Caracterização das proteases secretadas por Bacillus sp e encontradas no chorume obtidos da compostagem da fundação do parque zológico de São Paulo
Data
2017-01-31
Autores
Santos, Saara Maria Batista Dos 
Orientadores
Juliano Neto, Luiz
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
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Título de Volume
Resumo
Composting is defined as an active degradation process carried out by microrganisms in optimal conditions. The process can be divided into two distinct phases: the first is the thermophilic phase, which reaches approximately 45-65° C and the second stage involves maturation, resulting in the transformation in the humus material. From the prospect of composting Park Zoo Foundation of São Paulo in July 2013, it was possible to isolate and identify various microorganisms, where the genus Bacillus ssp accounted for 67% of the isolates. Of these, eight were separated Bacillus spp, and by biochemical tests, we observed enzymatic activity in the crude extract front substrates for proteases. The species were collected from a single compost: 3 species collected during the initial stage of degradation, 2 at the end of the process and other '3 between the two stages. The aim of this study was to investigate the biochemical profile of secreted proteases of the eight Bacillus isolates composting FPZSP. Achievements: enzyme activity tests were made with the FRET peptide substrate Abz-KLlSSKQ-EDDnp, secreted by the Bacillus culture in the presence of PMSF and EDTA inhibitors, which verified the presence of metal and serine proteases. Furthermore, the effect of the NaCI salt in the proteolytic activity of the secreted was also tested, where tolerance in concentrations of up to 5M was seen in some strains. The manure that runs through the composters was also separate in order to verify if there were any biochemical profile that percolate. Results: Enzyme activity was verified with the FRET-peptide substrates, which may be the same Bacillus enzymes secreted during the composting process.
A compostagem é definida como um processo de degradação ativa realizada por microrganismos em condições ótimas. O processo pode ser dividido em duas fases: a primeira é a fase termofílica, que chega a atingir cerca de 45-65° C, e a segunda fase consiste na maturação, resultando na transformação do material em húmus. A partir da . prospecção da compostagem da Fundação parque zoológico de São Paulo no mês de julho de 2013, foi possível isolar e identificar diversos microrganismos, onde o gênero 8acillus ssp correspondeu a 67% dos isolados. Destes, oito 8acillus spp foram selecionados, e através de testes bioquímicos, verificamos atividade enzimática em extrato bruto. As espécies foram coletadas de uma única composteira: três espécies coletadas durante a fase inicial de degradação, 2 dois no final do processo e outras três na etapa intermediaria. O objetivo desse trabalho foi verificar o perfil bioquímico das proteases secretadas pelos oito 8acillus isolados da compostagem da FPZSP. Foram ..•. feitos testes de atividade enzimática de secretados dos 8acillus em cultura com o substrato peptídico FRET Abz-KLlSSKQ-EDDnp, na presença dos inibidores PMSF e EDTA, onde verificamos a presença de metalo e serino proteases. Além disso, o efeito do sal NaCI na atividade proteolítica dos secretados também foi analisado, onde a tolerância em concentrações de até 5 M foi verificada em algumas cepas. O chorume que percorre as composteiras também foi separado com objetivo de verificar se havia algum perfil enzimático nesse percolado. Foi verificada atividade enzimática com o substratos peptídico FRET, podendo ser as mesmas enzimas que os 8acillus secretaram durante o processo de compostagem.
A compostagem é definida como um processo de degradação ativa realizada por microrganismos em condições ótimas. O processo pode ser dividido em duas fases: a primeira é a fase termofílica, que chega a atingir cerca de 45-65° C, e a segunda fase consiste na maturação, resultando na transformação do material em húmus. A partir da . prospecção da compostagem da Fundação parque zoológico de São Paulo no mês de julho de 2013, foi possível isolar e identificar diversos microrganismos, onde o gênero 8acillus ssp correspondeu a 67% dos isolados. Destes, oito 8acillus spp foram selecionados, e através de testes bioquímicos, verificamos atividade enzimática em extrato bruto. As espécies foram coletadas de uma única composteira: três espécies coletadas durante a fase inicial de degradação, 2 dois no final do processo e outras três na etapa intermediaria. O objetivo desse trabalho foi verificar o perfil bioquímico das proteases secretadas pelos oito 8acillus isolados da compostagem da FPZSP. Foram ..•. feitos testes de atividade enzimática de secretados dos 8acillus em cultura com o substrato peptídico FRET Abz-KLlSSKQ-EDDnp, na presença dos inibidores PMSF e EDTA, onde verificamos a presença de metalo e serino proteases. Além disso, o efeito do sal NaCI na atividade proteolítica dos secretados também foi analisado, onde a tolerância em concentrações de até 5 M foi verificada em algumas cepas. O chorume que percorre as composteiras também foi separado com objetivo de verificar se havia algum perfil enzimático nesse percolado. Foi verificada atividade enzimática com o substratos peptídico FRET, podendo ser as mesmas enzimas que os 8acillus secretaram durante o processo de compostagem.
Descrição
Citação
SANTOS, Saara Maria Batista Dos. Caracterização das proteases secretadas por Bacillus sp e encontradas no chorume obtidos da compostagem da fundação do parque zológico de São Paulo. 2016. 235 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas: Biologia Molecular) – Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, 2016.