Papel do transportador de arginina na biologia do Trypanosoma cruzi
Data
2024-12-06
Autores
Moraes, Gabriella Luisa Pasini 
Orientadores
Schenkman, Sergio
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
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Resumo
O Trypanosoma cruzi, que é o parasita causador da doença de Chagas, possui diversos mecanismos responsáveis por adaptações a diferentes ambientes para seu desenvolvimento no hospedeiro. Em situações de diminuição nos níveis de ATP devido a falta de nutrientes, o parasita pode utilizar como doador de energia arginina fosfato produzida pela ação de uma uma quinase. A arginina, por sua vez, é incorporada pelo parasita através de transportadores de membrana. Em nosso laboratório foi gerado um mutante por edição gênica pela técnica de CRISPR/Cas9, que possui uma perda significativa de um tandem de genes idênticos que codificam para um transportador catiônico que é capaz de promover incorporação da arginina em sistemas heterólogos. Além da perda deste tandem, houve perda de um alelo de diversos genes, entre eles de Rab11, uma proteína relacionada às vias de endocitose. Este mutante é parcialmente resistente à higromicina, endocita menos nutrientes macromoleculares e não é capaz de se diferenciar em formas infectivas. Além disso, incorpora menos hemina, diferentemente da linhagem parental. Para este trabalho de conclusão de curso o nosso objetivo foi de avaliar se neste mutante a incorporação de arginina é reduzida, detectar os níveis de expressão de RNA mensageiro total, além de analisar a endocitose e a diferenciação nos mutantes em que fizemos a restauração da expressão do gene, com o intuito de verificar se o receptor e/ou transportador de arginina tem impacto na diferenciação e nas vias de endocitose. Verificamos que o mutante tem de fato uma menor expressão dos genes para o transportador e incorpora menos arginina. Entretanto, a re-expressão do transportador ou Rab11, não foi capaz de reverter o fenótipo de deficiência de endocitose, incorporação de heme e de diferenciação em formas infectivas do parasita, indicando que outras alterações estão também envolvidas.
Descrição
Citação
MORAES, Gabriella Luisa Pasini. Papel do transportador de arginina na biologia do Trypanosoma cruzi. 2024. 47 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biomedicina) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). São Paulo, 2024.