Efeito da violaceína sobre a síntese de proteoglicanos nas linhagens celulares de câncer colorretal caco-2 e hct116
Data
2013-09-25
Autores
Moyses, Grace Richter 
Orientadores
Justo, Giselle Zenker Justo
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
O câncer colorretal (CCR) é o tipo de câncer que engloba tumores tanto do cólon quanto do reto, podendo afetar homens e mulheres. Na tumorigênese ocorrem alterações no microambiente tumoral, incluindo alterações em glicosaminoglicanos (GAG) que acarretam na modulação da função de proteoglicanos (PG). Os sindecans, PG de superfície celular, interagem com muitos ligantes, regulando diferenciação, proliferação, migração e adesão celular. A violaceína é um derivado indólico purificado da Chromobacterium violaceum, conhecida por apresentar atividade antitumoral em células de CCR quimiorresistentes. Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da violaceína sobre o perfil de GAG em células de CCR, linhagens Caco-2 e HCT 116, bem como sobre a expressão gênica de sindecans. Além disso, alguns processos celulares como migração, adesão e proliferação também foram avaliados. Os resultados confirmaram a atividade citotóxica da violaceína sobre as células estudadas, com valores de IC50 na faixa entre 1,0 M e 2,0 M. PG foram metabolicamente marcados com [35S]-sulfato após o tratamento com violaceína e GAG foram identificados pela digestão com enzimas específicas. Condroitim sulfato (CS) foi verificado com mais abundância no meio condicionado e o heparam sulfato (HS) na fração celular em ambas as linhagens celulares. Após o tratamento, os resultados demonstraram uma redução significativa de 20% na concentração de HS na fração celular de Caco-2, em relação ao controle. Nas células HCT 116 houve um aumento de aproximadamente 50% tanto de CS quanto de HS após o tratamento. A avaliação da expressão gênica por qPCR revelou um aumento na expressão de sindecam-4 (SDC4) em ambas as linhagens após o tratamento, podendo estar relacionado à inibição da migração celular em torno de 15-20%. Um aumento nos níveis de SDC2 também foi observado em células HCT 116, enquanto que uma redução ocorreu nas células Caco-2. No entanto, o contrário foi obtido para a expressão de SDC1, ou seja, um aumento nas células Caco-2 e redução nas células HCT 116. Esta diminuição corrobora com a redução observada na ligação do fator de crescimento de fibroblasto (FGF) à superfície das células HCT 116. Além disso, foi verificada diminuição de HS em células Caco-2 após o tratamento, a qual estaria relacionada à inibição da adesão
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Citação
MOYSES, Grace Richter. Efeito da violaceína sobre a síntese de proteoglicanos nas linhagens celulares de câncer colorretal caco-2 e hct116. 2013. Dissertação (Mestrado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2013.