Efeito do uso de glicocorticóides na função e morfologia cardíaca de ratos
Data
2016-06-09
Autores
Guimaraes, Fabiana de Salvi 
Orientadores
Medeiros, Alessandra
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
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Título de Volume
Resumo
Introduction Glucocorticoids are drugs widely used in the clinic for their anti-inflammatory and immunosuppressive properties, but high doses and/or prolonged treatment are associated with cardiac remodeling. Objective To study the effect of using GCs (dexamethasone) in cardiac morphology and function, in signaling pathways that regulate the flow of Ca2+ as well as the possible signaling pathways for pathological cardiac hypertrophy in the rat heart. Methods Male Wistar rats, adult (400 - 415g) were randomized into two groups: treated with dexamethasone (DEX) and feed Pair Control (Cont- PF). The animals in the treated group received 35 ug/ g body weight/day of dexamethasone in drinking water for 15 days. Was evaluated by echocardiography fractional shortening and the ratio E/A waves, as parameters of systolic and diastolic function, respectively. The isometric tension developed and the rate of voltage change per unit time carried by functional analysis contractility in vitro, the positive peak derived from (+ dT/dt) and negative (-dT/dt) were obtained, which inform the temporal variation cardiac inotropic, which were also analyzed by the method of cardiac contractility. After sacrificing the animals, the cardiac chambers were weighed separately and corrected for tibia length. By histological analysis evaluated the diameter of cardiomyocytes and collagen percentage of these tissues. The method of the comet assay was used to evaluate apoptosis of cardiac tissue. And finally, intracellular signaling proteins related to Ca2+ homeostasis and calcineurin. Data were analyzed by Student's t - test or one-way ANOVA with repeated measures, with post hoc Student - Newman Keuls. Results We observed that there were some important cardiovascular abnormalities such as elevated blood pressure, impaired relaxation in heart muscle and therefore diastolic function, increased percentage of collagen and apoptosis of cardiomyocytes treated animals GC. Regarding the analysis of myocardial contractility assessed by the papillary muscle, an increase in its size as well as its thickness. However, it was accompanied by a reduction of its maximum length (Lmax), tension development (TD), the relaxation time (TR) and its temporal variables: + dT/dt and -dT/dt. The study of hemodynamic parameters in anesthetized animals was not sensitive enough to show cardiac dysfunction in the DEXA group. Regarding the expression of proteins involved in calcium homeostasis, we observed an increase in expression of phospholamban phosphorylated at threonine 17, reduction in the expression of NCX and no change in the expression of Serca 2a protein. Since the expression of members of the protein calcineurin, we observed an increase in cytoplasmic and nuclear expression of NFAT c3 and GATA-4, and increase in nuclear calcineurin expression. Conclusion The findings of this study demonstrate that there is an increase in blood pressure in animal of DEXA group, as well as an increase in the size of these hearts, accompanied by a reduction of diastolic function, increased fibrosis assessed by the percentage of collagen, increased myocardial apoptosis and significant hemodynamic changes for the proper functioning of the heart muscle, with consequent alteration of protein expression related to Ca2+ homeostasis and calcineurin.
Introdução Os glicocorticóides são fármacos amplamente utilizados na clínica, pelas suas propriedades antiinflamatórias e imunossupressoras, mas altas doses e/ou tratamento prolongado estão associados ao remodelamento cardíaco. Objetivo Estudar o efeito do uso de Dexametasona na morfologia e função cardíacas, nas vias de sinalização que regulam o fluxo de Ca2+, bem como nas possíveis vias de sinalização para hipertrofia cardíaca patológica no coração de ratos. Métodos Ratos Wistar machos, adultos (400-415g) foram randomizados em dois grupos: Tratados com dexametasona (DEXA) e Controle Pair feed (Cont-PF). Os animais do grupo tratado receberam 35 ?g de dexametasona por grama de massa corporal do animal (35 ?g/ g de peso corporal/ dia), por dia, que foram administrados na água de beber por 15 dias. Avaliou-se por meio de ecocardiograma a fração de encurtamento e a razão onda E/A, como parâmetros da função sistólica e diastólica, respectivamente. A tensão isométrica máxima desenvolvida e a taxa de variação da tensão desenvolvida por unidade de tempo por análises funcionais de contratilidade in vitro, sendo obtidas as máximas derivadas positiva (+dT/dt) e negativa (-dT/dt), que informam a variação temporal do inotropismo cardíaco, as quais também foram analisadas pelo método de contratilidade cardíaca. Após o sacrifício dos animais as câmaras cardíacas foram pesadas separadamente e corrigidas pelo comprimento da tíbia. Pela análise histológica avaliou-se o diâmetro do cardiomiócito e o percentual de colágeno desses tecidos. Pelo método de ensaio do cometa avaliou-se a apoptose do tecido cardíaco. E por fim, a sinalização intracelular das proteínas relacionadas à homeostase do Ca2+ e da calcineurina. Os dados foram analisados através de Test-t de Student ou ANOVA de uma ou duas vias com medidas repetidas, com post hoc de Student- Newman Keuls. Resultados Alterações cardiovasculares importantes, tais como elevação da pressão arterial, prejuízo no relaxamento do músculo cardíaco, aumento no percentual de colágeno e aumento da apoptose dos cardiomiócitos dos animais tratados com GC. No que tange as análises da contratilidade miocárdica avaliada por meio do músculo papilar, houve um aumento em seu tamanho, bem como de sua espessura. No entanto, foi acompanhado de uma redução de seu comprimento máximo (Lmáx), da tensão de desenvolvimento (TD), do tempo de relaxamento (TR) e de suas variáveis temporais: +dT/dt e -dT/dt. O estudo dos parâmetros hemodinâmicos nos animais anestesiados não foi suficientemente sensível para mostrar disfunção cardíaca no grupo DEXA. Em relação à expressão de proteínas envolvidas na homeostase do cálcio, observou-se um aumento na expressão do fosfolambam fosforilado na treonina 17 e uma redução na expressão do trocador sódio-cálcio (NCX), sem alteração na expressão da proteína Serca 2a. Já na expressão de proteínas integrantes da via da calcineurina, observou-se um aumento na expressão citoplasmática e nuclear do NFAT c3 e do GATA-4, e da expressão nuclear de calcineurina. Conclusão Nesse contexto, nota-se que a hipótese de que o GC traz prejuízos à função cardíaca é sustentada, visto os resultados encontrados no presente trabalho: alteração da PA, FC, aumento do colágenos e da apoptose dos cardiomiócitos, além de modificação nos parâmetros funcionais do relaxamento cardíaco, acompanhado de alterações na expressão de proteínas relacionadas à homeostase do cálcio e a da via da calcineurina, importante marcador de hipertrofia patológica, contribuindo dessa forma para um importante remodelamento cardíaco.
Introdução Os glicocorticóides são fármacos amplamente utilizados na clínica, pelas suas propriedades antiinflamatórias e imunossupressoras, mas altas doses e/ou tratamento prolongado estão associados ao remodelamento cardíaco. Objetivo Estudar o efeito do uso de Dexametasona na morfologia e função cardíacas, nas vias de sinalização que regulam o fluxo de Ca2+, bem como nas possíveis vias de sinalização para hipertrofia cardíaca patológica no coração de ratos. Métodos Ratos Wistar machos, adultos (400-415g) foram randomizados em dois grupos: Tratados com dexametasona (DEXA) e Controle Pair feed (Cont-PF). Os animais do grupo tratado receberam 35 ?g de dexametasona por grama de massa corporal do animal (35 ?g/ g de peso corporal/ dia), por dia, que foram administrados na água de beber por 15 dias. Avaliou-se por meio de ecocardiograma a fração de encurtamento e a razão onda E/A, como parâmetros da função sistólica e diastólica, respectivamente. A tensão isométrica máxima desenvolvida e a taxa de variação da tensão desenvolvida por unidade de tempo por análises funcionais de contratilidade in vitro, sendo obtidas as máximas derivadas positiva (+dT/dt) e negativa (-dT/dt), que informam a variação temporal do inotropismo cardíaco, as quais também foram analisadas pelo método de contratilidade cardíaca. Após o sacrifício dos animais as câmaras cardíacas foram pesadas separadamente e corrigidas pelo comprimento da tíbia. Pela análise histológica avaliou-se o diâmetro do cardiomiócito e o percentual de colágeno desses tecidos. Pelo método de ensaio do cometa avaliou-se a apoptose do tecido cardíaco. E por fim, a sinalização intracelular das proteínas relacionadas à homeostase do Ca2+ e da calcineurina. Os dados foram analisados através de Test-t de Student ou ANOVA de uma ou duas vias com medidas repetidas, com post hoc de Student- Newman Keuls. Resultados Alterações cardiovasculares importantes, tais como elevação da pressão arterial, prejuízo no relaxamento do músculo cardíaco, aumento no percentual de colágeno e aumento da apoptose dos cardiomiócitos dos animais tratados com GC. No que tange as análises da contratilidade miocárdica avaliada por meio do músculo papilar, houve um aumento em seu tamanho, bem como de sua espessura. No entanto, foi acompanhado de uma redução de seu comprimento máximo (Lmáx), da tensão de desenvolvimento (TD), do tempo de relaxamento (TR) e de suas variáveis temporais: +dT/dt e -dT/dt. O estudo dos parâmetros hemodinâmicos nos animais anestesiados não foi suficientemente sensível para mostrar disfunção cardíaca no grupo DEXA. Em relação à expressão de proteínas envolvidas na homeostase do cálcio, observou-se um aumento na expressão do fosfolambam fosforilado na treonina 17 e uma redução na expressão do trocador sódio-cálcio (NCX), sem alteração na expressão da proteína Serca 2a. Já na expressão de proteínas integrantes da via da calcineurina, observou-se um aumento na expressão citoplasmática e nuclear do NFAT c3 e do GATA-4, e da expressão nuclear de calcineurina. Conclusão Nesse contexto, nota-se que a hipótese de que o GC traz prejuízos à função cardíaca é sustentada, visto os resultados encontrados no presente trabalho: alteração da PA, FC, aumento do colágenos e da apoptose dos cardiomiócitos, além de modificação nos parâmetros funcionais do relaxamento cardíaco, acompanhado de alterações na expressão de proteínas relacionadas à homeostase do cálcio e a da via da calcineurina, importante marcador de hipertrofia patológica, contribuindo dessa forma para um importante remodelamento cardíaco.
Descrição
Citação
GUIMARAES, Fabiana de Salvi. Efeito do uso de glicocorticóides na função e morfologia cardíaca de ratos. 2016. 63 f. Dissertação (Mestrado Interdisciplinar em Ciências da Saúde) - Instituto de Saúde e Sociedade, Universidade Federal de São Paulo, Santos, 2016.