Propriedades hidrolíticas da cisteíno peptidase 3C de picornavírus

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dc.contributor.advisorJuliano Neto, Luiz [UNIFESP]
dc.contributor.authorGouvea, Iuri Estrada [UNIFESP]
dc.date.accessioned2015-12-06T23:05:25Z
dc.date.available2015-12-06T23:05:25Z
dc.date.issued2005
dc.description.abstractOs picomavírus traduzem seu genoma RNA+ em uma única poliproteína que necessita de processamento proteolítico para produzir partículas virais viáveis. A peptidase 3C é a principal responsável por estas clivagens, constituindo alvo promissor ao desenvolvimento de compostos antivirais contra importantes patógenos (poliovírus, vírus da hepatite A (HAV), vírus da febre aftosa (FMDV) e rhinovírus (HRV-14)). A Picornaína-3C é uma cisteíno-peptidase, porém apresenta uma estrutura tridimensional semelhante a quimotripsina. Descrevemos o efeito de sais cosmotrópicos na atividade catalítica da Picornaína-3C de poliovírus (PV-3C) e notamos uma ativação de até 100 vezes na hidrólise de peptídeos com supressão intramolecular de fluorescência na presença de 1 M de citrato de sódio. Esta ativação é anion dependente, segue a série de Hofmeister (citrato3- > S042- > HP04 2- > acetato - > HC03- > CI- > Br > I-) e não parece depender da seqüência do substrato. A ativação resulta do aumento no kcat e não de alterações no Km e o sal alterou o pKal da enzima em 1 unidade. Utilizando a sonda ANS, mostramos uma alteração na exposição de sítios hidrofóbicos da proteína na presença de sal. Esta alteração na conformação da enzima é corroborada pelo estudo termodinâmico, que indica um sítio ativo mais organizado na presença de 1 M de citrato de sódio. Em conjunto, nossos dados indicam que o sal cosmotrópico provoca alteração estrutural e com aumento na eficiência catalítica da PV-3C.
dc.description.sourceBV UNIFESP: Teses e dissertações
dc.format.extent70 p.
dc.identifier.citationSão Paulo: [s.n.], 2005. 70 p.
dc.identifier.fileepm-20050419104807GARCIA.pdf
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/20492
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectPeptídeo Hidrolasespt
dc.subjectPicornaviridaept
dc.titlePropriedades hidrolíticas da cisteíno peptidase 3C de picornavíruspt
dc.title.alternativeHydrolitic properties of picornavirus 3C peptidaseen
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt
unifesp.graduateProgramCiências Biológicas (Biologia Molecular)
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PPG - Ciências Biológicas (Biologia Molecular)