Fator de crescimento de queratinócitos na expressão de genes relacionados à cicatrização e à resposta imune em células-tronco de queratinócitos de pacientes queimados
Data
2020-03-31
Autores
Custodio, Veronica Chomiski Bicalho 
Orientadores
Gragnani Filho, Alfredo
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
INTRODUCTION: Treatment of severe burn is a huge challenge. Experimental and clinical trials applying growth factors topically may accelerate wound healing in burns. The keratinocyte growth factor (KGF) is produced by fibroblasts and stimulates keratinocytes in the reepithelization of wounds. OBJECTIVE: To analyze the effect of KGF in the gene expression of wound healing- and immune response-related genes of keratinocyte-stem cells (KSC) from patients with severe burn. METHOD: Keratinocytes culture from severe burned patients were supplemented with 40 ɳg of KGF. Then, KSC were obtained by Aldefluor protocol, flow cytometry, and cell sorting for analyzing the wound healingrelated genes and immune response-related genes expression by RT-qPCR Array. RESULTS: There was a greater number of genes expressed in KSC, as well as higher values of relative gene expression. Also, the gene expression of immune response-related genes was greater than wound healing-related genes, both in the number of genes and in the values of relative gene expression. Forty-one of the 84 immune response-related genes were differently expressed, with 93% up-regulated and 7% downregulated in KSC. Eighteen of the 84 genes were differentially expressed, 89% of which were up-regulated and 11% down-regulated in KSC. CONCLUSION: The KGF promotes differentially gene expression in KSC of severe burned patients, and the interesting genes in wound healing are CSF3, IGF1, ITGA6, MMP2, MAPK1, TAGLN, ITGB3, IL10, FGF2 and FGF10 and, in the immune system are MAPK1, TLR7, CCR5, IL2, TRAF6, IRAK1, MAPK8, IL23A, RAG1, and IL17A.
INTRODUÇÃO: O tratamento de grandes queimaduras é um grande desafio. Estudos experimentais e clínicos evidenciam que a aplicação tópica de fatores de crescimento acelera a cicatrização de queimaduras. O fator de crescimento de queratinócito (KGF) é produzido por fibroblastos e estimula queratinócitos na reepitelização de feridas. OBJETIVO: Analisar o efeito do KGF na expressão de genes relacionados à cicatrização e à resposta imune em células-tronco de queratinócitos de pacientes queimados. MÉTODO: Cultura de queratinócitos de pacientes com grande queimadura foi suplementada com 40 ɳg de KGF. Na sequência, foram obtidas as células-tronco (CT), através do protocolo de Aldefluor®, por citometria de fluxo e classificação celular, para a análise da expressão gênica por RT-qPCR Array. RESULTADOS: Houve maior número de genes expressos em CT, bem como maiores valores de expressão gênica relativa. Ainda, a expressão de genes relacionados à resposta imune foi maior do que a expressão genes relacionados à cicatrização, tanto em número de genes quanto em valores de expressão gênica relativa. Quarenta e um dos 84 genes relacionados à resposta imune apresentaram-se diferencialmente expressos, sendo 93% hiperexpressos e 7% hipoexpressos em CT. Dezoito dos 84 genes relacionados à cicatrização apresentaram-se diferencialmente expressos, sendo 89% hiperexpressos e 11% hipoexpressos em CT. CONCLUSÃO: O KGF promoveu expressão gênica diferencial em CT de queratinócitos de pacientes com grande queimadura, sendo os genes de interesse na cicatrização CSF3, IGF1, ITGA6, MMP2, MAPK1, TAGLN, ITGB3, IL10, FGF2 e FGF10 e, na resposta imune, a MAPK1, TLR7, CCR5, IL2, TRAF6, IRAK1, MAPK8, IL23A, RAG1 e IL17A.
INTRODUÇÃO: O tratamento de grandes queimaduras é um grande desafio. Estudos experimentais e clínicos evidenciam que a aplicação tópica de fatores de crescimento acelera a cicatrização de queimaduras. O fator de crescimento de queratinócito (KGF) é produzido por fibroblastos e estimula queratinócitos na reepitelização de feridas. OBJETIVO: Analisar o efeito do KGF na expressão de genes relacionados à cicatrização e à resposta imune em células-tronco de queratinócitos de pacientes queimados. MÉTODO: Cultura de queratinócitos de pacientes com grande queimadura foi suplementada com 40 ɳg de KGF. Na sequência, foram obtidas as células-tronco (CT), através do protocolo de Aldefluor®, por citometria de fluxo e classificação celular, para a análise da expressão gênica por RT-qPCR Array. RESULTADOS: Houve maior número de genes expressos em CT, bem como maiores valores de expressão gênica relativa. Ainda, a expressão de genes relacionados à resposta imune foi maior do que a expressão genes relacionados à cicatrização, tanto em número de genes quanto em valores de expressão gênica relativa. Quarenta e um dos 84 genes relacionados à resposta imune apresentaram-se diferencialmente expressos, sendo 93% hiperexpressos e 7% hipoexpressos em CT. Dezoito dos 84 genes relacionados à cicatrização apresentaram-se diferencialmente expressos, sendo 89% hiperexpressos e 11% hipoexpressos em CT. CONCLUSÃO: O KGF promoveu expressão gênica diferencial em CT de queratinócitos de pacientes com grande queimadura, sendo os genes de interesse na cicatrização CSF3, IGF1, ITGA6, MMP2, MAPK1, TAGLN, ITGB3, IL10, FGF2 e FGF10 e, na resposta imune, a MAPK1, TLR7, CCR5, IL2, TRAF6, IRAK1, MAPK8, IL23A, RAG1 e IL17A.