Galleria mellonella como modelo invertebrado hospedeiro de infecção para estudo do complexo Candida guilliermondii: análise de virulência

dc.audience.educationlevelMestrado
dc.contributor.advisorColombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]
dc.contributor.advisor-coSouza, Ana Carolina Remondi [UNIFESP]
dc.contributor.advisor-coLatteshttp://lattes.cnpq.br/7120403222585386
dc.contributor.advisorLatteshttp://lattes.cnpq.br/4512261018429681
dc.contributor.authorLuiz, Rita Angelica [UNIFESP]
dc.contributor.authorLatteshttp://lattes.cnpq.br/5192568581590914
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)pt_BR
dc.coverage.spatialSão Paulopt_BR
dc.date.accessioned2020-03-25T11:44:01Z
dc.date.available2020-03-25T11:44:01Z
dc.date.issued2018-11-28
dc.description.abstractThe genus Candida is responsible for most of fungal infections in the hospital environment. Although C. albicans remains the most prevalent species in candidemia, there is an increase in infections by non-Candida albicans species, and among them, there are some species caused by the C. guilliermondii complex. Although the pathogenic potential of C. guilliermondii has already been demonstrated, there are few studies in the literature evaluating the mechanisms of virulence involved during the development of the infection by this complex. OBJECTIVES: To evaluate putative differences in the virulence of isolates representative of the two clinical relevance species belonging to the C. guilliermondii complex (C. guilliermondii sensu stricto and C. fermentati) through analysis of biofilm formation and survival curve in the Galleria mellonella infection model. MATERIALS AND METHODS: A total of 61 isolates of the C. guilliermondii complex obtained from blood cultures of patients with documented fungus in Latin American hospitals from 2008-2016 were selected from the Bank of Microorganisms of Laboratório (LEMI), at the Federal University of São Paulo (UNIFESP). Isolates from this complex were previously identified by Molecular Sequencing method using the ITS region. The biofilm formation assays were performed on a microtiter plate and quantified by staining with crystal violet. Infection in the G. mellonella model was performed using inoculum of six representative isolates of each C. guilliermondii complex species, and the survival curve of the invertebrates was evaluated. RESULTS: Among the 61 isolates of the C. guilliermondii complex, 39 were identified and confirmed as C. guilliermondii (sensu stricto) and 22 as C. fermentati. Regarding biofilm formation by C. guilliermondii (sensu stricto) isolates, 12 (30.8%) were classified as low formers, 20 (51.3%) intermediate and seven (17.9%) as high biofilm formers. For C. fermentati, 4 isolates (16.7%) presented low biofilm formation, 12 (50%) and 8 isolates (33.3%) presented intermediate and high capacity, respectively. In a model of infection using G. mellonella, it was observed that both species were able to trigger an infectious process in the invertebrate host, and no relationship between mortality curve of the animals and the greater or lesser biofilm production by the tested isolates was documented. CONCLUSIONS: The present work demonstrated that species of C. fermentati and C. guilliermondii sensu stricto present similar characteristics of pathogenicity, at least in relation to biofilm production and death curve in invertebrate models.en
dc.description.abstractO gênero Candida é responsável pela maior parte das infecções fúngicas no ambiente hospitalar. Embora C. albicans continue a ser a espécie mais isolada em candidemia, há um aumento das infecções por espécies de Candida não-C. albicans, entre estas, àquelas causadas pelo complexo C. guilliermondii. Muito embora o potencial patogênico de C. guilliermondii já tenha sido demonstrado, há na literatura poucos estudos que tenham avaliado os mecanismos de virulência envolvidos durante o desenvolvimento da infecção por este complexo. OBJETIVOS: Avaliar putativas diferenças na virulência de isolados representativos das 2 espécies de relevância clínica pertencentes ao complexo C. guilliermondii (C. guilliermondii sensu stricto e C. fermentati) através da análise de formação de biofilme e curva de sobrevivência em modelo de infecção em Galleria mellonella. MATERIAL E MÉTODOS: Selecionou-se um total de 61 isolados do complexo C. guilliermondii obtidos de hemoculturas de pacientes com fungemia documentada em hospitais da América Latina no período de 2008-2016, cujas amostras estavam armazenadas no Banco de Microrganismos do Laboratório Especial de Micologia (LEMI), na Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Os isolados deste complexo foram previamente identificados por técnica de sequenciamento da região ITS do rDNA. Os ensaios de formação de biofilme foram realizados em placa de microtitulação e quantificados por coloração com cristal violeta. Infecção no modelo G. mellonella foi realizada utilizando-se inóculo de seis isolados representativos de cada espécie do complexo C. guilliermondii, sendo avaliada curva de sobrevivência dos invertebrados. RESULTADOS: Dentre os 61 isolados do complexo C. guilliermondii, 39 foram identificados e confirmados como C. guilliermondii (sensu stricto) e 22 como C. fermentati. Quanto à formação de biofilme pelos isolados de C. guilliermondii (sensu stricto), 12 (30,8%) foram classificados como baixo formadores, 20 (51,3%) intermediário e sete (17,9%) como alto formadores de biofilme. Já para C. fermentati, 4 isolados (16,7%) apresentaram baixa formação de biofilme, 12 (50%) e 8 isolados (33,3%) apresentaram capacidade intermediária e alta, respectivamente. Em modelo de infecção com G. mellonella observou-se que ambas as espécies foram capazes de desencadear processo infeccioso no hospedeiro invertebrado, não sendo documentada qualquer relação entre a curva de mortalidade dos animais e a maior ou menor produção de biofilme pelos isolados testados. CONCLUSÕES: O presente trabalho demonstrou que espécies de C. fermentati e C. guilliermondii sensu stricto apresentam características semelhantes de patogenicidade, ao menos em relação à produção de biofilme e à curva de morte em modelos invertebrados.pt_BR
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2018)
dc.description.sponsorshipCoordenação e Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
dc.format.extent70 f.
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6443220pt_BR
dc.identifier.fileDissertação - versão final - Rita Angélica Luiz.pdf
dc.identifier.urihttps://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52537
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.subjectCandida guilliermondii complexen
dc.subjectCandida fermentatien
dc.subjectEpidemiologyen
dc.subjectVirulenceen
dc.subjectInvertebrate modelen
dc.subjectComplexo candida guilliermondiipt_BR
dc.subjectCandida fermentatipt_BR
dc.subjectEpidemiologiapt_BR
dc.subjectVirulênciapt_BR
dc.subjectModelo invertebradopt_BR
dc.titleGalleria mellonella como modelo invertebrado hospedeiro de infecção para estudo do complexo Candida guilliermondii: análise de virulênciapt_BR
dc.title.alternativeGalleria mellonella as an invertebrate infection host model for the study of the Candida guilliermondii complex: virulence analysisen
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicinapt_BR
unifesp.graduateProgramMedicina Translacionalpt_BR
unifesp.knowledgeAreaCiências da Saúdept_BR
unifesp.researchAreaEpidemiologia de Infecções Emergentes e Seus Mecanismos de Resistênciapt_BR
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