Análisis inmunohistoquímico del fenotipo celular del retinoblastoma utilizando marcadores de células neurales y gliales
Data
2015-03-31
Autores
Alonzo, Maria Eugenia Orellana de 
Orientadores
Burnier Junior, Miguel Noel Nascentes
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
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Resumo
Retinoblastoma is the most common intraocular malignant tumor in childhood yet its origin remains unclear. It has been shown that retinoblastoma cells express both mature and immature retinal markers. An immunohistochemical analysis of the cell origin of this particular tumor may yield valuable insight into disease progression. This study aims to determine the origin of retinoblastoma in a large case series and correlate these findings with histopathological prognostic factors. Methods: Thirty nine retinoblastoma cases were histopathologicaly diagnosed and further analyzed by immunohistochemistry using monoclonal antibodies against immature retinal cell marker (SOX-2: SRY-box containing gene 2), mature retinal cell marker (MAP2: microtubule-associated protein 2), and glial cell marker (GFAP: glial fibrillary acidic protein). Histopathological features, including pattern of growth, differentiation, vitreous seeding, choroidal/scleral, optic nerve, and anterior chamber invasion, were evaluated. Two retinoblastoma cell lines were studied using immunocytochemistry staining, with the same markers. Results: Expression of SOX-2 was strong in 97.4% of retinoblastoma cases, while MAP-2 was expressed in 59% of cases. Immunostaining for GFAP was consistent across all cases; positive exclusively in reactive stromal astrocytes interspersed amongst tumor cells. There was no correlation between histopathological prognostic factors and the immunohistochemical markers. Retinoblastoma cell lines showed strong positivity for SOX2 (WERI-1cells 90% and in 70% of Y79 cells). MAP2 was positive in WERI-1 cells and Y79 cells (90%). GFAP was completely negative in both cell lines. Conclusion: These results suggest that the majority of retinoblastomas and the RB cell lines expressed immature rather than mature retinal cell markers. Therefore, these results indicate a neural origin of this particular tumor. In addition, the absence of GFAP positivity in tumor cells further suggests a retinal cell origin of retinoblastoma.
Retinoblastoma é o tumor maligno intra-ocular mais comum na infância. Este estudo visa determinar a origem do retinoblastoma em um número de casos e correlacionar essos achados com fatores prognósticos e histopatológicos conhecidos. Métodos: Trinta e nove casos de retinoblastoma foram diagnosticados e analisados com imunohistoquímica usando marcadores de anticorpos monoclonais contra as células de retina imaturas (SOX-2: SRY-box containing gene 2), contra as células da retina maturas (MAP2: microtubule-associated protein 2) e contra as células gliais maturas (GFAP: glial fibrillar acidic protein). Foram avaliadas características microscópicas dos casos (grau de diferenciação, presença de semeadura vítrea, invasão de coróide / esclera, nervo óptico e câmara anterior). Duas linhas celulares de retinoblastoma (WERI-1 e Y79) também foram testadas, utilizando os três marcadores. Resultados: A expressão de SOX-2 foi positiva em 97,4% dos casos de retinoblastoma, enquanto MAP2 foi positivo em 59% dos casos. GFAP foi apenas positivo no estroma (astrócitos reativos). Não houve correlação entre preditores histopatológicos e marcadores imunohistoquímicos avaliados. As linhagens celulares mostraram positividade para SOX-2 (90% em WERI-1 e 70% das células Y79). Ambas as linhagens celulares se mostraram fortemente positivas con MAP2 (90%), enquanto não houve expressão de GFAP em nenhuma das linhas celulares estudadas. Conclusões: A maioria das células de retinoblastoma desta série de casos expressa marcadores de células retinianas imaturas, além de marcadores de células maduras. As linhas celulares Y79 e WERI-1 apresentaram imunomarcação para ambos os marcadores neurais em percentagens semelhantes a dos casos avaliados. Desta manera, estes resultados confirmam a origem neural do tumor em particular. Alem disso, a ausência de células positivas para GFAP no tumor descarta diferenciação de astrócitos em retinoblastoma.
Retinoblastoma é o tumor maligno intra-ocular mais comum na infância. Este estudo visa determinar a origem do retinoblastoma em um número de casos e correlacionar essos achados com fatores prognósticos e histopatológicos conhecidos. Métodos: Trinta e nove casos de retinoblastoma foram diagnosticados e analisados com imunohistoquímica usando marcadores de anticorpos monoclonais contra as células de retina imaturas (SOX-2: SRY-box containing gene 2), contra as células da retina maturas (MAP2: microtubule-associated protein 2) e contra as células gliais maturas (GFAP: glial fibrillar acidic protein). Foram avaliadas características microscópicas dos casos (grau de diferenciação, presença de semeadura vítrea, invasão de coróide / esclera, nervo óptico e câmara anterior). Duas linhas celulares de retinoblastoma (WERI-1 e Y79) também foram testadas, utilizando os três marcadores. Resultados: A expressão de SOX-2 foi positiva em 97,4% dos casos de retinoblastoma, enquanto MAP2 foi positivo em 59% dos casos. GFAP foi apenas positivo no estroma (astrócitos reativos). Não houve correlação entre preditores histopatológicos e marcadores imunohistoquímicos avaliados. As linhagens celulares mostraram positividade para SOX-2 (90% em WERI-1 e 70% das células Y79). Ambas as linhagens celulares se mostraram fortemente positivas con MAP2 (90%), enquanto não houve expressão de GFAP em nenhuma das linhas celulares estudadas. Conclusões: A maioria das células de retinoblastoma desta série de casos expressa marcadores de células retinianas imaturas, além de marcadores de células maduras. As linhas celulares Y79 e WERI-1 apresentaram imunomarcação para ambos os marcadores neurais em percentagens semelhantes a dos casos avaliados. Desta manera, estes resultados confirmam a origem neural do tumor em particular. Alem disso, a ausência de células positivas para GFAP no tumor descarta diferenciação de astrócitos em retinoblastoma.
Descrição
Citação
ALONZO, Maria Eugenia Orellana de. Análisis inmunohistoquímico del fenotipo celular del retinoblastoma utilizando marcadores de células neurales y gliales. 2015. 122 f. Tese (Doutorado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2015.