Expressão gênica dos receptores de estrogênios, das ciclinas e dos marcadores de proliferação celular pela genisteína no útero de ratas tratadas imediatamente ou 30 dias após ooforectomia

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dc.contributor.advisorSimoes, Manuel de Jesus Simoes [UNIFESP]pt
dc.contributor.authorCarbonel, Adriana Aparecida Ferraz [UNIFESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)pt
dc.date.accessioned2018-07-30T11:45:35Z
dc.date.available2018-07-30T11:45:35Z
dc.date.issued2013-09-25
dc.description.abstractObjective: Identification of potential genes of the signaling cascade of estrogen receptors expressed in the uterus of rats treated immediately or lately with genistein or 17&#946;-estradiol. Methods: 60 rats (Rattus norvegicus albinus) females, adult, ± 3 months old were divided into six (6) groups: GI immediate control - animals received vehicle; GII late control - animals received vehicle after 30 days of ovariectomy; GIII immediate genistein - animals treated with genistein (50mg/Kg) 30 days after ovariectomy; GIV late genistein - animals treated with genistein (50mg/Kg) 30 days after ovariectomy; GV immediate estrogen - animals treated with estrogen (17&#946;-estradiol, 10&#956;g/Kg) after ovariectomy and GVI late estrogen - animals treated with estrogen (17&#946;-estradiol, 10&#956;g/Kg) 30 days after ovariectomy. All animals were treated for 30 consecutive days. At the end of treatment, they were anesthetized and part of the uteri removed and immediately immersed in liquid nitrogen for molecular biological analysis and another part in 10% formaldehyde for subsequent histological processing in paraffin for morphological and immunohistochemical study. Statistical analyzes were performed using the software GraphPadPrism ® 5.0 (GraphPad Software Inc.). Statistical test used was one-way ANOVA followed by Tukey test (p < 0,05). Results: Relative expression of ESR2 genes , VEGF - A, MKI67, CCNA1, CCNA2, CCND1, CDK1A, CDKN1B, CDKN1A, CDKNB1 was generally very similar in animals treated immediately or later with genistein (GVI > GV > GIV = GIII > GII = GI), and immediate treatment in the ESR1 gene, showed a higher expression in GIII, however, when compared with GIV was lower than groups GV and GVI . Morphological data showed similar morphology and morphometry in immediate or late treatment. Thus, showing higher endometrial thickness, endometrial surface epithelium, number of glands, glandular circular area, myometrium area and the number of vessels in groups GIV and GV, when compared to other groups. Likewise we observed similar immunohistochemistry results from the beginning of treatment period. As scores of Vegf and Ki67 were higher in GVI (GVI > GV > GIV = GIII > GII = GI). Conclusion: Our data showed that treatment with genistein immediately or 30 days after ovariectomy were similar in relation to the genes of the estrogen receptor pathway, but the immediate treatment have observed increased expression of alpha receptors. The treatment with estrogens obtained greater activation of the gene via the estrogen receptors when administered lately.en
dc.description.abstractObjetivo. Identificação de possíveis genes da cascata de sinalização dos receptores de estrogênio expressos no útero de ratas tratadas imediatamente ou tardiamente com genisteína ou 17&#946;-estradiol. Métodos: Foram utilizadas 60 ratas (Rattus norvegicus albinus), fêmeas, adultas ±3 meses de idade. Os animais foram separados em seis (6) grupos, a saber: GI controle imediato – animais que receberam veículo; GII controle tardio – animais que receberam veículo após 30 dias da ooforectomia; GIII genisteína imediato - animais tratados com genisteína (50mg/Kg) logo após ooforectomia; GIV genisteína tardio - animais tratados com genisteína (50mg/Kg) 30 dias após a ooforectomia; GV estrogênio imediato - animais tratados com estrogênio (17&#946;-estradiol, 10µg/Kg), logo após a ooforectomia; e GVI estrogênio tardio - animais tratados com estrogênio (17&#946;-estradiol, 10µg/Kg) após 30 dias da ooforectomia. Todos os animais foram tratados durante 30 dias consecutivos, sendo ao final anestesiados e os úteros removidos, sendo parte imediatamente mergulhada em nitrogênio liquido para a análise de biológica molecular e outra parte em formaldeído a 10% para posterior processamento histológico de inclusão em parafina para estudo morfológico e imunoistoquímico. As análises estatísticas foram realizadas com auxílio do software GraphPadPrism 5.0® (GraphPad Software Inc.). O teste utilizado foi One-way ANOVA seguido do teste de Tukey (p<0,05). Resultados: A expressão relativa dos genes ESR2, VEGF-A, MKI67, CCNA1, CCNA2, CCND1, CDK1A, CDKN1B, CDKN1A, CDKNB1, foi de modo geral muito parecida nos animais tratados imediatamente ou tardiamente com genisteína (GVI>GV>GIV=GIII>GII=GI), sendo que no tratamento imediato o gene ESR1, apresentou maior expressão no grupo GIII, quando comparado com GIV, no entanto foram inferiores aos grupos GV e GVI. Os dados morfológicos mostraram morfologia e morfometria semelhantes nos tratamentos imediato ou tardio. Assim, obtivemos maior espessura do endométrio, do epitélio superficial endometrial, do número de glândulas, da área circular glandular, da área do miométrio e do número de vasos nos grupos GVI e GV, quando comparado aos demais grupos. Da mesma maneira observamos resultados de imunoistoquímica semelhantes quanto ao período de inicio do tratamento. Sendo os escores do Vegf e do KI67 maiores no grupo GVI (GVI > GV > GIV = GIII > GII = GI). Conclusão: Nossos dados mostraram que o tratamento com genisteína imediatamente ou após 30 dias da ooforectomia foram similares em relaçao aos genes da via dos receptores de estrogênio, porém no tratamento imediato observamos haver maior expressão dos receptores alfa. Já o tratamento com estrogênios obtivemos maior ativação gênica da via dos receptores estrogênicos quando administrados tardiamente.pt
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2013 a 2016)
dc.format.extent60 p.
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=134461pt
dc.identifier.citationCARBONEL, Adriana Aparecida Ferraz. Expressão gênica dos receptores de estrogênios, das ciclinas e dos marcadores de proliferação celular pela genisteína no útero de ratas tratadas imediatamente ou 30 dias após ooforectomia. 2013. 60 f. Tese (Doutorado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2013.
dc.identifier.file2013-0001.pdf
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48024
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectuterusen
dc.subjectgenisteinen
dc.subject17 beta - estradiolen
dc.subjectgene expressionen
dc.subjectmiceen
dc.subjectúteropt
dc.subjectgenisteínapt
dc.subjectbeta-estradiolpt
dc.subjectexpressão gênicapt
dc.subjectratospt
dc.titleExpressão gênica dos receptores de estrogênios, das ciclinas e dos marcadores de proliferação celular pela genisteína no útero de ratas tratadas imediatamente ou 30 dias após ooforectomiapt
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt
unifesp.graduateProgramBiologia Estrutural e Funcionalpt
unifesp.knowledgeAreaCiências biológicaspt
unifesp.researchAreaBiologia geralpt
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