Clonagem, expressão e caracterização de um inibidor de calicreína tecidual do tipo Kunitz presente em intestino de carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus

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dc.contributor.advisorTanaka, Aparecida Sadae [UNIFESP]
dc.contributor.advisorLatteshttp://lattes.cnpq.br/1168789309568199
dc.contributor.authorAbreu, Patricia de Andrade [UNIFESP]
dc.contributor.authorLatteshttp://lattes.cnpq.br/6112145191990528
dc.coverage.spatialSão Paulo
dc.date.accessioned2015-12-06T23:46:23Z
dc.date.available2015-12-06T23:46:23Z
dc.date.issued2013
dc.description.abstractO carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus e um ectoparasito exclusivo de bovinos. No Brasil, e o vetor de agentes causadores da Babesiose, Anaplasmose e Riquetsiose, o que resulta em enormes prejuizos a pecuaria. O controle de R. microplus e feito principalmente pelo uso de acaricidas, no entanto a aquisicao de resistencia assim como a contaminacao dos produtos derivados de bovinos, faz com que a busca por metodos alternativos de controle sejam desenvolvidos. Um grupo de moleculas importantes na fisiologia desse carrapato sao os inibidores de proteases, ja tendo sido descrito inumeros inibidores de proteases da familia tipo Kunitz-BPTI envolvidos em processos como: controle da coagulacao, agregacao plaquetaria do hospedeiro vertebrado, mas tambem na resposta imune do proprio ectoparasito. Neste trabalho clonamos, expressamos e caracterizamos o inibidor de calicreina tecidual do tipo Kunitz, denominado de BmKK91. Esse inibidor apresenta dois dominios Kunitz-BPTI, massa molecular teorica de aproximadamente 16 kDa. O BmKK91 recombinante foi expresso em levedura P. pastoris, apresentando alto nivel de expressao. O inibidor foi purificado com uma unica etapa, em cromatografia de troca ionica. O inibidor purificado inibiu as serinoproteases tripsina, calicreina pancreatica porcina (PPK) e calicreina plasmatica humana (HuPK) (Ki = 0,2 nM, 300 nM e 847 nM, respectivamente). O BmKK91 purificado apresentou massa molecular de 13 kDa por SDS-PAGE, no entanto a massa molecular obtida por espectrometria de massa MALDI TOF esta de acordo com a massa molecular teorica esperada de 16,3 kDa. As perspectivas deste trabalho serao a caracterizacao de BmKK91 sobre calicreinas teciduais humanas que sao enzimas importantes em processos fisiopatologicos como: tumores e sua progressao e avaliacao do potencial vacinal de BmKK91 em bovinos.pt_BR
dc.description.sourceBV UNIFESP: Teses e dissertações
dc.format.extent71 f.
dc.identifier.citationABREU, Patrícia de Andrade. Clonagem, expressão e caracterização de inibidor de calicreína tecidual do tipo Kunitz presente em intestino de carrapato Rhipicephalus(Boophilus) microplus. 2013. 71f. Dissertação (Mestrado em Biologia Molecular) – Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo. São Paulo, 2013.
dc.identifier.filePatricia_Abreu_Mestrado_Dissertação_ Final - PDF A.pdf
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/22938
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.subjectRhipicephaluspt_BR
dc.subjectCarrapatospt_BR
dc.subjectIxodidaept_BR
dc.subjectCalicreínaspt_BR
dc.subjectInibidores de Serino Proteinasept_BR
dc.subjectINTESTINOpt_BR
dc.subjectAprotininapt_BR
dc.titleClonagem, expressão e caracterização de um inibidor de calicreína tecidual do tipo Kunitz presente em intestino de carrapato Rhipicephalus (Boophilus) micropluspt_BR
dc.title.alternativeCloning, expression and characterization of a Kunitztype tissue kallikrein inhibitor from midgut of the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplusen
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)pt_BR
unifesp.graduateProgramCiências Biológicas (Biologia Molecular)
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