Desenvolvimento pós-implantacional in vitro de embriões aneuploides humanos: avaliação da presença de vesículas extracelulares secretadas no meio de cultura

Página do item simplificado
dc.contributor.advisorOyama, Ivone Cipriano [UNIFESP]
dc.contributor.advisor-coErberelli, Renata Fabiane
dc.contributor.advisor-coMotta, Eduardo Leme Alves da [UNIFESP]
dc.contributor.advisor-coLatteshttp://lattes.cnpq.br/7532548942218501
dc.contributor.advisorLatteshttp://lattes.cnpq.br/6388383479072134
dc.contributor.authorPereira, Nathami Crescenzo [UNIFESP]
dc.contributor.authorLatteshttp://lattes.cnpq.br/8800396373494149
dc.coverage.spatialSão Paulo
dc.date.accessioned2024-07-11T13:43:21Z
dc.date.available2024-07-11T13:43:21Z
dc.date.issued2024-06-28
dc.description.abstractA maioria das aneuploidias estão associadas à erros cromossômicos que ocorrem durante a meiose em oócitos e em mulheres acima de 40 anos esses erros podem ocorrer com mais frequência. Entretanto, várias linhas de pesquisas consideram que a aneploidia é um fenômeno comum e não “permanente”, sugerindo que o embrião possui mecanismos para eliminar erros cromossômicos durante o processo de diferenciação promovendo uma autocorreção. Neste contexto, surgem as vesículas extracelulares secretadas no meio de cultivo de embriões aneuploides e sua carga de biomoléculas, como DNA e RNA, como possível atuante nos mecanismos de autocorreção embrionários. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de VEs no meio de cultura dos embriões e a sua carga de DNA em relação a capacidade de desenvolvimento embrionário e idade materna. Para isso, foram selecionados blastocistos aneuploides provenientes de dois grupos com diferentes idades: Grupo I, mulheres com ≤ 37 anos e Grupo II, mulheres com ≥ 38 anos. Os blastocistos foram descongelados e submetidos ao cultivo estendido na ausência de tecidos maternos, por até 12 dias. Amostras do meio de cultura de cada embrião foram coletadas para isolamento das VEs pelo método de (ultra) centrifugação diferencial. A técnica de Nanoparticle Tracking Analysis (NTA) foi utilizada para quantificar e identificar as VEs de acordo com o diâmetro, além da análise da presença do DNA por meio do corante fluorescente laranja de acridina (LA). Entretanto, não foram observadas diferenças entre os grupos estudados em relação a esses aspectos ou no conteúdo de DNA. As características morfológicas das VEs foram estudadas por microscopia eletrônica de transmissão, após contratação negativa. AS VEs apresentaram tanto formas arredondadas como ovaladas nas amostras de ambos os grupos.pt_BR
dc.description.abstract Most aneuploidies are associated with chromosomal errors that occur during meiosis in oocytes and in women over 40 years of age these errors may occur more frequently. However, several lines of research consider that aneploidy is a common phenomenon and not “permanent”, suggesting that the embryo has mechanisms to eliminate chromosomal errors during the differentiation process, promoting selfcorrection. In this context, extracellular vesicles secreted in the culture medium of aneuploid embryos and their load of biomolecules, such as DNA and RNA, appear as possible agents in embryonic selfcorrection mechanisms. Therefore, the objective of this work was to evaluate the presence of EVs in the embryo culture medium and their DNA load in relation to embryonic development capacity and maternal age. For this, aneuploid blastocysts were selected from two groups with different ages: Group I, women aged ≤ 37 years and Group II, women aged ≥ 38 years. Blastocysts were thawed and subjected to extended culture in the absence of maternal tissue for up to 12 days. Samples of the culture medium from each embryo were collected for isolation of EVs using the differential (ultra) centrifugation method. The Nanoparticle Tracking Analysis (NTA) technique was used to quantify and identify EVs according to the diameter, in addition to analyzing the presence of DNA using the fluorescent dye acridine orange (LA). However, no differences were observed between the groups studied in relation to these aspects or in DNA content. The morphological characteristics of EVs were studied by transmission electron microscopy, after negative recruitment. EVs presented both rounded and oval shapes in samples from both groups.en
dc.description.sponsorshipConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
dc.description.sponsorshipFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
dc.emailadvisor.customim.cipriano@unifesp.br
dc.format.extent46 f.
dc.identifier.citationPEREIRA, Nathami Crescenzo. Desenvolvimento pós-implantacional in vitro de embriões aneuploides humanos: avaliação da presença de vesículas extracelulares secretadas no meio de cultura. 2024. 46 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biomedicina)- Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, 2024.
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/11600/71391
dc.languagepor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.subjectAneuploidiapt_BR
dc.subjectAutocorreçãopt_BR
dc.subjectPeríodo pós-implantacionalpt_BR
dc.subjectVEspt_BR
dc.subjectgDNApt_BR
dc.titleDesenvolvimento pós-implantacional in vitro de embriões aneuploides humanos: avaliação da presença de vesículas extracelulares secretadas no meio de culturapt_BR
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesis
unifesp.campusEscola Paulista de Medicina (EPM)
unifesp.graduacaoBiomedicina
Arquivos
Pacote Original
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Imagem de Miniatura
Nome:
TCC - Trabalho Final - Nathami Crescenzo Pereira..pdf
Tamanho:
1.3 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descrição:
Baixar
Licença do Pacote
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Imagem de Miniatura
Nome:
license.txt
Tamanho:
5.55 KB
Formato:
Item-specific license agreed upon to submission
Descrição:
Baixar
Coleções
Biomedicina