Caracterizacao de antigenos especificos de Leishmania (Viannia) braziliensis reconhecidos por anticorpos monoclonais

Data
2000
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
Foram produzidos anticorpos monoclonais que reconhecem promastigotas de L. (V.) braziliensis, denominados SST-1, SST-2, SST-3 e SST-4. Estes MoAbs foram analisados juntamente com os MoAbs ST-3, ST-4 e ST-5 (STRAUS et ai., 1993) quanto a reatividade com L. (V.) braziliensis, por tecnicas de, radioimunoensaio em fase solida, imunofluorescencia indireta e Western blotting imunocoloracao de HPTLC. Em L. (V.) braziliensis os MoAbs SST-1, ST-3 e ST-5 reconhecem glicolipideos. Por imunofluorescencia indireta verificou-se que os antigenos reconhecidos estao localizados na superficie do promastigota, e por imunoeletromicroscopia observa-se marcacao de superficie em forma de patches. O MoAb SST-1 reconhece glicolipideos de promastigotas de L. (V.) braziliensis (serodemas l a 7), L. (V.) naiffi e L. (V.) guyanensis. Nao foram detectados glicolipideos reconhecidos pelo MoAb SST-1 em amastigotas de L. (V.) braziiiensis, em promastigotas de L. (V.) panamensis e L. (V.) lainsoni, em amastigotas e promastigotas de L. (L.) amazonensis, L. (L.) major e L. (L.) chagasi e epimastigotas de T. cruzi. Os MoAbs ST-3 e ST-5 sao tambem reativos com formas promastigotas de L. (V.) braziliensis, reconhecendo componentes glicolipidicos distintos daqueles reconhecidos pelo MoAb SST-1. A importancia dos epitopos reconhecidos pelos MoAbs SST-1, ST-3 e ST-5 para a infectividade do parasita foi analisada em cultura de macrofagos infectados com promastigotas de L. (V.) braziliensis. Somente os fragmentos Fab dos MoAbs ST-3 e ST-5 inibiram significativamente a infeccao dos macrofagos, corroborando a importancia dos epitopos Galb1-3Gal na interacao parasita-macrofago. Por outro lado, o epitopo reconhecido pelo MoAb SST-1 parece nao estar envolvido nesta interacao. O MoAb SST-2 reconhece um doublet de 24-28kDa e um componente de 72kDa, cujo epitopo e conformacional. Verificou-se alta marcacao por imunofluorescencia e por imunoeletromicroscopia de toda superficie do parasita O MoAb SST-3 reconhece um triplet de natureza glicoproteica, de 160, 170 e 180 kDa cuja reatividade e abolida por tratamento com m-periodato, indicando que o epitopo e carboidrato. Por imunofluorescencia e imunoeletromicroscopia observa-se marcacao restrita a membrana do flagelo do parasita...(au)
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São Paulo: [s.n.], 2000. 166 p. ilustab.
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