Efeitos da melatonina na expressão gênica ovariana em ratas submetidas à pinealectomia
Data
2011
Autores
Maganhin, Carla Cristina 
Orientadores
Soares Júnior, José Maria
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Objetivo: Este estudo pretende identificar os genes alvo da melatonina no tecido ovariano de ratas adultas pinealectomizadas. Material e Métodos: Foram estudadas 32 ratas (Rattus norvegicus albinus), adultas virgens, procedentes do Biotério da UNIFESP – EPM. Após confirmação da ciclicidade estral, os animais foram divididos em dois grupos: GI- pinealectomizado recebeu veículo; GII - pinealectomizado com reposição de melatonina (10 μg/noite/rato), durante 60 dias consecutivos. Ao final da ministração, todos os animais foram anestesiados e os ovários coletados foram colocados imediatamente em nitrogênio líquido por meia hora e em seguida congelado a - 80°C para análise das amostras por cDNA “microarray”. Para a determinação da expressão dos diferentes genes, foi utilizado o Kit GeneChip® Rat Genome 230 2.0 Array da Affymetrix, de acordo com as especificações do fornecedor, repetindo-se o experimento três vezes para cada grupo. Os dados obtidos foram normalizados e submetidos ao programa GeneChip® Operating Software. Posteriormente, confirmados pelo software de análise secundária do DNA-Chip Analyzer (dChip). Foram considerados como significantes quando estava 1,5x aumentados (hiperexpressos) ou diminuídos (hipoexpressos) em relação ao veículo. Além disso, foram escolhidos genes relacionados com a função ovariana que foram confirmados pela técnica de RT-PCR. Resultados: Nossos dados mostraram que GII (tratado com melatonina) teve 101 genes hiperexpressos e 72 hipoexpressos em comparação ao GI (recebeu melatonina). Em relação à esteroidogênese e de significância estatística, os genes hiperexpressos: inibina beta-A (INHBA), folistatina (FST), Abl-Interactor 1 e, hipoexpressos: Sintetase da prostaglandina D2 (Brain), LIM Homeobox 9, Glutathiona S-Transferase Mu 3. No RT-PCR, confirmamos os resultados da inibina e da folistatina que estão relacionados com a função ovariana. Conclusão: Nossos dados sugerem que melatonina poderia interferir na expressão gênica nos ovários de ratas pinealectomizadas, principalmente na hiperexpressão da inibina e da folistatina.
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2011. 191 p.