as protein analysis of inflammatory signaling pathway TLR-4, MyD88, TRAF6 and lipolytic. To analyze the expression of the protein structures involved in lipolysis ATGL, ABHD5 (CGI-58), LSH and PERI in the mesenteric adipose tissue of mice treated with commercial diet and lipids and the possible changes caused by concomitant use of ecstasy green tea. Methods: Swiss mice, aged twelve weeks animals were divided into four groups: commercial diet and water gavage (CA), commercial diet green tea and gavage (CC), high-fat diet and gavage water (HA) and high-fat diet and gavage green tea. After eight weeks of treatment, animals were sacrificed. The blood was collected to obtain serum, and deposits of white adipose tissue, epididymal, retroperitoneal and mesenteric, as well as gastrocnemius skeletal muscle and liver were dissected immediately after sacrifice and analyzed. By ELISA was performed content analysis of the cytokine adiponectin, IL-6, IL-10, TNF-á. By the method of Western blotting we analyzed the contents of TLR-4 and its signaling pathway, MyD88 and TRAF6, as well as proteins involved in lipolysis ATGL, LSH, and the PERI ABHD5 (CGI-58). Results: The green tea extract increased the serum HDL cholesterol and adiponectin, as well as the concentration of IL-6, IL-10, TNF-á and the relationship IL-10/TNF-á in adipose tissue in the commercial diet. The TLR-4 and MyD88 were decreased when the fat diet was associated with green tea. The proteins involved in lipolysis ATGL, LSH, and the PERI ABHD5 (CGI-58), were increased with the consumption of green tea. Conclusion: The extract of green tea improved the serum profile of the animals treated with high-fat diet, compared to the increased concentration of HDL cholesterol and adiponectin. Millie a favored antiinflammatory, shown by an increase in the ratio IL-10/TNF-á, and decreased protein expression of TLR4 and its signaling pathway. Additionally, increased expression of proteins involved in lipolysis.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Efeitos dos ácidos graxos palmítico e palmitoleico sobre parâmetros metabólicos de adipócitos 3T3-L1(Universidade Federal de São Paulo, 2015-02-27) Cruz, Maysa Mariana [UNIFESP]; Vale, Maria Isabel Cardoso Alonso [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)WAT is a body?s energy reservoir stocking lipids in the form of TAG and is considered an endocrine organ, it secretes hormones and cytokines (adipokines). There are recent reports describing the involvement of mitochondrial function in the regulation of various WAT?s processes: the proliferation of pre-adipocytes, adipogenesis and on lipids and carbohydrates metabolism. The palmitoleic acid (C16:1n7) is a monounsaturated fatty acid (FA) omega-7 present in macadamia oil. It have been demonstrated beneficial effects of this FA on pancreatic beta-cells, muscle and liver as well as on the plasma lipid profile in animal models and humans. Furthermore, recent studies have shown that the palmitoleic acid enhances the insulin action in muscle and suppresses hepatic steatosis. However, there are few data in the literature about the effects of C16:1n7 on the metabolism of white adipocytes. There are no reports about its effect on both metabolic and mitochondrial function of these cells. This project aims to investigate parameters of mitochondrial and metabolic function in adipocytes under the influence of both FA palmitic (saturated C16: 0) and palmitoleic. 3T3-L1 clonal cells were directed to differentiate into mature adipocytes and the following parameters were evaluated: cell viability, DNA fragmentation, lipolysis, lipogenesis, mitochondrial mass, gene expression, oxygen consumption, ATP contente, citrate synthase activity and proteic analysis of mitochondrial complexes and PGC1alpha. According to the interpretation of toxicity curves of both AG obtained by cell viability testing and DNA fragmentation, it was chosen to treat the 3T3-L1 cells with a concentration of 100 µM of the FA, from induction of differentiation to day 10 post-differentiation, condition which the majority of tests was carried out. The C16:1n7 treatment increased the basal and isoproterenol-stimulated lipolysis, the incorporation of FA into TAG and its oxidation into CO2, the basal incorporation of glucose into glycerol-3-P, the oxygen consumption and intracellular ATP concentration. In other hand, the C16:1n7 reduced the incorporation of acetate into TAG, the mitochondrial mass, the citrate synthase activity and proteic contente of mitochondrial complex I. These effects did not occur in adipocytes treated with C16:0. No changes in the expression of genes related to mitochondrial biogenesis (PGC-1?, TFAM and NRF1), mitochondrial function (CPT1 and UCP2) or antioxidant activity (SOD 1 and 2, catalase and glutathione peroxidase). Preliminary data also showed that the treatment with C16:1n7 increases the expression of the following genes: (1) the glucose transporter GLUT4, (2) the insulin sensitizing hormone, adiponectin, and (3) the lipolytic enzyme ATGL. There was no change in the expression of HSL, ACC, FAS, perilipin, glycerol kinase, lipin and PEPCK enzymes. In conclusion, the C16: 1n7 plays an important role on the metabolic and mitochondrial parameters, suggesting an increase in energy expenditure of adipocytes. One hypothesis to these effects is that the palmitoleic acid is accelerating cell energy metabolism by stimulating triglyceride/fatty acid cycle. We propose that the palmitoleic acid should be clinically tested in therapies against obesity and related diseases.
- ItemEmbargoEficácia da enzimas Lipolíticas Fosfatidilcolina e Ácido Deóxicólico na redução de gordura localizada corporal: uma revisão integrativa(Universidade Federal de São Paulo, 2024-09-06) Messias, Taluana Aparecida Nascimento [UNIFESP]; Aveiro, Mariana Chaves [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/8912160623559438; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)A supervalorização do corpo nos dias atuais, faz com que as mulheres busquem métodos e alternativas para reduzir a gordura localizada e para melhorar o contorno corporal. A aplicação de injetáveis com substâncias lipolíticas, denominada intradermoterapia vem crescendo, devido a sua facilidade e baixo custo para o tratamento de gordura localizada. Pistor, um médico francês, criou a técnica de intradermoterapia, que consiste na em injeções com fármacos lipolíticos altamente diluídos (Fosfatidilcolina e Ácido Deoxicólico), introduzidas no tecido subcutâneo para o tratamento de gordura localizada. Na intradermoterapia, os agentes lipolíticos induzem a lipólise, reduzindo medidas. Objetivos: Este trabalho teve como objetivo sintetizar as evidências sobre a eficácia das enzimas lipolíticas fosfatidilcolina e ácido deoxicólico na redução de gordura localizada corporal de mulheres adultas. Métodos: Foi realizada uma revisão integrativa da literatura de artigos nos idiomas Português, inglês e espanhol sobre a efetividade dos agentes lipolíticos: fosfatidilcolina e ácido deoxicólico. As buscas foram realizadas nas bases de dados PUBMED E Lilacs/Biblioteca Virtual em Saúde. Resultado: Foram encontrados 49 artigos, 35 não se encaixavam nos critérios de inclusão, 3 artigos duplicados na base de pesquisas, 2 artigos não estavam disponíveis em textos completos, sendo selecionados 9 artigos. Conclusão: A intradermoterapia tem um efeito satisfatório na redução de medidas, com os agentes lipolíticos fosfatidilcolina e ácido deoxicólico, entretanto temos uma escassez de estudos sobre o assunto.
- ItemEmbargoGenômica funcional de adipócitos 3T3-L1 tratados com o extrato padronizado de Ginkgo biloba (EGb)(Universidade Federal de São Paulo, 2022-11-03) Thomaz, Fernanda Malanconi [UNIFESP]; Telles, Monica Marques [UNIFESP]; Alonso-Vale, Maria Isabel Cardoso [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4266175652800598; http://lattes.cnpq.br/8143359335123923; http://lattes.cnpq.br/0573458164830062O consumo excessivo de calorias, predisposição genética e o sedentarismo são alguns dos principais fatores que contribuem para um desequilíbrio calórico, situação em que se consome mais calorias do que se gasta. Nesse cenário, adipócitos maduros aumentam de tamanho, causando hipertrofia celular que pode levar à obesidade, e inflamação do tecido adiposo, resultando em graves consequências metabólicas. Nas últimas décadas, houve uma grande expansão no estudo e na elucidação sobre o papel do tecido adiposo branco, incluindo sua importante função endócrina, a qual está relacionada à morfologia e alteração metabólica dos adipócitos. Estudos anteriores do nosso grupo demonstraram o potencial antiobesogênico e atenuador de perturbações metabólicas do extrato padronizado de Ginkgo biloba (EGb), em diferentes modelos animais, como de obesidade induzida pela dieta quanto de depleção hormonal causada pela ovariectomia. Sendo assim, esse trabalho teve por objetivo determinar o efeito do EGb sobre o metabolismo e o transcriptoma durante o processo de diferenciação de pré-adipócitos murinos 3T3-L1, bem como de avaliar o potencial do EGb de atuar na lipólise de adipócitos maduros murinos (3T3-L1) e humanos (hWA A41), a fim de serem elucidados possíveis mecanismos pelos quais o extrato modula o metabolismo dessas células. Para o estudo do potencial efeito do EGb na adipogênese, pré-adipócitos 3T3-L1 foram diferenciados durante 7 dias na ausência ou presença de EGb. A citotoxicidade do extrato foi verificada em pré-adipócitos 3T3-L1 e hWA A41 em diferentes concentrações após 48h de tratamento utilizando o método colorimétrico MTT. A análise do conteúdo lipídico dos adipócitos foi realizada por coloração com óleo vermelho O, e seu transcriptoma foi avaliado por PCR Array, utilizando placas customizadas com os genes de interesse. A análise proteica dos marcadores C/EBP, C/EBPα, perilipina-1 e FABP4 foi realizada de forma temporal, nos dias 0 (D0), 3 (D3), 5 (D5) e 7 (D7) durante o processo de diferenciação por Western Blotting. O estudo do potencial efeito do EGb na lipólise foi avaliado em adipócitos maduros 3T3-L1 diferenciados durante 7 dias e em adipócitos maduros hWA a41 diferenciados durante 19 dias, seguidos de 48h de tratamento na ausência ou presença de EGb 1.0 mg/mL. Avaliou-se a taxa de lipólise basal dessas células por meio da quantificação de glicerol. Para os adipócitos 3T3-L1, a expressão gênica dos marcadores lipolíticos Plin 1, Lipe e Pnpla2 foram avaliados por RT-PCR. Os resultados de viabilidade celular mostraram uma ausência de citotoxidade do extrato nas concentrações avaliadas para ambas as linhagens (murino e humana) de pré-adipócitos estudadas. Pré-adipócitos 3T3-L1 tratados com EGb nas concentrações 0,75 (p < 0,001) e 1,00 mg/mL (p < 0,001) apresentaram um aumento no conteúdo lipídico de 37% e 44%, respectivamente, em comparação as células não tratadas. O perfil apresentado pelo transcriptoma das células tratadas com EGb 1,0 mg/mL apresentou 42% de genes superexpressos significativamente relacionados a lipases e enzimas lipolíticas, pró-adipogênese, pró-browning, oxidação de ácidos graxos e termogênese, e citocinas, fatores de crescimento e transdução de sinal. A quantificação de proteínas-chave da via de adipogênese mostrou que o tratamento com EGb 1,0 mg/mL aumentou a expressão de C/EBPβ em 78% (p = 0.0002) no D7, bem como apresentou uma tendência de aumento da expressão de C/EBPα de 80% (p = 0,075) no D3 e de 170% (p = 0,0506) no D7, em comparação com o controle. Ao avaliar marcadores característicos de adipócitos maduros, o tratamento com EGb modulou positivamente a expressão de perilipina em aproximadamente 400% no D3 (p = 0.0039) e aproximadamente 200% no D5 (p < 0.0001), bem como elevou os níveis de FABP4 em 281% no D5 (p = 0.0007). Ao avaliar o efeito do EGb (1,0 mg/mL) em adipócitos maduros, observou-se para ambas as linhagens de células (murinas 3T3-L1 e humanas hWA A41), aumento significativo de 24% (p = 0,0102) e 26% (p < 0,0001), respectivamente, na taxa da lipólise basal em comparação com o grupo controle. Em células 3T3-L1 tratadas com EGb, os níveis de mRNA de Plin 1 e Lipe foram diminuídos em 32% (p = 0,0182) e 40% (p = 0,0047), respectivamente, em comparação as que não receberam tratamento. Assim, pode-se concluir que o EGb apresenta um efeito promissor pró-adipogênico e pró-lipolítico nos modelos celulares avaliados, sugerindo um potencial terapêutico complementar no tratamento da obesidade. No entanto, são necessários estudos adicionais para investigar com mais profundidade os mecanismos envolvidos, principalmente com foco em linhagens celulares humanas.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Papel do receptor adrenérgico β3 na obesidade induzida pela dieta(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2013-10-30) Preite, Nailliw Zanini [UNIFESP]; Ribeiro, Miriam Oliveira [UNIFESP]A obesidade é um distúrbio caracterizado pelo acúmulo excessivo de gordura corporal, podendo ser consequência de um aumento na ingestão calórica ou de defeitos no gasto energético, e está diretamente relacionada ao desenvolvimento da síndrome metabólica. O principal sítio de termogênese facultativa, mecanismo envolvido no aumento do gasto energético durante exposição ao frio ou a uma maior ingestão calórica, é o tecido adiposo marrom (BAT). O BAT é ativado pelo sistema nervoso simpático através da liberação de noradrenalina (NA), que se liga aos receptores adrenérgicos β1, β2 e β3, expressos neste tecido. A importância dos receptores β na termogênese do BAT fica clara quando estudamos animais com nocaute para suas três isoformas: são obesos e sensíveis ao frio. Dessa forma, a compreensão dos mecanismos envolvidos na termogênese facultativa constitui uma esperança no tratamento da obesidade. Entretanto, a função isolada da isoforma β3 nesse processo ainda não é clara e, portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o papel do receptor β3 na obesidade induzida pela dieta. Para tanto, camundongos selvagens FVB e camundongos com nocaute para o receptor adrenérgico β3 (KOβ3) foram tratados com dieta rica em gordura (40%) por 8 semanas, e tiveram seu consumo alimentar e peso corporal medidos diariamente. Ao final do protocolo, foram determinados os níveis séricos de glicose, colesterol e triglicérides destes animais. Foi medida a expressão da UCP1 no BAT por western blot e a expressão gênica de enzimas relacionados ao metabolismo lipídico através de PCR em tempo real. Também foi realizada avaliação histológica do tecido adiposo branco (WAT) e do fígado dos animais. Outro grupo de camundongos teve sua sensibilidade ao frio e a resposta termogênica do BAT mediante infusão aguda de NA, avaliadas. Os resultados obtidos mostraram que o receptor adrenérgico β3 apresenta papel fundamental na regulação do peso corporal, uma vez que animais KOβ3 alimentados com dieta rica em gordura apresentaram obesidade significativamente mais severa do que animais controle, dislipidemia e hipertrofia dos adipócitos brancos com infiltração de leucócitos. No entanto, surpreendentemente, esses animais não apresentaram sensibilidade ao frio e seu BAT estava termogenicamente ativo, sugerindo que a termogênese facultativa estava intacta e que a obesidade observada nesses animais não foi resultado de defeitos no gasto energético. Por isso, foi investigado o processo de lipólise no WAT dos animais FVB e KOβ3, estimulando adipócitos isolados com isoproterenol, e foi possível observar que a lipólise estava sensivelmente reduzida nos animais KOβ3. Em conclusão, este estudo mostrou que o receptor adrenérgico β3 não é fundamental para a termogênese facultativa, mas é chave para o processo de lipólise no WAT.