Participação do núcleo do trato solitário comissural e dos corpúsculos carotídeos durante o desenvolvimento e manutenção da hipertensão renovascular em ratos
| dc.contributor.advisor | Colombari, Eduardo [UNIFESP] | |
| dc.contributor.advisorLattes | http://lattes.cnpq.br/4544450092427426 | |
| dc.contributor.author | Melo, Mariana Del Rosso de [UNIFESP] | |
| dc.contributor.authorLattes | http://lattes.cnpq.br/9267221901894147 | |
| dc.contributor.institution | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) | |
| dc.coverage.spatial | São Paulo | |
| dc.date.accessioned | 2019-06-19T14:57:22Z | |
| dc.date.available | 2019-06-19T14:57:22Z | |
| dc.date.issued | 2017-09-28 | |
| dc.description.abstract | A hipertensão arterial (HA) é uma doença crônica que é usualmente classificada como hipertensão primária/ idiopática e hipertensão secundária. Um importante modelo experimental de hipertensão secundária é o modelo de hipertensão renovascular 2 rins 1 clipe (2R1C), que é dependente da maior atividade do sistema renina-angiotensina (SRA) e da atividade simpática. Outros fatores podem contribuir para o aumento da pressão arterial em diferentes modelos de hipertensão, tais como: alterações na atividade neuronal do núcleo do trato solitário comissural (NTS comissural) e na sensibilidade dos quimiorreceptores periféricos, localizados nos corpúsculos carotídeos (CC). Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar a participação do NTS comissural e dos CC nos parâmetros cardiorrespiratórios em animais 2R1C. Foram utilizados ratos Holtzman que tiveram o clipe de prata inserido ao redor da artéria renal para induzir a hipertensão 2R1C. Após quatro semanas, em um grupo de animais, o CC foi removido (RCC). Em outro grupo de animais, seis semanas após a cirurgia 2R1C, salina ou isoguvacina (agonista gabaérgico) foi injetado no NTS comissural. Nossos resultados mostraram que a injeção de isoguvacina no NTS comissural produziu intensa redução da pressão arterial média (PAM) e da freqüência cardíaca (FC) nos animais 2R1C, mostrando que os neurônios do NTS comissural estão tonicamente mais ativados, sendo de fundamental importância para a manutenção da hipertensão nesses animais. Parte dessa ativação pode ser causada por sinais excitatórios provenientes dos CC, uma vez que a RCC foi capaz de reduzir a PAM e atenuar o desenvolvimento da hipertensão em animais RCC/2R1C, mas nenhum parâmetro cardiovascular foi alterado nos animais normotensos (NT). Nós também avaliamos os parâmetros ventilatórios nos animais 2R1C e os resultados mostraram que animais sham-RCC/2R1C apresentam aumento de ventilação (VE) quando comparado à de animais sham-RCC/NT devido ao aumento do volume corrente (VT). Em seguida testamos a hipótese de que o aumento da ventilação seria decorrente do aumento do consumo de O2 (VO2) e da liberação de CO2 (VCO2). Os resultados obtidos mostraram que animais sham-RCC/2R1C apresentam aumento de VO2 e de VCO2, quando comparado a animais sham-RCC/NT; no entanto, a RCC não foi capaz de alterar VO2 ou VCO2 nos animais 2R1C. Assim, nós sugerimos que o aumento da ventilação pulmonar nos animais 2R1C não era dependente de VO2 ou VCO2, mas que poderia ser dependente de mecanismos que acarretassem na maior atividade e/ou sensibilização dos CC. Para que essa questão fosse esclarecida, nós avaliamos a sensibilidade do quimiorreflexo periférico nos animais hipertensos e normotensos. Obtivemos como resultado que as respostas ventilatórias à hipóxia foram exacerbadas nos animais sham-RCC/2R1C quando comparada ao de animais sham-RCC/NT, indicando que os CC destes animais estão mais sensibilizados, o que poderia explicar aumento da ventilação basal nos animais hipertensos. Além disso, estudos já mostraram que a sinalização angiotensinérgica no SNC induz a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) e facilita o aumento da pressão arterial. Para testar se a ANG II e as EROs no NTS comissural também poderiam estar envolvidas com a hipertensão renovascular, seis semanas após a cirurgia 2R1C, salina ou losartan foi injetado no NTS comissural. Os procedimentos de imunohistoquímica para marcação de Iba-1 ou GFAP e RT-PCR também foram realizados. Observamos que o antagonismo de receptores de angiotensina do tipo 1 (AT1R), promoveu redução da pressão arterial somente nos ratos hipertensos, e que a expressão de NOX2, IL-6 e TNF-α está aumentada no NTS desses animais. Considerando que a NOX2 está localizada em células da glia, nós marcamos por meio de imunohistoquímica, astrócitos e micróglias no NTS de animais 2R1C e NT. Os resultados mostraram que animais 2R1C apresentam aumento do número de micróglias e astrócitos no NTS comissural, sugerindo que os altos níveis de pressão arterial observados nos animais 2R1C parecem ser dependentes da interação entre as vias ANG II/ AT1R, EROs e citocinas pró-inflamatórias no NTS comissural. No presente estudo, nós também avaliamos o fenótipo dos neurônios do NTS comissural que participam da manutenção da hipertensão arterial, bem como as áreas para as quais eles se projetam. Em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) foi realizada a injeção do vírus AAV-CBA-hM4DREADD-mCherry no NTS comissural. Três semanas após, foram realizadas as medidas dos parâmetros cardiovasculares e também os procedimentos imunohistoquímicos. Os resultados demonstraram que parte dos neurônios do NTS comissural responsáveis pela manutenção da hipertensão eram imunorreativos para PHOX2B e se projetavam para os neurônios C1/área rostroventrolateral do bulbo (RVL), grupamento respiratório ventral rostral (GRVr) e complexo Bötzinger, que são importantes áreas que modulam a atividade simpática e respiratória. Como conclusão, os resultados sugerem que a maior atividade neuronal do NTS comissural é essencial para a manutenção da hipertensão em ratos 2R1C e que esses neurônios podem ser ativados por informações provenientes de quimiorreceptores periféricos e também por ação direta da ANG II. Além disso, esses neurônios podem ativar áreas responsáveis pelo controle da atividade simpática e respiratória levando a hipertensão nos animais 2R1C. | pt_BR |
| dc.description.abstract | Arterial hypertension (AH) is a chronic disease that can be classified as idiopathic/primary hypertension and secondary hypertension. An important experimental model of secondary hypertension is the renovascular hypertension model – 2 kidneys 1 clip (2K1C), which is dependent on renin-angiotensin system (RAS) and sympathetic overactivity. Other factors can contribute to the increase in arterial pressure in different models of hypertension, like changes in the neuronal activity of commissural nucleus of the solitary tract NTS (cNTS) and in the sensitivity of the peripheral chemoreceptors, located on carotid bodies (CB). Thus, the aim of this study was to evaluate the role of cNTS and CB on cardiorespiratory parameters in 2K1C animals. Male normotensive Holtzman rats were implanted with a silver clip around the left renal artery to induce 2K1C hypertension. Four weeks later, in one group of animals, the carotid body was removed. In another group of rats, six weeks later, saline or isoguvacine (gabaergic agonist) was injected into the cNTS. Our results showed that the injection of isoguvacine into the cNTS produced a greater reduction on mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR) in 2K1C rats than in normotensive (NT) rats, showing that the cNTS neurons are tonically more activated and essential to maintenance of renovascular hypertension. Part of this activation might be caused by excitatory signals from CB, since the CB removal (CBR) was able to reduce PAM and attenuated the development of hypertension in CBR/2K1C rats, but did not change any cardiovascular parameter in NT animals. We also analyzed the ventilatory parameters in 2K1C animals and the results showed that the sham-CBR/2K1C group had higher ventilation (VE) when compared with group sham-CBR/NT due to a higher tidal volume (VT). Next, we tested the hypothesis that the ventilation enhancement could be caused by an increase of O2 consumption (VO2) or CO2 release (VCO2). The results showed that animals sham-CBR/2K1C have higher VO2 and VCO2 than animals sham-CBR/NT, however CBR was not able to change VO2 or VCO2 in 2K1C rats. Thus, we suggested that the increase on pulmonary ventilation in 2K1C rats were not dependent on VO2 or VCO2, but it could be dependent on other mechanisms that could increase on activity and sensitivity of CB. Answering this question, we evaluated the peripheral chemoreflex sensitivity in hypertensive and normotensive rats. As a result, we got that the ventilatory changes to hypoxia were much higher in sham-CBR/2K1C than in sham-CBR/NT, suggesting that the CB are more sensitized in hypertensive rats, which could explain the baseline respiratory changes in these animals. In addition, studies have showed that angiotensinergic signalization is able to induce reactive oxygen species (ROS) production in the central nervous system (CNS) and increase arterial pressure. To test if angiotensin II and ROS in the cNTS could be related to hypertension in 2R1C, saline or losartan was injected into the cNTS and immunohistochemistry for Iba-1 or GFAP and RT-PCR were performed 6 weeks after the clip insertion. We observed that AT1R blockade reduced blood pressure and there was an increase of NOX2, IL-6 and TNF-α mRNA in the NTS of 2K1C rats. Considering that NOX2 is also located in glia cells, we performed the immunohistochemistry to label astrocytes and microglias in the NTS of 2K1C and NT rats. Results showed that 2K1C rats have an increase of microglias and astrocytes in cNTS compared to NT rats, suggesting that the higher level of blood pressure might be dependent on an interaction among ANG II/ AT1R, ROS and proinflammatory cytokines in the cNTS. In the present study, we also evaluated the phenotype of cNTS neurons that are involved with maintenance of hypertension as well the areas they project. In male rats SHR, AAV-CBA-hM4DREADD-mCherry virus was injected into the cNTS. Three weeks later, blood pressure and the immunohistochemistry were analyzed. The results demonstrated that part of cNTS neurons responsible for maintenance of hypertension were immunorreactive to PHOX2B and project to C1 neurons/rostroventrolateral medulla (RVLM), rostral ventral respiratory group (rVRG) and Bötzinger complex, which are important sites that modulates sympathetic and respiratory activity. In conclusion, the results suggest the higher neuronal activity of cNTS caused by an excitatory drive from peripheral chemoreceptors and by direct action of ANG II, probably, may activate sites responsible for sympathetic and respiratory activity leading to hypertension in 2R1C animals. | en |
| dc.description.source | Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2017) | |
| dc.description.sponsorship | Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) | |
| dc.description.sponsorship | Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) | |
| dc.description.sponsorshipID | FAPESP: 2014/01159-6 | |
| dc.description.sponsorshipID | CNPq: 449392/2014-7 | |
| dc.format.extent | 152 p. | |
| dc.identifier | https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5590737 | |
| dc.identifier.citation | MELO, Mariana Del Rosso de. Participação do núcleo do trato solitário comissural e dos corpúsculos carotídeos durante o desenvolvimento e manutenção da hipertensão renovascular em ratos. São Paulo, 2017. [152] p. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Escola Paulista de Medicina (EPM), Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2017. | |
| dc.identifier.uri | http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50067 | |
| dc.language.iso | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.subject | Renovascular hypertension | en |
| dc.subject | Commissural NTS | en |
| dc.subject | Carotid body | en |
| dc.subject | Peripheral chemoreflex | en |
| dc.subject | Pulmonary ventilation | en |
| dc.subject | Angiotensin II | en |
| dc.subject | Reactive oxygen species | en |
| dc.subject | Proinflammatory cytokines | en |
| dc.subject | Hipertensão renovascular | pt-BR |
| dc.subject | NTS comissural | pt_BR |
| dc.subject | Corpúsculo carotídeo | pt_Br |
| dc.subject | Quimiorreflexo periférico | pt_BR |
| dc.subject | Ventilação pulmonar | pt_BR |
| dc.subject | Angiotensina II | pt_BR |
| dc.subject | Espécies reativas de oxigênio | pt_BR |
| dc.subject | Citocinas pró-inflamatórias | pt_BR |
| dc.title | Participação do núcleo do trato solitário comissural e dos corpúsculos carotídeos durante o desenvolvimento e manutenção da hipertensão renovascular em ratos | pt_BR |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
| unifesp.campus | Escola Paulista de Medicina (EPM) | |
| unifesp.graduateProgram | Farmacologia | |
| unifesp.knowledgeArea | Fisiologia e Farmacologia | |
| unifesp.researchArea | Fisiologia e Farmacologia Cardiovascular e Renal |
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