Efeito da pentoxifilina e do precondicionamento isquêmico na isquemia e reperfusão intestinal em ratos: estudo morfológico e biomolecular
Data
2016-05-31
Autores
Oliveira, Teresinha Regina Ribeiro de 
Orientadores
Taha, Murched Omar
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
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Título de Volume
Resumo
Objective: To investigate histological, immunohistochemistry and molecular changes in small intestine of rats submitted to ischemia and reperfusion, handled by ischemic preconditioning and pentoxifylline. Methods: It used a sample of 30 Wistar rats EPM- 1, distributed in 5 groups, which used the superior mesenteric artery clamping to the procedures of ischemia and reperfusion. The groups were composed of 6 rats and named: Sham (laparotomy control); Ischemia and reperfusion with 0,9% saline (IRss); ischemia and reperfusion with pentoxifylline (IR_ptx); Ischemic preconditioning and ischemia and reperfusion with 0,9% salina solution (PCI_IR ss); Ischemic preconditioning and ischemia and reperfusion with pentoxifyline (PCI_IRptx). IR group ischemic time was 30 minutes and reperfusion 60 minutos. PCI time was 5 minutes ischemia and 5 minutes reperfusion to 90 minutes followed IR. The Pentoxifylline has been applied at a dose of 80 mg/kg and 0,9% saline solution (0,1 ml /dose), 5 minutes before ischemia of 30 minutes. Preconditioning groups, before the 30 minutes of ischemia, 5 minutes of ischemia and 5 minutes of reperfusion. Pulled out segments of the small intestine to a histological (staining), immunohistochemical and molecular. Were used in statistics, descriptive analysis of the data, analysis of variance (ANOVA) or Kruskall-Wallis test pos hoc ? Bonferroni. Results: Ischemic preconditioning and Pentoxifylline preserved the intestinal villus epithelial cell structure. No difference was observed between the PCI and PCI with Pentoxifylline average score. In Immunohistochemistry the caspase-3 showed more intense reaction to IR with 0,9% saline solution treatment. The Bcl-2 was positive without significant difference among averages. Molecular analysis by RT-qPCR for genes expression eNOS and iNOS was observed: the highest expression of iNOS, was significant in IRss and eNOS in PCI and Pentoxifylline treatment. Conclusions: The treatments with Pentoxifylline and PCI have been effective in preserving the small bowel cells submitted to ischemia and reperfusion. When associated strategics, there was no synergism.
Objetivo. Investigar as evidências histológicas, imuno-histoquímicas e moleculares em intestino delgado de ratos submetidos à isquemia e reperfusão, tratados pelo precondicionamento isquêmico e com pentoxifilina. Métodos: Foi utilizada uma amostra de 30 ratos EPM-1 Wistar distribuídos em 5 grupos, dos quais utilizou-se o clampeamento da artéria mesentérica superior para os procedimentos de isquemia e reperfusão. Os grupos foram composto por 6 ratos denominados: Simulado (controle laparotomia); Isquemia e reperfusão (IR) com solução salina 0,9% (ss); isquemia e reperfusão com pentoxifilina (IRptx); precondicionamento isquêmico (PCI) e isquemia e reperfusão com solução salina (PCI_IRss) e precondicionamento isquêmico com isquemia e reperfusão e pentoxifilina (PCI_IRptx). Nos grupos IR promoveu-se isquemia de 30 minutos e reperfusão de 60 minutos. O tempo utilizado na PCI_IR, foi 5 minutos de isquemia e 5 minutos de reperfusão com IR de 90 minutos. A pentoxifilina foi aplicada na dose de 80 mg/kg e a solução salina 0,9% (0,1mL/dose), 5 minutos antes da isquemia de 30 minutos. Retiraram-se segmentos do intestino delgado para estudo histológico (coloração H.E.), imuno-histoquímico e molecular. Foram utilizados na estatística, análise descritiva dos dados, análise de variância (ANOVA) ou Kruskall-Wallis e teste pos hoc Bonferroni. Resultados: O precondicionamento isquêmico e pentoxifilina preservaram a estrutura celular epitelial das vilosidades intestinais. Não foi observada diferença entre as médias do escore de lesão PCI_IRss e PCI_IR com pentoxifilina. Na imuno-histoquímica a caspase-3 apresentou reação mais intensa para IR com solução salina 0,9%. E a Bcl-2 foi positiva sem diferença significante entre as médias dos procedimentos. Na análise molecular pela RT-PCR em tempo real observou-se: maior expressão estatisticamente significante de iNOS em IRss e de eNOS no tratamento PCI e pentoxifilina. Conclusões: Os tratamentos pentoxifilina e PCI foram eficazes na preservação das células do intestino delgado submetido à isquemia e reperfusão. Quando associadas as estratégias, não houve sinergismo.
Objetivo. Investigar as evidências histológicas, imuno-histoquímicas e moleculares em intestino delgado de ratos submetidos à isquemia e reperfusão, tratados pelo precondicionamento isquêmico e com pentoxifilina. Métodos: Foi utilizada uma amostra de 30 ratos EPM-1 Wistar distribuídos em 5 grupos, dos quais utilizou-se o clampeamento da artéria mesentérica superior para os procedimentos de isquemia e reperfusão. Os grupos foram composto por 6 ratos denominados: Simulado (controle laparotomia); Isquemia e reperfusão (IR) com solução salina 0,9% (ss); isquemia e reperfusão com pentoxifilina (IRptx); precondicionamento isquêmico (PCI) e isquemia e reperfusão com solução salina (PCI_IRss) e precondicionamento isquêmico com isquemia e reperfusão e pentoxifilina (PCI_IRptx). Nos grupos IR promoveu-se isquemia de 30 minutos e reperfusão de 60 minutos. O tempo utilizado na PCI_IR, foi 5 minutos de isquemia e 5 minutos de reperfusão com IR de 90 minutos. A pentoxifilina foi aplicada na dose de 80 mg/kg e a solução salina 0,9% (0,1mL/dose), 5 minutos antes da isquemia de 30 minutos. Retiraram-se segmentos do intestino delgado para estudo histológico (coloração H.E.), imuno-histoquímico e molecular. Foram utilizados na estatística, análise descritiva dos dados, análise de variância (ANOVA) ou Kruskall-Wallis e teste pos hoc Bonferroni. Resultados: O precondicionamento isquêmico e pentoxifilina preservaram a estrutura celular epitelial das vilosidades intestinais. Não foi observada diferença entre as médias do escore de lesão PCI_IRss e PCI_IR com pentoxifilina. Na imuno-histoquímica a caspase-3 apresentou reação mais intensa para IR com solução salina 0,9%. E a Bcl-2 foi positiva sem diferença significante entre as médias dos procedimentos. Na análise molecular pela RT-PCR em tempo real observou-se: maior expressão estatisticamente significante de iNOS em IRss e de eNOS no tratamento PCI e pentoxifilina. Conclusões: Os tratamentos pentoxifilina e PCI foram eficazes na preservação das células do intestino delgado submetido à isquemia e reperfusão. Quando associadas as estratégias, não houve sinergismo.
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Citação
OLIVEIRA, Teresinha Regina Ribeiro de. Efeito da pentoxifilina e do precondicionamento isquêmico na isquemia e reperfusão intestinal em ratos: estudo morfológico e biomolecular. 2016. 64 f. Tese (Doutorado em Medicina Translacional) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2016.