Clonagem, expressão e purificação da subunidade zeta da proteína 1 do complexo T (TCP-1) de Giardia lamblia

Data
2023-06-23
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
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Resumo
A proteína TCP-1 (T-complex protein-1) é uma chaperonina molecular responsável pelo dobramento de uma variedade de proteínas essenciais para as células. Particularmente, a TCP-1 está envolvida no enovelamento de actina e tubulina às suas formas nativas, sendo fundamental na montagem dos microfilamentos e microtúbulos. O protozoário parasita intestinal Giardia lamblia, agente etiológico da giardíase, é responsável por infecções em humanos e outros vertebrados. A giardíase é uma doença caracterizada por diarreia aguda que em alguns pacientes pode levar a desordens intestinais crônicas. Os trofozoítos de Giardia (estágio replicativo que habita o intestino delgado dos hospedeiros) são células polarizadas com um complexo citoesqueleto formado por oito flagelos, um corpo mediano (centro organizador de microtúbulos) e um disco suctorial ventral (responsável pela adesão dos parasitos ao epitélio intestinal do hospedeiro). As características únicas do citoesqueleto de Giardia são críticas para o parasitismo facilitando a colonização do hospedeiro, a motilidade, a fixação e divisão celular. O objetivo deste trabalho foi clonar, expressar e purificar a proteína 1 [subunidade zeta (ζ)] do complexo T de Giardia lamblia.
The TCP-1 protein (T-complex protein 1) is a molecular chaperonin responsible for folding many of the essential proteins for cells. Particularly, TCP-1 is involved in the production of native actin and tubulin playing a central role on the assembly of microfilaments and microtubules. The intestinal protozoan parasite Giardia lamblia, the etiologic agent of giardiasis, is responsible for infections in humans and other vertebrates. The giardiasis is characterized by acute diarrhea which in some patients can evolve to chronic intestinal disorders. Giardia trophozoites (the replicative stage that colonizes the small intestines of hosts) are polarized cells with a complex cytoskeleton consisting of eight flagella, the median body (microtubule-organizing center) and the suctorial ventral disc (enables the parasite to attach to the host intestinal epithelia). The unique features of the complex cytoskeleton of Giardia are critical to parasitism facilitating host colonization, motility, attachment and cell division. This study focused on the cloning, expression and purification of the T complex protein-1 [zeta (ζ) subunit] from Giardia lamblia.
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