Caracterização bioquímica de uma antígeno de 30kDa de formas amastigotas de Leishmania (L.) chagasi implicado em respostas imunes protetoras em camundongos BALB/c

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dc.contributor.advisorBarbiéri, Clara Lúcia [UNIFESP]
dc.contributor.authorLopes, Renato Antonio Migliano [UNIFESP]
dc.date.accessioned2015-12-06T23:00:42Z
dc.date.available2015-12-06T23:00:42Z
dc.date.issued1999
dc.description.abstractO enfoque do presente trabalho foi a caracterizacao do antigeno de 30 kDa (p3O) de formas amastigotas de L. (L) chagasi implicado em respostas linfoproliferativas em camundongos BALB/c parcialmente protetoras contra a infeccao homologa. Para a caracterizacao da p3O foi utilizado um anticorpo monoclonal dirigido a um antigeno de 30 kDa (p3O) de amastigotas de L. (L.) amazonensis (AcMo 2E5D3). Por experimentos de Western blot foi possivel observar a reatividade deste anticorpo com a p3O de L. (L.) chagasi. Apos a purificacao do antigeno em coluna de imunoafinidade com o AcMo 2E5D3 e separacao por PAGE-SDS foram detectadas 3 bandas de massa molecular aparente de 30, 47 e 70 kDa. A separacao do antigeno purificado por PAGE-SDS em condicoes nao redutoras, em gel contendo gelatina, mostrou que as bandas de 47 e 70 kDa apresentam atividade proteolitica, enquanto que a de 30 kDa e desprovida desta atividade. Estudos de imunomarcacao em nivel de microscopia eletronica em cortes ultrafinos de amastigotas de L. (L.) chagasi, utilizando-se o AcMo 2E5D3, mostraram que o antigeno localiza-se preferencialmente em estruturas grandes, semelhantes a lisossomos, e na bolsa flagelar. A p3O purificada em coluna de imunoafinidade (p3Ocol) foi utilizada em experimentos de proliferacao de linfocitos de camundongos BALB/c previamente imunizados com extrato proteico de amastigotas de L. (L.) chagasi. Comparando-se estimulacao induzida pela p3Ocol e p3O purificada por eletroeluicao (p3Oee), foi possivel observar que indices de linfoproliferacao significativamente maiores foram obtidos com a p3Ocol. A secrecao de IFN-g pelos linfocitos estimulados pela p3Ocol foi tambem observada, sendo maior do que a induzida pela p3Oee, e sugeriu o envolvimento de linfocitos CD4+ Th1 nessas respostas. Camundongos BALB/c foram imunizados com as duas preparacoes da p3O utilizando-se Corynebacterium parvum ou IL-12+Al(OH)3 como adjuvantes e desafiados com amastigotas de L. (L.) chagasi. Os resultados mostraram que a p3Ocol e a p3Oee foram capazes de reduzir significativamente a carga parasitaria dos animais imunizados, tendo a p3Ocol induzido maior protecao aos animais comparada a p3Oee. Em relacao aos adjuvantes, nao houve diferencas significativas na reducao da carga parasitaria dos animais imunizados com os antigenos quando se utilizou Corynebacterium parvum ou IL-12+Al(OH)3, nao tendo sido observadas tambem diferencas quanto a protecao dos...(au)pt
dc.description.sourceBV UNIFESP: Teses e dissertações
dc.format.extent89 p.
dc.identifier.citationSão Paulo: [s.n.], 1999. 89 p. ilustab.
dc.identifier.fileepm-016258.pdf
dc.identifier.urihttps://repositorio.unifesp.br/handle/11600/16537
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectLeishmaniapt
dc.subjectAntígenospt
dc.titleCaracterização bioquímica de uma antígeno de 30kDa de formas amastigotas de Leishmania (L.) chagasi implicado em respostas imunes protetoras em camundongos BALB/cpt
dc.title.alternativeBiochemical characterization of a 30kDa antigen from (L.) chagasi amastigotes implicated in protective immune responses in BALB/c miceen
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt
unifesp.graduateProgramMicrobiologia e Imunologia
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PPG - Microbiologia e Imunologia