Estudos sobre a interação entre o receptor HER2 e trastuzumabe em filmes de Langmuir e filmes de Langmuir-Blodgett

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dc.contributor.advisorCaseli, Luciano [UNIFESP]pt
dc.contributor.authorSakai, Andrei [UNIFESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)pt
dc.date.accessioned2018-07-30T11:43:48Z
dc.date.available2018-07-30T11:43:48Z
dc.date.issued2016-08-25
dc.description.abstractThe present work aimed to characterize the interactions between the HER2 receptor and trastuzumab (Tmab) using Langmuir and Langmuir-Blodgett films as biomembrane models. The comprehension of individual interactions of Tmab with membrane biomolecules was enabled by a bottom-up methodology based on the comparison between films produced from cellular extracts (parental and tumorigenic lines) and films produced from synthetic lipids. Firstly, the cell lines were tested regarding the overexpression of HER2 on the cell surface, and then considering the viability, proliferation, apoptotic behavior when treated with Tmab. Subsequently, the formation of stable membranes containing phospholipids and proteins produced from cell extracts on the air-water interface was proved by tensiometry, surface potential, vibrational spectroscopy (PM-IRRAS), Brewster Angle Microscopy (BAM) and Atomic Force Microscopy (AFM); by which aggregates and domains were observed. Different lipid compositions of the cellular models were detected by Thin Layer Chromatography (HPTLC), and they are likely to modulate the specific and dissimilar interactions of Tmab with each cell line, serving as reference for lipid-based membranes production. Tmab induced formation of phases and domains on the cell-based membranes, affecting directly its fluidity. Moreover, Tmab presented more noteworthy interaction with DPPE films, inducing a membrane expansion in a higher extent. In general, the results indicate that Tmab not only interacts with the HER2 receptor, but it also affects the fluidity of the structural and molecular architecture of the phospholipidic membrane, which may be related to molecular mechanism of its pharmacological action.en
dc.description.abstractEste trabalho teve como objetivo caracterizar as interações entre o receptor HER2 e trastuzumabe (Tmab), tendo como modelos filmes de Langmuir e Langmuir-Blodgett construídos a partir de extratos celulares (linhagem parental e tumorigênica), e comparando-os com filmes produzidos a partir de lipídios sintéticos (DPPC, DPPE). Essa estratégia nos permitiu o entendimento individual e gradativo dos fatores que compõem o modelo de membrana de extratos celulares numa metodologia bottom-up. Primeiramente, as linhagens foram avaliadas quanto à superexpressão do receptor HER2 na superfície celular. Em seguida, a linhagem parental (endotelial de aorta de coelho, EC) e as linhagens tumorigênicas (EJ-ras EC e Adh1-EC) foram avaliadas quanto à resposta ao Tmab e os resultados permitiram sua utilização como organismo-modelo para estudo com Tmab. Posteriormente, foi avaliada a formação de filmes de Langmuir a partir de extratos celulares. Resultados das isotermas de pressão superficial-área (?-A), elasticidade superficial, ensaios de histerese, espectroscopia vibracional (PM-IRRAS), e microscopia no ângulo de Brewster (BAM) indicam a formação de filmes estáveis na interface ar-água compostas por fosfolipídios e proteínas possivelmente formando agregados ou domínios. A caracterização do lipidoma por cromatografia em camada delgada da membrana celular de cada linhagem permitiu observar diferentes proporções entre os lipídios estruturais, o que pode induzir diferentes comportamentos interativos com Tmab. Notou-se intenso efeito do Tmab na fluidez dos filmes feitos a partir de extratos celulares, com a formação de diferentes fases e domínios. Em relação aos filmes de lipídios sintéticos, foi observada interação mais intensa do DPPE com Tmab. Em suma, os resultados mostram que Tmab interage não somente com o receptor HER2, mas com os lipídios estruturais da membrana celular, cuja composição pode influenciar seu comportamento interativo e pode expandir o entendimento da dinâmica de ação farmacológica do Tmab.pt
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2013 a 2016)
dc.format.extent101 p.
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=4059116pt
dc.identifier.citationSAKAI, Andrei. Estudos sobre a interação entre o receptor her2 e trastuzumabe em filmes de langmuir e filmes de langmuir-blodgett. 2016. 101 f. Dissertação (Mestrado) - Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Diadema, 2016.
dc.identifier.file2016-0064.pdf
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/47158
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectLangmuiren
dc.subjectLangmuir-Blodgetten
dc.subjectTrastuzumaben
dc.subjectBiomembraneen
dc.subjectHER2en
dc.subjectLangmuirpt
dc.subjectLangmuir-Blodgettpt
dc.subjectTrastuzumabept
dc.subjectBiomembranapt
dc.subjectHER2pt
dc.titleEstudos sobre a interação entre o receptor HER2 e trastuzumabe em filmes de Langmuir e filmes de Langmuir-Blodgettpt
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusInstituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas (ICAQF)pt
unifesp.graduateProgramBiologia Químicapt
unifesp.knowledgeAreaBiologia Químicapt
unifesp.researchAreaBiologia Celular, Molecular e Transdução de Sinaispt
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