Morfogênese epididimária: relevância funcional de androgênios e glicocorticoides

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dc.audience.educationlevelMestrado
dc.contributor.advisorWinston, Maria Christina Werneck De Avellar [UNIFESP]
dc.contributor.authorSousa, Maria Eleticia De [UNIFESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulopt
dc.date.accessioned2022-07-21T15:48:28Z
dc.date.available2022-07-21T15:48:28Z
dc.date.issued2020-07-30
dc.description.abstractThe epididymis is a single and convoluted tubule, which connects the efferent ductules to the vas deferens. It is an important organ for sperm maturation, transport, storage, and their protection before ejaculation. The epididymal morphogenesis, that occurs from the mesonephric duct (its embryonic precursor), is primarily dependent on androgens by mechanisms that are not well defined yet. Recently, our research group has identified a differential expression pattern of glucocorticoids receptors (GR) on epithelial and mesenchymal cells of the developing rat mesonephric duct. The biological role of GR/glucocorticoid signaling, as well as its potential interaction with androgens during pre- and post-natal development of the epididymis is not well established yet. In the present study, we used a preclinical model of dexamethasone (synthetic glucocorticoid) antenatal treatment in rat dams (Wistar) as a tool to help to elucidate the role and function of glucocorticoids during the mesonephric duct development, with a focus on epididymal morphogenesis. Initially, we tested the daily DEX (1 mg/kg, s.c.) treament of dams during the gestational period that, in the rat, correlates with epididymal morphogenesis (e17.5-e19.5; group DEX-LW versus control, SAL-LW; euthanasia at e20.5). The specific aims, using this preclinical model, were: a) to evaluate the effects of the DEX antenatal treatment on (i) biometric and hormonal parameters in the dams, and (ii) biometric and hormonal parameters in the male fetuses, b) to characterize the effects of the DEX antenatal treatment on histomorphological parameters and cellular proliferation rate of the mesonephric duct of the male offsprings, c) to characterize the effects of the DEX antenatal treatment in the immunodistribution of AR and GR in the mesonephric duct of the male offsprings, d) to characterize the effect of the DEX antenatal treatments in the transcriptional levels of a subset of genes that are target of GR and AR regulation. Based on the results obtained, we subsequently conducted studies by exposing rat dams to daily DEX treatment during the gestacional period that involves masculinization and differntation windows (e13.5-e19.5; DEX-FL versus control SAL-FL; euthanasia at e20.5). Our readouts were: biometrical parameters (dams and fetuses), hormonal dosage (corticosterone and testosterone; dams and fetuses), histopathology, immunofluorescence studies and quantification of gene expression by RT-qPCR on isolated mesonephric duct. Althogether the results confirmed the hypothesis that glucocorticoids play a role in morphogenetic events of the mesonephric duct, including epididymal morphogenesis; also, the data contributed to the better understanding that changes in maternal plasma concentration of glucocorticoids impact the expression and function profile of GR and AR in the duct. From a translational point of view, the present study corroborates to a better understand of how corticotherapy or changes in the endougenous glucocorticoids profile during gestational period may influence reproductive health of male offsprings. (Research Ethics Committee, CEUA/UNIFESP, #8759031215).en
dc.description.abstractO epidídimo é um túbulo único e altamente enovelado, que conecta os dúctulos eferentes ao ducto deferente. É responsável pela maturação, transporte, estocagem e proteção de espermatozoides, anteriormente à ejaculação. A morfogênese desse tecido, a partir do ducto mesonéfrico (precursor embrionário, também chamado de ducto de Wolff), ocorre primariamente pela ação dos androgênios e seus receptores (AR), por mecanismos ainda não totalmente esclarecidos. Recentemente, nosso grupo de pesquisa identificou a expressão de receptores de glicocorticoides (GR) que ocorre, de forma diferencial, no epitélio e mesênquima durante o desenvolvimento do ducto mesonéfrico de ratos. O papel biológico da sinalização e função do GR e dos glicocorticoides, assim como a potencial colaboração com androgênios durante o desenvolvimento pré- e pós-natal do epidídimo, no entanto, ainda é desconhecido. No presente trabalho, utilizamos um modelo pré-clínico de tratamento antenatal com dexametasona (glicocorticoide sintético) em ratas prenhes (Wistar) como ferramenta para melhor dissecar o papel e potencial função de glicocorticoides no desenvolvimento do ducto mesonéfrico, com enfoque na morfogênese epididimária. Inicialmente, nós testamos o tratamento diário de fêmeas prenhes com DEX (1 mg/kg, s.c.) no período gestacional que, no rato, corresponde a janela de morfogênese epididimária (e17,5 a e19,5; grupo DEX-LW versus controle, SAL-LW; eutanásia em e20,5). Foram objetivos específicos: a) avaliar os efeitos do tratamento antenatal com DEX (i) no perfil biométrico e hormonal materno e (ii) no perfil biométrico e hormonal da prole de fetos machos, b) caracterizar os efeitos do tratamento antenal com DEX em parâmetros histomorfológicos e proliferação celular dos ductos mesonéfricos dos fetos machos, c) caracterizar os efeitos do tratamento antenal com DEX na imunodistribuição do receptor de androgênios (AR) e glicocorticoides (GR) dos ductos mesonéfricos da prole de fetos machos, d) caracterizar os efeitos do tratamento antenal com DEX nos níveis de transcrição de um conjunto de genes que são conhecidos alvos de regulação androgênia e por glicocorticoides. Baseados nos resultados obtidos, nós testamos também o tratamento diário de fêmeas prenhes com DEX (0,1 mg/kg, s.c.) no período gestacional que, no rato, engloba as janelas de masculinização e diferenciação (e13,5-e19,5; DEX-FL versus controle SAL-FL; eutanásia em e20,5). Foram realizadas análises biométricas (mães e fetos), hormonais (corticosterona e testosterona; mães e fetos), histopatologia, ensaios de imunofluorescência e quantificação da expressão gênica por RT-qPCR em ductos mesonéfricos isolados. Os resultados em conjunto confirmaram a hipótese de que glicocorticoides possuem um papel em eventos morfogenéticos do ducto mesonéfrico, incluindo a morfogênese epididimária e que, desequilíbrios na concentração plasmática materna deste hormônio esteroidal no período gestacional alteram o perfil de expressão e função do GR e AR no ducto. Do ponto de vista translacional, o estudo corrobora para o melhor entendimento de como a corticoterapia ou mudanças no perfil endógeno desses hormônios (ex. em condições de estresse materno) no período gestacional pode influenciar a saúde reprodutiva da prole masculina. (Comitê de Ética em Pesquisa, CEUA/UNIFESP, #8759031215).pt
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2020)
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=9774234
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/11600/64126
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectMesonephric Ducten
dc.subjectEpididymal Morphogenesisen
dc.subjectAndrogens, Glucocorticoidsen
dc.subjectPrenatal Developmenten
dc.subjectDucto Mesonéfricopt
dc.subjectMorfogêneses Epididimáriapt
dc.subjectAndrogêniospt
dc.subjectGlicocorticóidespt
dc.subjectDesenvolvimento Pré-Natalpt
dc.titleMorfogênese epididimária: relevância funcional de androgênios e glicocorticoidespt
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt
unifesp.graduateProgramFarmacologiapt
unifesp.knowledgeAreaFisiologia E Farmacologiapt
unifesp.researchAreaFarmacologia E Fisiologia Celular E Molecularpt
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