Efeito dos processos do cultivo celular de células-tronco endometriais humanas e sua influência na taxa gestacional de murinos submetidos à transferência embrionária
| dc.contributor.advisor | Lo Turco, Edson Guimarães [UNIFESP] | |
| dc.contributor.advisor-co | Barretto, Letícia Siqueira de Sá [UNIFESP] | |
| dc.contributor.advisor-coLattes | http://lattes.cnpq.br/8335307682492956 | |
| dc.contributor.advisorLattes | http://lattes.cnpq.br/0251394799200508 | |
| dc.contributor.author | Rochetti, Raquel Cellin [UNIFESP] | |
| dc.contributor.authorLattes | http://lattes.cnpq.br/5659059615745740 | |
| dc.contributor.institution | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) | |
| dc.coverage.spatial | São Paulo | |
| dc.date.accessioned | 2019-06-19T14:58:06Z | |
| dc.date.available | 2019-06-19T14:58:06Z | |
| dc.date.issued | 2017-12-05 | |
| dc.description.abstract | As células-tronco vêm sendo fortemente estudadas devido ao seu papel terapêutico. No ambiente uterino, as células-tronco endometriais (EnMSC) são participantes ativas da implantação embrionária atuando como imunomoduladoras dos processos inflamatórios decorrentes desse evento, porém o bom funcionamento e a quantidade dessas células podem influenciar no sucesso de adesão do embrião ao útero. Em terapias celulares, é comum a manipulação in vitro das células-tronco a fim de expandir e/ou armazenar as células para futuras aplicações, porém, processos in vitro podem interferir na qualidade das células influenciando o resultado final do tratamento. Desse modo, o objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos dos processos do cultivo celular das EnMSC e observar a influência do transplante dessas células na taxa gestacional de murinos submetidos à transferência embrionária. Para isso, foram coletados tecidos endometriais de 5 voluntárias, isolados e cultivados in vitro para expansão das EnMSC até a terceira passagem. As EnMSC foram caracterizadas e avaliadas quanto ao crescimento celular e à peroxidação lipídica. Além disso, foi avaliado o perfil metabolômico presente no meio de cultivo condicionado. Em seguida, embriões murinos em fase de blastocisto foram transferidos para camundongas, com e sem o acréscimo de 1x105 células em cada lado do útero. Após o período gestacional foi avaliado a taxa de prenhez, a quantidade de camundongos nascidos e peso ao nascer. Como resultado, pudemos observar que em passagens baixas as EnMSC mantêm um padrão de crescimento in vitro similar entre as passagens, sem alteração no estresse oxidativo. Através da análise metabolômica foi observado um perfil metabólico diferenciado entre as passagens pré e pós-congelamento, de forma que a passagem pós-congelada teve maior abundancia de esfingosina e esfingosina-1-fosfato. Já na transferência embrionária, foi observado estresse das camundongas receptoras acompanhado de ato canibal, além disso, não foi observada diferença significante quanto à taxa de prenhez, número de nascidos e peso ao nascer. Assim, de acordo com os resultados foi possível concluir que o padrão de cultivo utilizado nesse estudo é viável para expansão in vitro das EnMSC e que o congelamento dessas células altera seu perfil metabólico, embora esses fatores não tenham influenciado na taxa de implantação de embriões transplantados às camundongas. | pt_BR |
| dc.description.abstract | Stem cells have been strongly studied because of their therapeutic role. In the uterine environment, endometrial mesenchymal stem cells (EnMSC) are active participants of the embryo implantation acting as immunomodulators of the inflammatory processes resulting from this event, but the good functioning and quantity of these cells can influence the success of embryo adhesion to the uterus. In cell therapies is common the in vitro manipulation of stem cells in order to expand and / or store cells for future applications, however in vitro processes may interfere with cell quality influencing the end result of the treatment. Thus, the aim of this study was to evaluate the effects of the cell culture processes of EnMSC and to observe the influence of the transplantation of these cells on the murine gestational rate submitted to embryo transfer. For this, endometrial tissues were collected from 5 volunteers, isolated and cultured in vitro to expand the EnMSC until the third passage. EnMSC were characterized and evaluated for cell growth and lipid peroxidation. In addition, the metabolomic profile present in the conditioned culture medium was evaluated. Then, murine embryos in the blastocyst stage were transferred to mice, with and without the addition of 1x105 cells on each side of the uterus. After the gestational period, the pregnancy rate, the number of mice born and the birth weight were evaluated. As a result, we could observe that in low passages the EnMSC maintains a pattern of similar in vitro growth between passages, without alteration in oxidative stress. Through the metabolomic analysis, a metabolic profile differentiated between the pre and post-freeze passages was observed, so that the post-frozen passage had a greater abundance of sphingosine and sphingosine-1-phosphate. In the embryonic transfer, stress of the recipient mice was observed accompanied by a cannibal act. In addition, no significant difference was observed in the pregnancy rate, number of births and birth weight. Thus, according to the results it was possible to conclude that the culture standard used in this study is feasible for the in vitro expansion of EnMSC and that the freezing of these cells changes its metabolic profile, although these factors did not influence the implantation rate of transplanted embryos to the mice. | en |
| dc.description.source | Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2017) | |
| dc.description.sponsorship | Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) | |
| dc.format.extent | 61 p. | |
| dc.identifier | https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5687412 | |
| dc.identifier.citation | ROCHETTI, Raquel Cellin. Efeito dos processos do cultivo celular de células-tronco endometriais humanas e sua influência na taxa gestacional de murinos submetidos à transferência embrionária. 2017. São Paulo, [61] p. Tese (Doutorado em Medicina: urologia) - Escola Paulista de Medicina (EPM), Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2017. | |
| dc.identifier.uri | http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50579 | |
| dc.language.iso | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.subject | Células-tronco | pt_BR |
| dc.subject | Endométrio | pr_BR |
| dc.subject | Criopreservação | pt_BR |
| dc.subject | Metabólitos | pt_BR |
| dc.subject | Transferência embrionária | pt_BR |
| dc.subject | Implantação do embrião | pt_Br |
| dc.subject | Muridae | pt_BR |
| dc.subject | Stem cells | en |
| dc.subject | Endometrium | en |
| dc.subject | Cryopreservation | en |
| dc.subject | Metabolites | en |
| dc.subject | Embryo transfer | en |
| dc.subject | Embryo implantation | en |
| dc.subject | Muridae | en |
| dc.title | Efeito dos processos do cultivo celular de células-tronco endometriais humanas e sua influência na taxa gestacional de murinos submetidos à transferência embrionária | pt_BR |
| dc.title.alternative | Effect of the cell culture process of human endometrial stem cells and their influence on murine gestational rate submitted to embryo transfer | en |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
| unifesp.campus | Escola Paulista de Medicina (EPM) | |
| unifesp.graduateProgram | Medicina (Urologia) | |
| unifesp.knowledgeArea | Reprodução humana e andrologia | |
| unifesp.researchArea | Estudo do desenvolvimento embrionário, de células-tronco embrionárias e mesenquimais e de células de pluripotência induzida |
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