Análise dos aspectos funcionais dos espermatozoides e do perfil proteômico de plasma seminal de homens tabagistas

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dc.contributor.advisorBertolla, Ricardo Pimenta Bertolla [UNIFESP]pt
dc.contributor.authorAntoniassi, Mariana Pereira [UNIFESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)pt
dc.date.accessioned2018-07-27T15:49:33Z
dc.date.available2018-07-27T15:49:33Z
dc.date.issued2014-02-12
dc.description.abstractObjectives: To evaluate the effect of smoking on sperm functional aspects, semen oxidative stress and seminal plasma proteomic profile. Method: A cross-sectional observational study including 20 nonsmokers patients with normal semen quality, according to the World Health Organization (2010) (control group), and 20 smoking patients (study group). Beyond semen analysis, sperm function tests were performed on each patient: evaluation of DNA integrity by alkaline Comet assay; analysis of mitochondrial activity using 3,3' - diaminobenzidine (DAB) staining; and evaluation of acrosomal integrity by PNA (Peannut Agglutinin) binding to the outer acrosomal membrane. The seminal plasma was used to assess the level of oxidative stress by TBARS (Thiobarbituric acid reactive substances) quantification and label-free quantitative proteomic analysis by LC-MS/MS. Groups were compared using a Student?s T test (p <0.05), considering a minimum fold-change of 2.0 (or maximum of 0.5). Results: The group of smokers presented higher percentage of DNA damage (Comet class III and IV), partially and fully inactive mitochondria (DAB class III and IV) and non-intact acrosomes when compared to the control group. No difference in the level of oxidative stress among groups was observed. With respect to proteomic analysis, 422 proteins were identified and quantified, of which one protein was absent (Mammaglobin-B), 6 proteins were underexpressed (Prolargin, Poly(rC)- binding protein 1, Bile salt-activated lipase, Carbonyl reductase [NADPH] 1, Phospholipase A2, membrane associated, CD44 antigen) and 3 proteins were overexpressed among smokers (S100-A9, Neutrophil gelatinase-associated lipocalin e Alpha-1-acid glycoprotein 1). Conclusions: Cigarette smoking alters the functional quality of sperm and the seminal plasma proteomic profile of men, but does not alter the levels of oxidative stress. The overexpressed proteins have functions related to the metabolism of steroids and derivatives of arachidonic acid, as well as preservation of the extracellular scaffold. Among the overexpressed proteins, we highlight the immune function.en
dc.description.abstractObjetivos: Avaliar o efeito do tabagismo nos aspectos funcionais dos espermatozoides, nos níveis de estresse oxidativo e no perfil proteômico do plasma seminal. Método: Foi realizado um estudo observacional transversal incluindo 20 pacientes não tabagistas e com qualidade seminal normal, segundo a Organização Mundial da Saúde (2010) (grupo Controle) e 20 pacientes fumantes (grupo de Estudo). Além da análise seminal, foram realizadas as provas funcionais dos espermatozoides de cada paciente: avaliação da integridade do DNA pelo ensaio Cometa alcalino; análise da atividade mitocondrial, utilizando-se coloração por 3,3'-diaminobenzidina (DAB); e avaliação da integridade acrossomal, por meio da ligação de PNA (Peannut Agglutinin) à membrana acrossomal externa. O plasma seminal foi utilizado para avaliação do nível de estresse oxidativo, pela mensuração de TBARS (Thiobarbituric acid reactive substances) e para análise proteômica quantitativa label-free através de LC-MS/MS. Os grupos foram comparadas através do teste t de Student (p<0,05) e foi adotado um fold-change mínimo de 2,0 (ou máximo de 0,5). Resultados: O grupo dos tabagistas apresentou maiores porcentagens de dano ao DNA (Cometa classes III e IV), de mitocôndrias parcialmente e totalmente inativas (DAB classes III e IV) e de acrossomas não íntegros quando comparados ao grupo Controle. Não foi observada diferença no nível de estresse oxidativo entre os grupos. Com relação à análise proteômica, foram identificadas e quantificadas 422 proteínas, das quais 1 proteína foi ausente (Mammaglobin-B), 6 proteínas foram hipoexpressas (Prolargin, Poly(rC)-binding protein 1, Bile salt-activated lipase, Carbonyl reductase [NADPH] 1, Phospholipase A2, membrane associated, CD44 antigen) e 3 proteínas foram hiperexpressas no grupo tabagista (S100-A9), Neutrophil gelatinase-associated lipocalin e Alpha-1-acid glycoprotein 1). Conclusões: O tabagismo altera a qualidade funcional dos espermatozoides e o perfil proteômico do plasma seminal de homens tabagistas, porém não altera os níveis de estresse oxidativo. As proteínas hipoexpressas apresentam funções ligadas ao metabolismo de esteroides e de derivados do ácido araquidônico, bem como de preservação do arcabouço extracelular. Dentre as proteínas hiperexpressas, podemos destacar a função imune entre elas.pt
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2013 a 2016)
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2224026pt
dc.identifier.citationANTONIASSI, Mariana Pereira. Análise dos aspectos funcionais dos espermatozoides e do perfil proteômico de plasma seminal de homens tabagistas. 2014. Dissertação (Mestrado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2014.
dc.identifier.file2014-0652.pdf
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/46130
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectacrosomeen
dc.subjectdna damageen
dc.subjectmitochondria/metabolismen
dc.subjectproteomicsen
dc.subjectsemenen
dc.subjectsmokingen
dc.subjectacrossomopt
dc.subjectfragmentação do dnapt
dc.subjectmitocôndria/metabolismopt
dc.subjectproteômicapt
dc.subjectsêmenpt
dc.subjecttabagismopt
dc.titleAnálise dos aspectos funcionais dos espermatozoides e do perfil proteômico de plasma seminal de homens tabagistaspt
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt
unifesp.graduateProgramMedicina (Urologia)pt
unifesp.knowledgeAreaCiências da saúdept
unifesp.researchAreaMedicinapt
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