Avaliações genéticas de indivíduos portadores de neutropenia primária crônica

dc.contributor.advisorPesquero, João Bosco [UNIFESP]
dc.contributor.advisorLatteshttp://lattes.cnpq.br/0856630824759511
dc.contributor.authorMenezes, Alef Nascimento [UNIFESP]
dc.contributor.authorLatteshttp://lattes.cnpq.br/9655284452340182
dc.coverage.spatialSão Paulo
dc.date.accessioned2024-12-02T17:07:24Z
dc.date.available2024-12-02T17:07:24Z
dc.date.issued2024-11-22
dc.description.abstractObjetivo: Realizar avaliação bioquímica e molecular em indivíduos portadores de neutropenia crônica. Método: Estudo de coorte prospectivo, desenvolvido de 2021 a 2023, incluindo pacientes atendidos em um serviço de referência de neutropenia. Foram analisados pacientes com neutropenia congênita grave (NCG), neutropenia ciclíca (NC), neutropenia auto-imune (NA), neutropenia idiopática crônica (NI) e doença do depósito de glicogênio 1B (DAG1B). O projeto foi dividido em três etapas: genômica, análise de proteínas e transcrição. Para os ensaios de genômica, foi realizado o sequenciamento de todos os exons em busca de variantes em genes associados a neutropenia congênita. Para os ensaios de proteômica utilizou-se a técnica de Western-Blot para visualização da expressão da proteína hCAP18 e a medida da atividade das enzimas mieloperoxidase e elastase. O ensaio de expressão de RNAm do gene CAMP foi realizado pela técnica de PCR em tempo real (qPCR), utilizando RNA extraído a partir do sangue total. Resultados: Foram identificados cinco pacientes com NCG (sendo dois indivíduos parentes), dois pacientes com NC, quatro com NAI (sendo dois indivíduos parentes), dois com DDG1B e quatro com NIC. No presente estudo, observou-se que o gene associado ao maior número de variantes foi o gene ELANE. Além do mais, foram observadas três novas variantes não descritas anteriormente na literatura, sendo duas variantes presentes no gene ELANE e uma variante no gene TAFAZZIN, associadas a NCG e a NC. Após a identificação das variantes genéticas, foi avaliada a expressão do gene CAMP e observou-se uma redução da expressão desse gene em indivíduos portadores de NCG quando comparado com outras neutropenias. Como o gene CAMP codifica a proteína hCAP18, foi realizada a avaliação da expressão dessa proteína nos pacientes portadores de neutropenia crônica. Os resultados mostraram ausência de expressão da hCAP18 nos pacientes com NCG, apresentando níveis indetectáveis também após o uso da medicação de proliferação celular na medula (filgrastrim). Nos indivíduos com NC, observou-se a ausência da expressão da hCAP18 durante a fase neutropênica, porém com expressão evidente na fase de recuperação neutrofílica. A expressão do hCAP18 também foi detectada nos pacientes com NAI, NIC e DDG1B, apesar da neutropenia pronunciada, e no grupo controle. Dessa forma, para avaliar o nível de maturação dos neutrófilos dos indivíduos portadores de NCG e NC, avaliou-se a atividade da mieloperoxidase e da elastase, havendo uma diminuição considerável nos indivíduos com variantes no gene ELANE, o que pode estar acarretando em um pior prognóstico dessas enfermidades. Conclusão: Dessa forma, a investigação molecular e bioquímica, juntamente com a associação de outras técnicas, como a pesquisa da expressão dos níveis plasmáticos do hCAP18 podem ser ferramentas poderosas de triagem destas doenças, diminuindo a necessidade de testes invasivos, inclusive ainda na infância, podendo viabilizar um tratamento precoce, similar a deficiência de glicose-6-fosfato.pt_BR
dc.emailadvisor.customjbpesquero@gmail.com
dc.format.extent87 f.
dc.identifier.citationMENEZES, Alef Nascimento. Avaliações genéticas de indivíduos portadores de neutropenia primária crônica. 2024. 87 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Molecular) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). São Paulo, 2024.pt_BR
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/11600/72536
dc.languagepor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.subjectNeutropeniapt_BR
dc.subjectGenéticapt_BR
dc.subjectCatelicidinaspt_BR
dc.subjectNeutrófilospt_BR
dc.titleAvaliações genéticas de indivíduos portadores de neutropenia primária crônicapt_BR
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusEscola Paulista de Medicina (EPM)
unifesp.graduateProgramCiências Biológicas (Biologia Molecular)
unifesp.knowledgeAreaBiologia Molecular
unifesp.researchAreaGenética e Hematologia
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