Efeito direto do lipopolissacarídeo de eColi sobre o sistema renina angiotensina intrarrenal em modelo de perfusão renal extracorpórea
Data
2016-01-31
Autores
Santana, Luciane Gomes 
Orientadores
Schor, Nestor Schor
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
The overstimulation of the renin angiotensin system (RAS) during sepsis is well documented. However, the RAS intrarenal in septic syndrome has not received similar attention. This study evaluated the direct effect of lipopolysaccharide (LPS) of E. coli on the RAS in intrarenal model of renal extracorporeal perfusion. Renal tissue homogenate underwent extracorporeal perfusion was incubated with vehicle or LPS 0.01mg/kg and levels of Angiotensin I (Ang I), Angiotensin II (Ang II) and their metabolites were analyzed by HPLC. Additionally, the activities of renin, angiotensin I converting enzyme (ACE) and angiotensin II converting enzyme (ACE2) were investigated. The levels of angiotensin II on the renal tissue homogenate was quickly elevated (1st hour) keeping this significant increase to the 2nd hour (p <0.05). Similar results were obtained for the Ang I levels (2 twofold, p<0.05). In addition, we investigate the degradation of Ang I and Ang II and demonstrate that its metabolites were also significantly altered levels by LPS. We also observed a significant increase in ACE activity after incubation with LPS, as well as renin. Since the elevation of Ang I production tetradecapeptide resulting from excessive administration was enhanced by LPS (+ 70% vs. vehicle, p <0.05). Renin and angiotensinogen protein levels were not affected by LPS according to western-blot analysis. Taken together, these data demonstrate that LPS significantly up regulates intrarenal RAS through early increase of renin or renin-like activity. These findings are potentially related to the development of and/or recovery from acute renal failure in the context of sepsis.
A hiperestimulação do sistema renina angiotensina (SRA) durante a sepse está bem documentada. Todavia, o SRA intrarrenal na síndrome séptica não tem recebido semelhante atenção. O presente estudo avaliou o efeito direto do lipopolissacarídeo (LPS) de E. Coli sobre o SRA intrarrenal em modelo de perfusão renal extracorpóreo. Homogenato de tecido renal submetido a perfusão extracorpórea foi incubado com veículo ou LPS 0.01mg/Kg e os níveis de Angiotensina I (Ang I), Angiotensina II (Ang II) e seus metabólitos foram analisados por HPLC. Adicionalmente, as atividades da enzima conversora de angiotensina I (ECA) e da renina foram investigadas. Os níveis de Ang II no homogenato de tecido renal foram rapidamente elevados (1ª hora) mantendo esse significante aumento até a 2ª hora (p<0,05). Resultados similares foram obtidos para os níveis de Ang I (+2 vezes, p<0,05). Além disso, investigamos a degradação da Ang I e Ang II e demonstramos que seus metabólitos também tiveram os níveis significantemente alterados pelo LPS. Observamos ainda um expressivo aumento da atividade da ECA após a incubação com LPS, como também da renina. Uma vez que a elevação da produção de Ang I decorrente da administração de excesso de tetradecapeptídeo foi bastante aumentada pelo LPS (+70% vs. veículo, p<0,05). Experimentos de western blotting demonstraram que as concentrações das proteínas angiotensinogênio e renina não foram alteradas pelo LPS. A análise conjunta dos dados demonstra que o LPS modulou de forma positiva o SRA intrarrenal através do aumento precoce da atividade da renina ou enzimas com atividade semelhante à da renina. Estes achados podem estar possivelmente relacionados ao desenvolvimento e/ou recuperação da lesão renal aguda decorrente da sepse.
A hiperestimulação do sistema renina angiotensina (SRA) durante a sepse está bem documentada. Todavia, o SRA intrarrenal na síndrome séptica não tem recebido semelhante atenção. O presente estudo avaliou o efeito direto do lipopolissacarídeo (LPS) de E. Coli sobre o SRA intrarrenal em modelo de perfusão renal extracorpóreo. Homogenato de tecido renal submetido a perfusão extracorpórea foi incubado com veículo ou LPS 0.01mg/Kg e os níveis de Angiotensina I (Ang I), Angiotensina II (Ang II) e seus metabólitos foram analisados por HPLC. Adicionalmente, as atividades da enzima conversora de angiotensina I (ECA) e da renina foram investigadas. Os níveis de Ang II no homogenato de tecido renal foram rapidamente elevados (1ª hora) mantendo esse significante aumento até a 2ª hora (p<0,05). Resultados similares foram obtidos para os níveis de Ang I (+2 vezes, p<0,05). Além disso, investigamos a degradação da Ang I e Ang II e demonstramos que seus metabólitos também tiveram os níveis significantemente alterados pelo LPS. Observamos ainda um expressivo aumento da atividade da ECA após a incubação com LPS, como também da renina. Uma vez que a elevação da produção de Ang I decorrente da administração de excesso de tetradecapeptídeo foi bastante aumentada pelo LPS (+70% vs. veículo, p<0,05). Experimentos de western blotting demonstraram que as concentrações das proteínas angiotensinogênio e renina não foram alteradas pelo LPS. A análise conjunta dos dados demonstra que o LPS modulou de forma positiva o SRA intrarrenal através do aumento precoce da atividade da renina ou enzimas com atividade semelhante à da renina. Estes achados podem estar possivelmente relacionados ao desenvolvimento e/ou recuperação da lesão renal aguda decorrente da sepse.
Descrição
Citação
SANTANA, Luciane Gomes. Efeito direto do lipopolissacarídeo de eColi sobre o sistema renina angiotensina intrarrenal em modelo de perfusão renal extracorpórea. 2016. Dissertação (Mestrado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2016.