Busca de compostos com ação citotóxica em Porcelia macrocarpa R. E. Fries (Annonaceae)
Data
2015-11-09
Autores
Ferreira, Loraine Elizabeth Martins 
Orientadores
Lago, João Henrique Ghilardi
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
This work describes the evaluation of the in vitro cytotoxic activity and bioactivity guided fractionation of the extracts in hexane and CH2Cl2 of Porcelia macrocarpa seeds. In order to do this, extracts in hexane and CH2Cl2 were prepared and submitted to evaluation of the cytotoxic potential against B16F10Nex2 cell line (murine melanoma). As the CH2Cl2 extract displayed activity (cell viability 45±3% to 50 ?g/mL and 34±2% to 25 ?g/mL) it was fractionated on silica gel, resulting in a mixture of two acetylenic acetogenins which were purified using HPLC procedures. Analysis of 1H NMR spectra and 13C, as well as MS allowed the identification of 2-(eicos-11-yn-19-enyl)-3-hydroxy-4-methyl-?-lactone (I) and 2-(eicos-11-ynyl)-3-hydroxy-4-metil-? lactone (II). To establish relationships between the chemical structure / biological activity, the mixture of I and II was completely hydrogenated generating 2-eicosyl-3-hydroxy-4-methyl-?-lactone (III). The cytotoxicity of the compounds I and II was evaluated in vitro against various lineages of cancer cells, including murine (melanoma - B16F10Nex2) and human (breast - SKBR-3; ovary - Ovcar-3; cervix - Siha, colon and rectum - HCT ; Melanoma - A2058). The activity of the mixture of I + II is higher than the potential detected in the pure substances (IC50 values ranging from 21.0±0.3 to 28±1 ?g/mL). The compound I showed moderate potential against HCT and lines OVCAR-3 (IC50 of 83±3 and 81.0±0.1 ?g/mL), whereas compound II showed a reduced potential (IC50> 90 ?g/mL for all cells tested). These results suggest that the presence of a terminal double bond in the side chain could play a relavant role in the cytotoxic activity. Similarly, compound III was inactive (IC50> 100 ?g/mL for all tested cells) indicating that the presence of the triple bond in the side chain is also important to that potential.
O presente trabalho descreve da avaliação a atividade citotóxica in vitro e o fracionamento biomonitorado dos extratos em hexano e em CH2Cl2 das sementes de Porcelia macrocarpa. Para tanto os extratos em hexano e CH2Cl2 das sementes foram preparados e submetidos à avaliação do potencial citotóxico contra linha celular B16F10Nex2 (melanoma murino). Como o extrato de CH2Cl2 apresentou atividade (viabilidade células de 45±3% para 50 ?g/ml e 34±2% para 25 ?g/mL) este foi submetido a fracionamento em gel de sílica obtendo-se uma mistura de duas acetogeninas acetilênicas que foram purificadas utilizando procedimentos de CLAE. A análise dos espectros de RMN de 1H e 13C, bem como EM permitiram a identificação de 2-(eicos-11-in-19-enil)-3-hidroxi-4-metil-??lactona(I) e 2-(eicos-11-inil)-3-hidroxi-4-metil??-lactona(II). Para estabelecer relações preliminares entre a estrutura química/atividade biológica, a mistura de I e II foi completamente hidrogenada gerando 2-eicosil-3-hidroxi-4-metil-?-lactona(III). A citotoxicidade dos compostos I e II foi avaliada in vitro contra várias linhagens de células de câncer, incluindo murino (melanoma - B16F10Nex2) e humano (mama - SKBR-3; ovário - Ovcar-3; cérvix - Siha; cólon e reto - HCT; melanoma - A2058). A atividade da mistura de I + II foi mais elevado do que o potencial detectada nas substâncias puras (valores de CI50 que variam de 21,0±0,3 para 28±1 ?g/ml). O composto I apresentou potencial moderada contra as linhagens HCT e OVCAR-3 (CI50 de 83±3 e 81,0 ±0,1 ?g/ml) enquanto o composto II mostrou um potencial reduzido (CI50>90 ?g/mL para todas as células testadas). Estes resultados sugerem que a presença de uma ligação dupla terminal na cadeia lateral poderia desempenhar um papel relevante na atividade citotóxica. Do mesmo modo, o composto III foi inativo (CI50>100 ?g/mL para todas as células testadas) indicando que a presença da ligação tripla na cadeia lateral também é importante a esse potencial.
O presente trabalho descreve da avaliação a atividade citotóxica in vitro e o fracionamento biomonitorado dos extratos em hexano e em CH2Cl2 das sementes de Porcelia macrocarpa. Para tanto os extratos em hexano e CH2Cl2 das sementes foram preparados e submetidos à avaliação do potencial citotóxico contra linha celular B16F10Nex2 (melanoma murino). Como o extrato de CH2Cl2 apresentou atividade (viabilidade células de 45±3% para 50 ?g/ml e 34±2% para 25 ?g/mL) este foi submetido a fracionamento em gel de sílica obtendo-se uma mistura de duas acetogeninas acetilênicas que foram purificadas utilizando procedimentos de CLAE. A análise dos espectros de RMN de 1H e 13C, bem como EM permitiram a identificação de 2-(eicos-11-in-19-enil)-3-hidroxi-4-metil-??lactona(I) e 2-(eicos-11-inil)-3-hidroxi-4-metil??-lactona(II). Para estabelecer relações preliminares entre a estrutura química/atividade biológica, a mistura de I e II foi completamente hidrogenada gerando 2-eicosil-3-hidroxi-4-metil-?-lactona(III). A citotoxicidade dos compostos I e II foi avaliada in vitro contra várias linhagens de células de câncer, incluindo murino (melanoma - B16F10Nex2) e humano (mama - SKBR-3; ovário - Ovcar-3; cérvix - Siha; cólon e reto - HCT; melanoma - A2058). A atividade da mistura de I + II foi mais elevado do que o potencial detectada nas substâncias puras (valores de CI50 que variam de 21,0±0,3 para 28±1 ?g/ml). O composto I apresentou potencial moderada contra as linhagens HCT e OVCAR-3 (CI50 de 83±3 e 81,0 ±0,1 ?g/ml) enquanto o composto II mostrou um potencial reduzido (CI50>90 ?g/mL para todas as células testadas). Estes resultados sugerem que a presença de uma ligação dupla terminal na cadeia lateral poderia desempenhar um papel relevante na atividade citotóxica. Do mesmo modo, o composto III foi inativo (CI50>100 ?g/mL para todas as células testadas) indicando que a presença da ligação tripla na cadeia lateral também é importante a esse potencial.
Descrição
Citação
FERREIRA, Loraine Elizabeth Martins. Busca de compostos com ação citotóxica em Porcelia macrocarpa R. E. Fries (Annonaceae). 2015. 80 f. Dissertação (Mestrado) - Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Diadema, 2015.