Navegando por Palavras-chave "Células Cultivadas"

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    Acesso aberto (Open Access)
    Dimetilaminoetanol(DMAE) na viabilidade de fibroblastos humanos cultivados
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2006) Giannoccaro, Fabiana Bocci [UNIFESP]; Gragnani, Alfredo [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Introdução: O dimetilaminoetanol (DMAE) tem sido utilizado na prática clínica no combate a rugas e flacidez cervico-facial. Sua ação firmadora é explicada devido a sua molécula ser um precursor de acetilcolina, de forma que o DMAE alteraria a contração muscular. Entretanto não existem trabalhos experimentais que comprovem esta teoria. Pela falta de definição do real mecanismo de ação do DMAE, e não existindo referência na Literatura da sua ação sobre os fibroblastos, foi elaborado estudo para avaliar a ação direta sobre os fibroblastos humanos cultivados. Métodos: Fibroblastos humanos provenientes de fragmento de pele total desprezado de pacientes submetidos a procedimentos cirúrgicos estéticos ou reparadores realizados na Disciplina de Cirurgia Plástica da UNIFESP/EPM. Foi utilizada a técnica de explante, e na quarta passagem celular o meio de cultura foi suplementado com diferentes concentrações de DMAE e as células foram avaliadas quanto à proliferação, medidas do cálcio citosólico e ciclo celular. A análise estatística dos resultados foi realizada usando-se o teste de ANOVA seguido pelo teste de Newman-Keuls para múltiplas comparações. Resultados: A proliferação dos fibroblastos mostrou-se diminuída com o aumento das concentrações de DMAE. O tempo de tratamento com tripsina foi maior nos grupos tratados com DMAE de forma dose dependente. Houve aumento de cálcio citosólico na presença de DMAE de forma dose-dependente. Houve um aumento de apoptose nos grupos tratados com DMAE. Conclusão: O DMAE diminuiu a proliferação dos fibroblastos, e causou aumento do cálcio citosólico e alterou o ciclo celular causando um aumento da apoptose nos fibroblastos humanos cultivados.
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    Diversidade funcional das metaloproteases de classe PI insularinase e brazilase, purificadas das peconhas de Bothrops insularis e Bothrops brazili
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2004) Modesto, Jeanne Claine de Albuquerque [UNIFESP]
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    Isolamento de uma subpopulacao de celulas de melanoma murino com caracteristicas de progenitoras tumorais e analises de suas propriedades tronculares e tumorigenicas
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011) Nascimento, Telma Lisboa [UNIFESP]
    O melanoma e o cancer de pele existente mais agressivo e sua resistencia para muitas modalidades terapeuticas e conhecida.E plausivel a conjectura de que a resistencia deste tumor esteja intimamente relacionada a presenca de uma subpopulacao de celulas progenitoras tumorais. Com base nesta informacao nosso trabalho propos isolar celulas de linhagens de melanoma murino que apresentassem propriedades de celulas-tronco, para melhor caracteriza-las. Para tal utilizou-se um meio de cultura especifico, contendo: Fator de Crescimento Epidermal (EGF), Fator de Crescimento Fibroblasticobasico(bFGF),Fator Inibitorio leucemico(LIF) e Acido Retinoico (AR). Estas celulas aparecem nas culturas de longo tempo (mais de 8 meses) e formam esferas aderentes e nao aderentes onde parte destas esferas expressa marcadores de celulas-tronco e apresentam plasticidade para transdiferenciacao em outros tipos celulares (neural-like, melanocito-like e fibroblasto-like). In vivo experimentos com estas esferas revelaram aumento da malignidade com crescimento significativo da massa tumoral e maior ulceracao quando comparado com os tumores controle. O estresse oxidativo desempenhou uma importante funcao na sobrevivencia destas celulasdurante culturas de longo tempo; promovendo o aumento da expressao da proteina anti-apoptotica Bcl-2. Ainda durante os experimentos in vivo nos observamos um caso isolado de metastase espontanea para o intestino, apos 25 dias da injecao subcutanea de celulas progenitoras de melanoma. Com base nestes achados, nos propomos que linhagens de melanoma sobre meio especifico e apos culturas de longo tempo compreendem um protocolo que isola uma subpopulacao com caracteristicas e propriedades predominantes de celulas-tronco fornecendo resultados significativos que podem contribuir para a melhor compreensao desta malignidade
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    Mecanismos de regulação da expressão de RNAm de VDR em células HC11 parentais ou transformadas com Hras
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2001) Bortman, Patricia [UNIFESP]; Brentani, Maria Mitzi [UNIFESP]
    Objetivo: A linhagem epitelial mamaria murina, HC11, apresenta maior conteudo de RNAm de receptor de vitamina D (VDR) que celulas transformadas com Ha-ras (HC11 ras). Quando HC11 e tratada com 1,25(OH)2D3 (VD), ocorre diminuicao de proliferacao, nao observada em HC11 ras. E necessario, portanto, esclarecer por que as celulas HC11 ras expressam menos VDR e se este e funcional. Metodos e Resultados: 0 ensaio de Run On foi utilizado para esclarecer se houve transcricao diferenciada do gene. Ambas as linhagens apresentaram a mesma taxa de sintese de RNAm de VDR. Atraves de tratamento com actinomicina D, um inibidor de transcricao genica, foi possivel calcular a meia-vida do RNAm de VDR. A linhagem HC11 ras apresentou degradacao maior do RNAm de VDR quando comparada com a linhagem parental (HC11). Para verificar a funcionalidade de VDR estudamos a expressao do RNAm de 25(OH)D3-24 hidroxilase, gene alvo que apresenta um elemento de resposta (VDRE) a vitamina D em seu promotor. Em celulas HC11 parentais, nao observamos a expressao de RNAm de 25(OH)D3-24 hidroxilase por Northern Blot, o qual nao foi indutivel por VD. Por outro lado, nas celulas HC11 ras ocorre expressao constitutiva deste gene, o qual tambem nao e induzido pela VD nestas celulas. 0 bloqueio da via de Ras, obtido apos tratamento com o inibidor de farnesil-transferase, levou as celulas HC11 ras a expressarem niveis similares de RNAm de VDR aqueles mostrados pelas celulas HC11. Conclusoes: A expressao diferencial de RNAm de VDR entre celulas HC11 parentais ou transformadas com Ha-ras nao resulta de diferencas na taxa de sintese mas sim do efeito de uma maior degradacao do RNAm de VDR. A menor expressao de RNAm de VDR encontrada em celulas HC11 transformadas com Ha-ras em relacao as celulas parentais parece estar relacionada a presenca de Ras ativado, uma vez que a inibicao desta via, reverte os niveis de RNAm de VDR aos das celulas parentais. Em celulas transformadas com o oncogene Ha-ras houve expressao constitutiva do gene da 25(OH)D3-24 hidroxilase, indicando uma possivel inativacao metabolica da vitamina D endogena nestas celulas, sugerindo a inexistencia de uma via degradativa da VD em celulas mamarias murinas normais