Estudo da sinalização de Ca2+ na modulação e agregação da proteína huntingtina mutante em modelo celular da doença de Huntington
Data
2022-05-23
Autores
Pereira, Cássia Arruda Souza 
Orientadores
Smaili, Soraya Soubhi
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
A doença de Huntington (DH) é uma doença neurodegenerativa causada por uma mutação no gene responsável pela codificação da proteína huntingtina (Htt), que resulta na formação da huntingtina mutante (mHtt). Essa proteína mutante possui um ganho de função tóxica, visto que seus fragmentos podem formar agregados proteicos. A autofagia consiste em um mecanismo de degradação intracelular, que pode ter um efeito neuroprotetor em doenças neurodegenerativas, inclusive na DH. E como o NAADP (ácido nicotínico adenina dinucleotídeo fosfato), que é um potente mobilizador de Ca2+ de organelas ácidas, se mostrou capaz de induzir a autofagia, estudos têm relacionado o seu envolvimento com a autofagia disfuncional em doenças neurodegenerativas, porém pouco se sabe sobre o papel dessa via de sinalização na DH. Portanto, o objetivo desse trabalho foi investigar o efeito da sinalização Ca2+ mediada pelo NAADP nos níveis da mHtt, na formação de agregados proteicos e na modulação da autofagia, em um modelo celular da DH. Nossos resultados mostraram que o NAADP-AM promoveu um aumento do número de agregados de mHtt e que esse efeito foi dependente de Ca2+, visto que o tratamento com BAPTA-AM (quelante de Ca2+) ou Ned-19 (antagonista dos receptores de NAADP) reverteu esse efeito. Estudos de localização intracelular, mostraram que a mHtt apresenta colocalização com os receptores do NAADP (TPC1 e TPC2), indicando uma possível interação entre essas proteínas. Nos estudos de modulação da autofagia, o NAADP-AM não alterou a expressão de proteínas marcadoras autofágicas (LC3-II e p62), o que indica que o NAADP não é capaz modula a autofagia em células contendo a mHtt. Em conjunto, nossos resultados indicam que há um envolvimento da sinalização de Ca2+ mediada pelo NAADP na agregação da mHtt, que pode estar relacionada com uma possível interação da mHtt com os receptores do NAADP. A ausência da estimulação autofágica pelo NAADP também pode contribuir para uma maior agregação da mHtt. Logo, a desregulação dessa via pode contribuir com o aumento da toxicidade da mHtt e consequentemente para a neurodegeneração.
Descrição
Citação
PEREIRA, Cássia Arruda Souza. Estudo da sinalização de Ca2+ na modulação e agregação da proteína huntingtina mutante em modelo celular da doença de Huntington. São Paulo, 2022. 120 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) – Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, 2022.