Avaliação da permeabilidade da papaína em formulações orais para tratamento de patologias intestinais utilizando tripla co-cultura de células Caco-2, HT29-MTX e Raji como modelo in vitro

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dc.audience.educationlevelMestrado
dc.contributor.advisorLopes, Patricia Santos [UNIFESP]
dc.contributor.advisor-coAndréo Filho, Newton [UNIFESP]pt_BR
dc.contributor.authorCorazza, Fulvio Gabriel [UNIFESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)pt
dc.date.accessioned2020-03-25T12:10:28Z
dc.date.available2020-03-25T12:10:28Z
dc.date.issued2018-06-18
dc.description.abstractPapain is a phytoenzyme used in therapy for the treatment of wounds due to its proteolytic debridant activity capable of stimulating healing. Besides that, this enzyme can also be used as pharmaceutical actives permeation enhancer. The objective of the present study was to evaluate in vitro the cytotoxicity, phototoxicity, genotoxicity and capacity of samples containing free and complex papain with β-cyclodextrin and 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin and minitablets containing free papain in promoting the maintenance of furosemide through the Caco-2 cell monolayer and the triple co-culture of Caco-2, HT29-MTX and Raji cells. IC50 (μM) of papain on BALB/c 3T3 cells, CHO-K1, Caco-2, HuTu 80, HT-29, HT29-MTX, Raji. Hep G2 and human fibroblasts was 3.8; 4.9; 1.4; 0.4; 4,5; 2,3; 2.6 and 1.6, respectively. The IC50 (μM) of papain complexed with β-cyclodextrin on the same cell lines was 3.7; 3.5; 1.4; 2.8; 5.3; 1.9; 3.0; 1.8, respectively. The IC50 (μM) of papain complexed with 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin on the same cell lines was 4, 2; 2.5; 1,3; 3.3; 5.1; 1.8; 2.9; 1.5, respectively. Papain formulations did not show cytotoxicity on Raji cells and were unable to promote LDH release. In the phototoxicity evaluation, papain and its cyclodextrin complex were considered nonphototoxic at concentrations lower than 0.67 μM. In the genotoxicity assessment, the samples also did not promote genotoxicity on CHO-K1 and Hep G2 cells at the concentrations evaluated. Using the Caco-2 cell monolayer model, the Papp of furosemide was 2.8 x 10-6 cm.s1 and 7.0 x 10-6 cm.s-1 in the presence of the formulations of papain complexed with cyclodextrins. Meproprolol showed Papp of 24 x 10-6 cm.s-1 . rhodamine 123 (ROD123) efflux ratio was 0.2 and the Lucifer Yellow (LY) Papp was 4.3 x 10-7 cm.s-1 , indicating the presence of P-gp and paracellular integrity. Using the triple co-culture monolayer model, Papp of furosemide was 0.6 x 10-6 cm.s-1 and on average 0.8 x 10-6 cm.s-1 in the presence of formulations of papain complexed with cyclodextrins. Meproprolol presented Papp of 7.1 x 10-6 cm.s-1 . The ROD123 efflux ratio was 0.1 and the LY Papp was 3.8 x 10-7 cm.s-1 , indicating the presence of P-gp and maintaining the paracellular integrity of the cell monolayer. The results presented suggest that papain formulations complexed with cyclodextrins could be employed not only as therapeutic agents in the treatment of colonic pathologies but also as therapeutic adjuvants foccus in promoting permeation of drugs which have low oral permeability.en
dc.description.abstractA papaína é uma fitoenzima utilizada na terapêutica para o tratamento de feridas devido a sua atividade proteolítica debridante capaz de estimular a cicatrização. Além disso, essa enzima também pode ser empregada como promotora de permeação de diversos compostos ativos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar in vitro a citotoxicidade, a fototoxicidade, a genotoxidade e a capacidade das amostras contendo papaína livre e complexada com βciclodextrina e 2-hidroxipropil-β-ciclodextrina e minicomprimidos de papaína livre em promover a permação da furosemida através da monocamada de células Caco-2 e da tripla co-cultura de células Caco-2, HT29-MTX e Raji. A IC50 (µM) da papaína livre sobre as células BALB/c 3T3, CHO-K1, Caco-2, HuTu 80, HT-29, HT29-MTX, Raji. Hep G2 e fibroblastos humanos foi de 3,8; 4,9; 1,4; 0,4; 4,5; 2,3; 2,6 e 1,6, respectivamente. A IC50 (µM) da papaína complexada β-ciclodextrina sobre as células BALB/c 3T3, CHO-K1, Caco-2, HuTu 80, HT-29, HT29-MTX, Hep G2 e fibroblastos humanos foi de 3,7; 3,5; 1,4; 2,8; 5,3; 1,9; 3,0; 1,8, respectivamente. A IC50 (µM) da papaína complexada 2-hidroxipropil-β-ciclodextrina sobre as células BALB/c 3T3, CHO-K1, Caco-2, HuTu 80, HT-29, HT29-MTX, Hep G2 e fibroblastos humanos foi de 4,2; 2,5; 1,3; 3,3; 5,1; 1,8; 2,9; 1,5, respectivamente. As formulações de papaína não apresentaram citototoxicidade sobre as células de suspensão Raji e não foram capazes de promover a liberação de LDH. Na avaliação da fototoxicidade, as formulações contendo papaína foram consideradas não fototóxicas em concentrações inferiores a 0,67 µM. Na avaliação da genotoxicidade, as amostras também não apresentaram genotoxicidade sobre as células CHO-K1 e Hep G2 nas concentrações avaliadas. Empregando-se o modelo de monocamada de células Caco-2, a Papp da furosemida foi de 2,8 x 10-6 cm.s-1 e de 7,0 x 10-6 cm.s-1 na presença das formulações de papaína complexada com ciclodextrinas. O metoprolol apresentou Papp de 24 x 10-6 cm.s-1 . O efluxo da rodamina 123 (ROD123) foi de 0,2 e a Papp do Lucifer Yellow (LY) foi de 4,3 x 10-7 cm.s-1 , indicando a presença de P-gp e a manutenção da integridade paracelular da monocamada de células Caco-2. Empregando-se o modelo de monocamada de tripla co-cultura, a Papp da furosemida foi de 0,6 x 10-6 cm.s-1 e em média de 0,8 x 10-6 cm.s-1 na presença das formulações de papaína complexada com ciclodextrinas. O metoprolol apresentou Papp de 7,1 x 10-6 cm.s-1 . O efluxo da ROD123 foi de 0,1 e a Papp do LY foi de 3,8 x 10-7 cm.s-1 , indicando a presença de P-gp e a manutenção da integridade paracelular da monocamada de células. Os resultados apresentados sugerem que as formulações de papaína complexada com ciclodextrinas poderiam ser empregadas não somente como agentes terapêuticos no tratamento de patologicas colônicas mas também como adjuvantes terapêuticos na promoção de permeação de fármacos que apresentam baixa permeabilidade oral.pt
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2018)
dc.description.sponsorshipFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)pt_BR
dc.description.sponsorshipIDFAPESP: 2015/19213-0pt_BR
dc.description.sponsorshipIDFAPESP: 2015/19212-3pt_BR
dc.format.extent118 p.
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6376518pt
dc.identifier.file2018-0691.pdf
dc.identifier.urihttps://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52748
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.subjectPermeationen
dc.subjectPapainen
dc.subjectFurosemiden
dc.subjectCyclodextrinsen
dc.subjectPermeaçãopt
dc.subjectPapaínapt
dc.subjectFurosemidapt
dc.subjectCiclodextrinaspt
dc.subjectLiberação controladapt
dc.titleAvaliação da permeabilidade da papaína em formulações orais para tratamento de patologias intestinais utilizando tripla co-cultura de células Caco-2, HT29-MTX e Raji como modelo in vitropt
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusInstituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticaspt
unifesp.graduateProgramCiências Farmacêuticaspt
unifesp.knowledgeAreaBiociências, Saúde e Tecnologiapt
unifesp.researchAreaAvaliação Biológica, Farmacológica e Toxicológicapt
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