Avaliação da exposição prolongada de células microgliais (BV-2) e hipotalâmicas (mHypoA-2/12) ao ácido graxo saturado palmitato: uma simulação in vitro da exposição do sistema nervoso à uma dieta hiperlipídica
Data
2024-11-18
Autores
Mota, Isabela Regina 
Orientadores
Silva, Cristiano Mendes da
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
Título da Revista
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Resumo
Introdução: O consumo em larga escala de dietas hiperlipídicas é um fator de risco para o desenvolvimento de obesidade. O excesso de ácidos graxos saturados nessas dietas ativa vias inflamatórias e eleva o estresse oxidativo. No sistema nervoso central (SNC) esse processo pode causar morte neural em diferentes regiões do encéfalo, gerando alterações cognitivas e comportamentais. Objetivo: O principal objetivo deste trabalho é analisar o efeito da exposição de linhagens de células microgliais e hipotalâmicas a uma baixa concentração de palmitato a médio prazo, sobre vias relacionadas à inflamação. Métodos: Foram usadas células BV-2 (micróglias) e mHypoA (células hipotalâmicas adultas). Após o teste de viabilidade celular (MTT), foi selecionada a concentração de 25 µM para o protocolo. Ambas as linhagens foram expostas ao palmitato (25 µM), com um grupo controle paralelo. Após 10 dias, a secreção de citocinas (IL-1B, interferon gamma, TNF-α, IL-10, IL-6 e IL-4) foi analisada no meio de cultura via ELISA. Resultados: A exposição ao palmitato reduziu significativamente a viabilidade celular nas células BV-2 (50 µM) e mHypoA (100 µM). Analisando o meio de cultura das células expostas ao palmitato (25 µM), as células BV-2 mostraram aumento de IL-6 e redução de TNF-α, enquanto as mHypoA apresentaram apenas aumento de IL-6.Conclusão: O modelo proposto se mostrou efetivo na indução de marcadores pró-inflamatórios nas linhagem de células estudadas, porém, é necessário levar em conta a dinâmica de secreção das diferentes citocinas na análise dos resultados.
Introduction: Large-scale consumption of high-fat is a risk factor for developing obesity. The excess of saturated fatty acids in these diets activate inflammatory pathways and increase oxidative stress. In the central nervous system (CNS), this process can cause neural death in different regions of the brain, generating cognitive and behavioral changes. Objective: The main objective of this study is to analyze the effect of medium-term exposure of microglial and hypothalamic cell lines to a low concentration of palmitate on pathways related to inflammation. Methods: BV-2 (microglia) and mHypoA (adult hypothalamic cells) cells were used. After the cell viability test (MTT), a concentration of 25 µM was selected for the protocol. Both cell lines were exposed to palmitate (25 µM), with a parallel control group. After 10 days, cytokine secretion (IL-1B, interferon gamma, TNF-α, IL-10, IL-6 and IL-4) was analyzed in the culture medium via ELISA. Results: Exposure to palmitate significantly reduced cell viability in BV-2 (50 µM) and mHypoA (100 µM) cells. Analyzing the culture medium of cells exposed to palmitate (25 µM), BV-2 cells showed an increase in IL-6 and a reduction in TNF-α, while mHypoA cells showed only an increase in IL-6. Conclusion: The proposed model proved to be effective in inducing pro-inflammatory markers in the cell lines studied; however, it is necessary to take into account the secretion dynamics of the different cytokines in the analysis of the results.
Introduction: Large-scale consumption of high-fat is a risk factor for developing obesity. The excess of saturated fatty acids in these diets activate inflammatory pathways and increase oxidative stress. In the central nervous system (CNS), this process can cause neural death in different regions of the brain, generating cognitive and behavioral changes. Objective: The main objective of this study is to analyze the effect of medium-term exposure of microglial and hypothalamic cell lines to a low concentration of palmitate on pathways related to inflammation. Methods: BV-2 (microglia) and mHypoA (adult hypothalamic cells) cells were used. After the cell viability test (MTT), a concentration of 25 µM was selected for the protocol. Both cell lines were exposed to palmitate (25 µM), with a parallel control group. After 10 days, cytokine secretion (IL-1B, interferon gamma, TNF-α, IL-10, IL-6 and IL-4) was analyzed in the culture medium via ELISA. Results: Exposure to palmitate significantly reduced cell viability in BV-2 (50 µM) and mHypoA (100 µM) cells. Analyzing the culture medium of cells exposed to palmitate (25 µM), BV-2 cells showed an increase in IL-6 and a reduction in TNF-α, while mHypoA cells showed only an increase in IL-6. Conclusion: The proposed model proved to be effective in inducing pro-inflammatory markers in the cell lines studied; however, it is necessary to take into account the secretion dynamics of the different cytokines in the analysis of the results.
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MOTA, Isabela Regina. Avaliação da exposição prolongada de células microgliais (BV-2) e hipotalâmicas (mHypoA-2/12) ao ácido graxo saturado palmitato: uma simulação in vitro da exposição do sistema nervoso à uma dieta hiperlipídica. 2024. 17 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Nutrição) – Universidade Federal de São Paulo, Instituto de Saúde e Sociedade, Santos 2024.